我國梨腐爛病菌致病力分化分析及不同梨種質(zhì)資源的抗病性鑒定.pdf

1、梨腐爛病是梨的重要枝干病害，可導(dǎo)致樹勢衰弱、果實產(chǎn)量下降，嚴重發(fā)生時甚至造成毀園，而且因缺乏有效的防治方法，目前病情仍在不斷擴大，對梨產(chǎn)業(yè)造成嚴重威脅。本研究主要進行了我國梨腐爛病菌致病力的分化分析及差異菌株的轉(zhuǎn)錄組測序，并對不同種質(zhì)資源的抗病性進行了鑒定，可為有效控制病害的蔓延加重、保障我國梨的安全生產(chǎn)提供參考依據(jù)，取得的結(jié)果如下:
　　1.對豐水梨的離體枝條、葉片、嫩梢和果實分別采用不同方法造成傷口后接種梨腐爛病菌比較致病表現(xiàn)

2、，并用致病力已知的菌株在豐水和康德梨上對其測定效果進行驗證。研究結(jié)果顯示:枝條經(jīng)環(huán)割、打孔、10針刺傷及燙傷后打孔方式接種的發(fā)病率均為100％，而經(jīng)芽痕、燙傷和3針刺傷方式接種的發(fā)病率分別為15％、40％和55％，且前四種接種方式病斑顯著大于后三種接種方式;葉片經(jīng)1針刺傷、3針刺傷和6針刺傷處理產(chǎn)生的病斑間存在顯著性差異;嫩梢和果實采用不同方式接種的病斑間無顯著性差異。但在豐水梨和康德梨上對篩選到的不同組織的接種方式驗證發(fā)現(xiàn)，各菌株只有

3、在枝條經(jīng)打孔接種后產(chǎn)生的病斑的顯著性差異與已知致病力菌株的強弱相吻合。結(jié)果表明采用枝條打孔接種的方法測定效果快速、穩(wěn)定，可作為梨腐爛病菌室內(nèi)致病力的快速測定方法。
　　2.利用枝條打孔方法將來源于我國14個省市、5個梨系統(tǒng)的91份梨腐爛病純化菌株分別在阿巴特（西洋梨）、豐水（砂梨）、玉露香（白梨）、南果梨（秋子梨）和庫爾勒香梨（新疆梨）5個品種上接種，分析梨腐爛病菌株的致病力分化與其地域、系統(tǒng)來源間的相關(guān)性。結(jié)果表明:不同來源的梨

4、腐爛病菌株接種不同梨品種的病斑大小均存在顯著性差異，且同一菌株接種不同梨品種的病斑大小程度也有異。根據(jù)其綜合致病強弱可將所有菌株劃分為3個致病類型，其中強致病類型菌株16份，占17.6％;中致病類型菌株70份，占76.9％;弱致病力菌株5份，占5.5％。且不同地域和系統(tǒng)來源的梨腐爛病菌株間致病類型的分布比例也存在明顯的差異。
　　3.采用第二代測序技術(shù)，將上述梨腐爛病菌致病力測定中篩選到的致病力存在明顯差異的菌株F-HN-6和F-

5、HN-2a-1的總RNA進行轉(zhuǎn)錄組測序。結(jié)果顯示，強致病力菌株F-HN-6相對弱致病力菌株F-HN-2a-1存在6323個差異表達基因，其中上調(diào)表達基因2816個，下調(diào)表達基因3507個。對差異表達基因的GO功能分類結(jié)果表明與氧化還原過程、催化過程及碳水化合物代謝過程相關(guān)的基因所占數(shù)目較多。KEGGPathway顯著性富集分析表明，與代謝過程、次生代謝物合成過程、淀粉和蔗糖的代謝過程相關(guān)的基因顯著富集。
　　4.采用離體枝條分生孢

6、子懸浮液和菌絲塊接種測定211份梨種質(zhì)資源對腐爛病的抗性，結(jié)果顯示:不同種質(zhì)資源對梨腐爛病菌的侵入和擴展的抵抗均存在差異，抗侵入的占17.5％，抗擴展的占35.1％;同一種質(zhì)資源對病菌侵入與擴展的抵抗之間也有異，對病菌侵入和擴展抵抗一致的占30.3％，不一致的占69.7％;所有供試材料對病菌侵入和擴展均為高抗(HR/HR)的占1.4％，抗病（R/R）的占4.7％，中等(M/M)的占12.3％，感病(S/S)的占10.9％，高感(HS/H