mitfa基因在觀賞魚體色形成中的功能研究.pdf

1、觀賞魚因其絢麗多彩的體色而深受歡迎，色素細胞的發(fā)生、分化、遷徙及物質(zhì)運輸對于研究觀賞魚體色形成及發(fā)育有重要意義。通過對魚類體色發(fā)育和色素基因的遺傳機制研究，可以在育種和人工篩選中有效地預(yù)測及控制觀賞魚的體色。在神經(jīng)嵴細胞分化成黑色素細胞的過程中，mitfa基因作為其最早的發(fā)生標(biāo)志之一，對黑色素細胞的發(fā)育及其分化起著核心調(diào)控作用。本文主要以重要淡水觀賞魚——錦鯉為材料，從錦鯉體色發(fā)育、色素細胞細胞學(xué)、mitfa基因表達分析等方面進行研究。

2、本文以錦鯉為材料，研究mitfa基因在4種不同類型錦鯉和錦鯉早期體色發(fā)育時期的表達，進一步探討mitfa基因在魚類體色形成中的作用。
　　首先，根據(jù)已報道的斑馬魚mitfa基因cDNA序列，克隆了烏鯉mitfa基因cDNA全長。mitfa基因cDNA全長1634bp，編碼412個氨基酸。錦鯉與斑馬魚mitfa基因氨基酸同源性達92.9％。
　　然后觀察了四種不同體色類型錦鯉的色素細胞組成及其分布。黑白錦鯉含有黑色素細胞、黃色

3、素細胞和虹彩細胞三種色素細胞;三色錦鯉則含有黑色素細胞、紅色素細胞、黃色素細胞和虹彩細胞四種色素細胞;紅白錦鯉含有紅色素細胞、黃色素細胞和虹彩細胞;黃金錦鯉僅含有黃色素細胞和虹彩細胞兩種色素細胞類型。進一步對三色錦鯉早期體色發(fā)育進行了跟蹤觀察，發(fā)現(xiàn)三色錦鯉3dph(3 days past hatch)在背部出現(xiàn)黃色素細胞，然后顏色加深并且向尾部和腹部遷移;12dph在頭部出現(xiàn)黑色素細胞，然后向背部和尾鰭遷徙;15dph出現(xiàn)腹部虹彩細胞;

4、27dph全身黑色素細胞逐漸聚攏，黑色素細胞集中分布在將來發(fā)育成黑色斑塊的部位，黃色素細胞顏色加深。
　　最后，運用RT-PCR技術(shù)檢測了mitfa基因在不同體色錦鯉及錦鯉早期體色發(fā)育中的表達。結(jié)果顯示，mitfa基因在黑白錦鯉和三色錦鯉皮膚中有較高量的mRNA表達，值得關(guān)注的是在無黑色素細胞的紅白錦鯉和黃金錦鯉皮膚中mitfa基因也有表達。同時對三色錦鯉體色發(fā)育不同時期mitfa基因表達進行了分析，結(jié)果表明mitfa基因在三色錦