石蒜屬植物雜交育種技術(shù)的研究.pdf

1、本研究結(jié)合石蒜屬植物種間及種內(nèi)雜交試驗(yàn)、分子標(biāo)記技術(shù)和離體快繁技術(shù)進(jìn)行雜交種的培育，為縮短石蒜新品種的選育周期奠定基礎(chǔ)，試驗(yàn)結(jié)果表明如下：
　　 ⑴以離體萌發(fā)法測定不同倍性和天然雜交種的石蒜屬植物花粉生活力，結(jié)果表明二倍體的花粉萌發(fā)率高，三倍體及雜交種的花粉萌發(fā)率低。對花粉貯藏性狀的研究得出，花粉活力在常溫下，可保持一周;4℃貯藏可保持2個月左右;-20℃貯藏活力可保持半年左右。
　　 ⑵以石蒜屬不同的二倍體植物作為親本

2、，設(shè)計12個雜交組合試驗(yàn)，結(jié)果表明雜交組合的結(jié)實(shí)率幾乎都在50％以上，但雜交的親和率卻幾乎都在40％以下。關(guān)于雜交親和率較低的石蒜×中國石蒜的不親和性研究表明乳突細(xì)胞、花粉管和花柱通道細(xì)胞中胼胝質(zhì)的不規(guī)則沉積，以及花粉粒在柱頭上萌發(fā)數(shù)量少且異常是引起雜交結(jié)實(shí)率較低的主要原因。
　　 ⑶分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行種質(zhì)鑒定：建立了石蒜屬植物的SCoT-PCR體系:DNA模板2 ng·μL-1，引物0.125μmol·L-1,dNTPs0.2

3、mmol·L-1,Mg2+3.0 mmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.0 U；利用SSR標(biāo)記和SCoT標(biāo)記分析石蒜屬植物種間和種內(nèi)的遺傳多樣性，SSR標(biāo)記將11種石蒜聚為3大類，其中乳白石蒜單獨(dú)一類，并選出17號SSR引物用于石蒜雜交種的早期鑒定;SCoT標(biāo)記將11種石蒜聚為4類，其中換錦花單獨(dú)一類，其他聚類結(jié)果與SSR相似。
　　 ⑷石蒜屬植物離體快繁體系的建立：以石蒜和中國石蒜的雙鱗片為材料，建立了其離體快繁體系，選出

4、不同階段的最適培養(yǎng)基，誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+6-BA1 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1;增殖培養(yǎng)基:MS+6-BA0.5 mg·L-1+2,4-D1 mg·L-1;壯苗培養(yǎng)基:MS+6-BA1 mg·L-1+2，4-D0.5 mg·L-1;生根培養(yǎng)基:1/2MS+NAA0.5 mg·L-1；以雜種胚為材料建立離體快繁體系，選出愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基:MS+6-BA1.0 mg.L-1+2，4-D0.5 mg.L-1;愈傷組織誘導(dǎo)