狂犬病病毒街毒株DRV-SX-09犬感染模型的建立.pdf

1、狂犬病是由狂犬病病毒(Rabies virus，RABV)引起的一種急性、接觸性、高致死率人畜共患傳染病。該病主要侵害機(jī)體的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system，CNS)。它可以分為狂躁型和麻痹型兩種，其中以狂躁、恐水及流涎等臨床癥狀為代表的狂躁型狂犬病最為常見。RABV幾乎能夠感染所有溫血?jiǎng)游?，呈世界性流行，一旦發(fā)病，其死亡率高達(dá)100％。迄今為止，狂犬病仍然是影響全球公共衛(wèi)生安全的因素之一，它不僅每年引起60，

2、000左右的人死亡，而且給全世界造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
　　暴露前后的免疫接種是預(yù)防和控制狂犬病的主要措施，但是近些年來(lái)，對(duì)犬的管理放松了警惕、流浪犬以及野生動(dòng)物的入侵，使狂犬病再度流行。RABV的致病機(jī)制尚不清楚，且對(duì)犬的RABV街毒株模型研究甚少，嚴(yán)重的制約了RABV致病機(jī)理研究以及新型疫苗的研制與開發(fā)。因此，亟需建立規(guī)范可靠、可重復(fù)的犬的狂犬病感染模型。
　　鑒于此，本試驗(yàn)通過(guò)使用中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究

3、所涂長(zhǎng)春研究員分離到的狂犬病街毒(Zhu et al 2011)接種6周齡的比格犬，飼養(yǎng)觀察3個(gè)月，建立犬的感染模型，并對(duì)此模型進(jìn)行評(píng)價(jià)研究。具體研究結(jié)果如下:
　　1、比格犬接種狂犬病病毒街毒株DRV-SX-09后11天左右開始出現(xiàn)臨床癥狀，具體表現(xiàn)為厭食，精神不振，背毛逐漸失去光澤，靜臥，唾液分泌量增加，恐水，逐步出現(xiàn)麻痹、咽肌痙攣等癥狀，而對(duì)照組比格犬表現(xiàn)正常。
　　2、RT-PCR檢測(cè)唾液結(jié)果顯示:比格犬接種病毒出現(xiàn)

4、臨床癥狀以后，9只犬中3只唾液呈陽(yáng)性。
　　3、RT-PCR檢測(cè)病毒在組織器官中的分布情況:在舌頭、腎上腺、心臟、小腸、頸部淋巴結(jié)及角膜呈陽(yáng)性。
　　4、犬血清和腦脊液生化測(cè)定結(jié)果顯示:犬的外周血白細(xì)胞的計(jì)數(shù)(WBC)升高或中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(NEU)升高，WBC≧17.73×109個(gè)/L，平均值為23.74×109個(gè)/L，NEU≧13.03×109個(gè)/L，平均值為17.40×109個(gè)/L。腦脊液中的總蛋白(TP)升高明顯，TP

5、最高值為5.1g/L。
　　5、熒光抗體中和實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:犬發(fā)病后與發(fā)病前相比，犬發(fā)病后血液及腦脊液中的中和抗體水平略微升高，但是沒有明顯的變化，且所有的中和抗體都低于0.5IU/mL。
　　6、發(fā)病犬的病理切片結(jié)果顯示有典型的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，神經(jīng)細(xì)胞水腫及腦實(shí)質(zhì)出血，但沒有檢測(cè)到內(nèi)基小體。
　　7、免疫組化結(jié)果顯示:犬的海馬和唾液腺中分布著大量的病毒，犬的小腦、大腦皮層和腦干中也分布一定的病毒。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)