提高烤煙鉀含量的施肥措施及機理研究.pdf

1、硼是植物必需的微量營養(yǎng)元素。甘藍型油菜是我國主要的油料作物之一，對缺硼敏感。本研究利用同源克隆法在甘藍型油菜中分離得到6個擬南芥硼轉運子基因NIP5;1的同源基因，并對硼高效和低效品種中NIP5;1同源基因的表達譜進行了分析。獲得的主要研究結果如下：
　　 1.從甘藍型油菜硼高效品種青油10號和硼低效品種Westar10中分別克隆得到6個擬南芥NIP5;1的同源基因，并分別命名為BnNIP5;1-1a、BnNIP5;1-1c、B

2、nNIP5;1-2a、BnNIP5;1-2c、BnNIP5;1-3a和BnNIP5;1-3c，統(tǒng)稱為BnNIP5;1s。全基因組的序列分析結果顯示BnNIP5;1s的差異主要集中在翻譯起點上游-1至-100bp和第一個外顯子中。不同品種同一基因序列相似性介于91.21％和99.99％之間。通過生物信息學比較發(fā)現(xiàn)青油10號和Westar10中BnNIP5;1同源基因的氨基酸序列一致。對6個BnNIP5;1s進行聚類分析，6個BnNIP5;

3、1s可分為兩組，一組與白菜A02和甘藍C02上的NIP5;1同源基因更加相似，另一組與白菜A03和甘藍C03上的NIP5;1同源基因更加相似。序列分析結果顯示，在6個BnNIP5;1s中均含有擬南芥NIP5;15'UTR區(qū)域控制NIP5;1基因表達的功能區(qū)。
　　 2.利用半定量PCR對青油10號和Westar10不同部位BnNIP5;1s的表達進行了分析，結果顯示，缺硼處理硼高效品種青油10號和硼低效品種Westar10根中B

4、nNIP5;1s基因均上升表達，但在葉中幾乎檢測不到；并且，兩個硼水平下青油10號根中BnNIP5;1的表達要高于Westar10。根系中BnNIP5;1s的表達與缺硼時硼的高效吸收可能密切相關。與青油10號比較，硼水平降低時Westar10BnNIP5;1s的表達更加快速，但時間相對較短。低硼脅迫下青油10號和Westar10BnNIP5;1s的表達量隨脅迫時間均表現(xiàn)出上升、下降、上升、下降的趨勢，這表明，油菜植株需維持一定的硼含量，

5、當植株硼含量降低時，可通過BnNIP5;1s的上升表達吸收一定量的硼，維持細胞中硼的含量，然后BnNIP5;1s表達量下降；當細胞內硼量不夠時，BnNIP5;1再次上升表達，加快根系對硼的吸收。
　　 3.利用熒光定量PCR對青油10號和Westar10低硼脅迫不同時間BnNIP5;1s的表達進行分析，結果表明，硼高效品種青油10號和硼低效品種Westar10不同時間點BnNIP5;1-1a表達量均要高于其它BnNIP5;1s，

6、在低硼脅迫忍耐中可能起著主要作用；在不同時間點BnNIP5;1-3c表達量均較低，說明該基因受缺硼誘導的影響較小。除BnNIP5;1-1a，其它BnNIP5;1s基因在低硼脅迫后不同時間點表達量均存在顯著差異，說明不同的BnNIP5;1s在低硼脅迫后不同時間發(fā)揮作用。表達量較高的BnNIP5;1-1a、BnNIP5;1-3a、BnNIP5;1-2a和BnNIP5;1-2c的表達量均與半定量PCR中BnNIP5;1s總的表達量趨勢一致，呈