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1、本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用蒸餾水、丙酮、乙醇等作為浸提劑浸提西芹腐根及根際區(qū)物,在培養(yǎng)基條件下運(yùn)用不同浸提液處理黃瓜枯萎病菌1次,后繼代培養(yǎng)至第六代,分別測(cè)定每一代不同處理病菌的菌落直徑、田間致病力大小,同時(shí),測(cè)定每一代病菌產(chǎn)生鐮刀菌酸的含量、病菌細(xì)胞壁降解酶活性以及菌體內(nèi)防御酶活性的變化,以探求篩選黃瓜枯萎病弱毒菌株。主要結(jié)果如下:
1、分別用西芹腐根及根際區(qū)物蒸餾水、丙酮、乙醇浸提劑處理黃瓜枯萎病菌,在第一代各菌落化感效果最為明顯,隨著繼
2、代培養(yǎng)代數(shù)的增加,不同處理與對(duì)照、空白對(duì)照之間差距逐漸減小。至第六代,西芹腐根經(jīng)處理后病情指數(shù)表現(xiàn)為下降的趨勢(shì)(分別為:38.67%、37.83%、32.00%);根際經(jīng)處理后病情指數(shù)總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。(分別為:39.50%、44.50%、36.17%)。同時(shí)經(jīng)西芹腐根及根際區(qū)物不同浸提液處理一次后,繼代培養(yǎng)至第六代,未得到黃瓜枯萎病弱毒菌株。而各處理在六代培養(yǎng)過程中總體的病情指數(shù)表現(xiàn)為先下降后上升的趨勢(shì)。
2、用西
3、芹腐根及根際區(qū)物蒸餾水、丙酮、乙醇浸提劑處理FOC1代,在對(duì)菌落培養(yǎng)6代過程中,分別測(cè)定了每代菌落分泌鐮刀菌酸的含量,鐮刀菌酸含量在菌落培養(yǎng)過程中總體表現(xiàn)為先逐漸減小,后緩慢增大的趨勢(shì),在培養(yǎng)過程中,西芹腐根蒸餾水、丙酮、乙醇浸提液處理后鐮刀菌酸產(chǎn)量與空白對(duì)照相較,減少范圍分別為:4.44%-20.62%、8.37%-28.28%、6.92%-26.82%;根際蒸餾水、丙酮、乙醇浸提液處理后鐮刀菌酸產(chǎn)量與空白對(duì)照相較,減少范圍分別為:3
4、.31%-23.16%、2.89%-21.26%、7.23%-27.33%。在繼代培養(yǎng)的過程中,黃瓜枯萎病菌分泌細(xì)胞壁降解酶活性均表現(xiàn)為先下降,后稍上升,西芹腐根蒸餾水、丙酮、乙醇浸提液處理后菌體內(nèi)果膠酶、纖維素酶、β-葡萄糖苷酶的活性分別較空白對(duì)照下降:4.86%、3.81%、2.54%;54.98%、40.12%、24.69%;15.15%、11.61%、6.78%。根際蒸餾水、丙酮、乙醇不同浸提液在處理后菌體內(nèi)果膠酶、纖維素酶、β
5、-葡萄糖苷酶的活性分別較空白對(duì)照下降:3.03%、5.71%、3.88%;64.04%、62.50%、37.42%;9.78%、17.77%、15.03%。在實(shí)驗(yàn)過程中,將低鐮刀菌酸的含量與細(xì)胞壁降解酶活性的變化作為輔助篩選條件。
3、用西芹腐根、腐根際區(qū)物蒸餾水、丙酮、乙醇浸提液,在培養(yǎng)基條件對(duì)黃瓜枯萎病菌進(jìn)行1代處理,然后連續(xù)多代(6代)培養(yǎng),并對(duì)每代黃瓜枯萎病菌體內(nèi)POD、SOD、CAT三種酶活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明,西芹
6、腐根蒸餾水、丙酮、乙醇不同浸提液在處理后POD、SOD、CAT三種酶活性與CK空白相比分別從1代的28.27%、25.13%、31.73%;52.93%、47.83%、56.67%;6.47%、6.50%、6.32%下降至6代的10.20%、6.73%、8.47%;9.04%、12.64%、8.72%;4.44%、3.52%、5.50%。根際蒸餾水、丙酮、乙醇不同浸提液在處理后POD、SOD、CAT三種酶活性與CK空白相比分別從1代的3
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