課程設(shè)計(jì)---生物農(nóng)藥的研究及應(yīng)用

1、<p><b>　　課程設(shè)計(jì)</b></p><p>　　生物農(nóng)藥的研究及應(yīng)用</p><p><b>　　作者： </b></p><p><b>　　指導(dǎo)教師： </b></p><p>　　完成日期：2012.7.4</p><p>　　

2、生物農(nóng)藥的研究及應(yīng)用</p><p><b>　　摘要：</b></p><p>　　綜述了我國生物農(nóng)藥研發(fā)概況，介紹了生物農(nóng)藥的概念，重點(diǎn)闡述了生物農(nóng)藥的分類及應(yīng)用，分析了生物農(nóng)藥的發(fā)展方向及其應(yīng)用現(xiàn)狀，并對我國生物農(nóng)藥的發(fā)展前景進(jìn)行了展望。</p><p>　　關(guān)鍵詞：生物農(nóng)藥；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)；應(yīng)用；前景</p><p>

3、<b>　　引言：</b></p><p>　　生物農(nóng)藥主要是指以植物、動物、微生物等產(chǎn)生的具有農(nóng)用生物活性的次生代謝產(chǎn)物開發(fā)的農(nóng)藥，是用來防治病、蟲、草等有害生物的生物活體及其代謝產(chǎn)物和轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物，并可以制成商品上市流通的生物源制劑，包括細(xì)菌、病毒、真菌、線蟲、植物生長調(diào)節(jié)劑和抗病蟲草害的轉(zhuǎn)基因植物等。生物農(nóng)藥具有選擇性強(qiáng)、對人畜環(huán)境安全、原料來源廣泛且不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)【1】，已成為全

4、球農(nóng)藥發(fā)展的新趨勢。特別是近代分子生物學(xué)技術(shù)、基因工程等逐步滲入到生物農(nóng)藥生產(chǎn)中之后，各國對生物農(nóng)藥的發(fā)展更加重視，在今后相當(dāng)長一段時間內(nèi)，生物農(nóng)藥將成為今后農(nóng)藥發(fā)展的一個重要方向。傳統(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥一般毒性較高，活性較低，使用量較大，對環(huán)境影響較大；而且一般采用乳油、可濕性粉劑等傳統(tǒng)劑型，具有采用大量芳烴溶劑和粉塵大等不足，對環(huán)境及施用人員影響大；傳統(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥的大量使用引起的農(nóng)藥殘留問題還會造成其毒性在生態(tài)系統(tǒng)中的富集，不僅污染環(huán)境，還會對

5、各級生物造成危害。長期以來，大量使用化學(xué)農(nóng)藥使生態(tài)平衡遭到嚴(yán)重破壞?；瘜W(xué)農(nóng)藥的大量使用除引起人畜的直接中毒死亡外，還由于它在土壤和作物上的殘留，對土壤、地下水、河流、湖泊造成污染，尤其給后代的生存、健康帶來危險(xiǎn)。使</p><p><b>　　一．生物農(nóng)藥的定義</b></p><p><b>　　1.定義： </b></p>&

6、lt;p>　　生物農(nóng)藥是指直接利用生物產(chǎn)生的天然物質(zhì)或生物活體作為農(nóng)藥，稱為生物源農(nóng)藥。也可以說是利用生物資源開發(fā)的農(nóng)藥，如動物源、植物源、微生物源等天然源農(nóng)藥。生物農(nóng)藥包括了地球上所有類別的生物。廣義概念還包括按天然物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)或類似衍生結(jié)構(gòu)人工合成的農(nóng)藥。</p><p>　?。?）生物源天然產(chǎn)物農(nóng)藥</p><p>　　即生物產(chǎn)生的天然物質(zhì)，是指以植物、動物、微生物等產(chǎn)生的具

7、有農(nóng)用生物活性的次生代謝產(chǎn)物開發(fā)的農(nóng)藥，不包括生物活體。 </p><p><b>　　（2）生物化學(xué)農(nóng)藥</b></p><p>　　包括信息素、激素、天然的昆蟲或植物生物調(diào)節(jié)劑、驅(qū)避劑等。必需符合下列兩個條件：</p><p>　　1）對防治對象沒有直接毒性而只有調(diào)節(jié)生長，干擾交配或引誘等的特殊作用。</p><p>

8、;　　2）必須是天然化合物。 </p><p><b>　　(3)次生代謝物質(zhì)</b></p><p>　　其來源和性質(zhì)與基礎(chǔ)代謝產(chǎn)物如核酸、蛋白質(zhì)等有所不同，是復(fù)雜的分支代謝途徑的最后產(chǎn)物，大多數(shù)不直接參與維持產(chǎn)生者的生長發(fā)育和生殖有關(guān)的原始生化過程。80%的次生代謝產(chǎn)物來自植物。植物中次生代謝物質(zhì)的產(chǎn)生，是生物間，特別是植物和昆蟲之間協(xié)同進(jìn)化的結(jié)果。處于逆境壓力

9、下的任何物種都面臨3種選擇，即適應(yīng)、遷移或滅絕。</p><p>　　植物 次生代謝物質(zhì)特點(diǎn):</p><p>　　1) 次生代謝物質(zhì)對昆蟲或病原菌的防御功能具有選擇性，一種(或一類)次生代謝物只能防御某些種類的昆蟲或病原菌，而不是所有的昆蟲和病原菌。</p><p>　　2) 次生代謝物質(zhì)是植物內(nèi)源物，它們本身是植物體的一部分，因此易于在自然界的大循環(huán)中降解。&l

10、t;/p><p>　　3) 植物在進(jìn)化過程中所經(jīng)受逆境壓力的多樣性和復(fù)雜性，導(dǎo)致所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物的多樣性和復(fù)雜性。</p><p>　　二、生物農(nóng)藥分類及劑型</p><p><b>　　1.分類</b></p><p>　　(1)微生物農(nóng)藥: 是利用微生物及其代謝物或基因產(chǎn)生及其表達(dá)的各種生物活性成分，制備用于防治植

11、物病蟲害、環(huán)衛(wèi)昆蟲、雜草、鼠害，以及調(diào)節(jié)植物生長的制劑的總稱。</p><p>　　(2)植物源農(nóng)藥: 用來源于不同種類植物，具有抑制有害生物，如殺蟲劑、殺菌劑、除草劑及植物生長調(diào)節(jié)等活性的次生代謝物或提取其有效成分，加工而成的藥劑。 </p><p>　　? (3)動物源農(nóng)藥 : 指動物產(chǎn)生的對有害生物具有毒殺作用的天然活性物質(zhì)。</p><p>　　?

12、 (4)轉(zhuǎn)基因生物農(nóng)藥:　指利用生物技術(shù)，按照人的愿望，在不同物種之間轉(zhuǎn)移并表達(dá)不同作用目的基因的生物。</p><p><b>　　2.生物農(nóng)藥劑型</b></p><p>　　包括：粉劑、可濕性粉劑、水劑、懸浮劑、乳油等，比較特殊的是還包括卵卡。卵卡是利用被天敵昆蟲寄生的害蟲的卵或被天敵昆蟲寄生的人造卵制成的。</p><p>　　?生物農(nóng)

13、藥在劑型選擇的過程中，必須考慮到其自身的特點(diǎn)，如對光線、溫度、濕度的要求等，尤其是保持生物活體農(nóng)藥活性，以充分發(fā)揮藥效。在選擇助劑時還要考慮與活體微生物的相容性選擇一些特殊助劑，如防光劑、增效劑等。以蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑為例 ：</p><p><b>　?。?）懸浮劑</b></p><p>　　主要劑型之一，對環(huán)境友好。貯藏穩(wěn)定性差，在室溫下貯存時間一般不宜超過半

14、年。加入 ：</p><p>　　1)防腐劑以抑制蘇云金芽孢桿菌自身和其他微生物的活動。</p><p>　　2)紫外線防護(hù)劑保護(hù)其田間藥效，</p><p>　　3)保濕劑防止葉面霧滴干涸而使藥劑脫落，</p><p>　　4)昆蟲取食促進(jìn)劑增加昆蟲的食欲而</p><p>　　5)增效劑提高殺蟲效率等</p&

15、gt;<p><b>　　(2)微囊劑</b></p><p>　　?主要采用淀粉或面粉基質(zhì)、無機(jī)鹽作水分散劑來包裹蘇云金芽孢桿菌制成淀粉微囊劑。目前，蘇云金芽孢桿菌微膠囊制劑已開發(fā)了三種類型，</p><p>　　1)一種是加水后形成的懸液的可噴灑性制劑，；</p><p>　　2)另一種是傳統(tǒng)的顆粒劑，經(jīng)過干、濕過程后顆粒之間

16、仍保持相互分離；</p><p>　　3)第三種是粘著性顆粒劑，與水接觸后會發(fā)生部分膨脹，干燥后仍可粘著在作物葉片上。</p><p><b>　　(3)油懸劑</b></p><p>　　將蘇云金芽孢桿菌原粉懸浮于礦物油中可制備出油懸劑。油懸劑具有粘著性和展著性好、抗雨水沖刷能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。</p><p><b&

17、gt;　　(4)油煙霧劑</b></p><p>　　?將蘇云金芽孢桿菌粉劑懸浮于柴油中，采用脈沖式煙霧機(jī)進(jìn)行煙霧霧化，經(jīng)2號噴嘴（直徑2.0mm）進(jìn)行噴射，蘇云金芽孢桿菌仍保持毒力。</p><p>　　(5)紫外線防護(hù)劑型</p><p>　　?紫外線輻射對伴孢晶體結(jié)構(gòu)的破壞與活性氧的產(chǎn)生密切相關(guān)。蘇云金芽孢桿菌制劑直接與適量化學(xué)紫外線吸收劑混合，即

18、可取得防護(hù)效果。蘇云金芽孢桿菌制劑中加入木質(zhì)素及蔗糖溶液，可以防止紫外線的傷害，提高持效期。</p><p>　　三、生物農(nóng)藥的發(fā)展歷史與現(xiàn)狀</p><p>　　?在公元前的文獻(xiàn)中已有記載。 </p><p>　　?17世紀(jì)，出現(xiàn)了以煙草、松脂、除蟲菊、魚藤等植物來殺蟲 </p><p>　　?19世紀(jì)以來，生物源農(nóng)藥的開發(fā)應(yīng)用逐漸從經(jīng)驗(yàn)上

19、升到科學(xué)試驗(yàn)階段，并出現(xiàn)植物性殺蟲劑如除蟲菊、魚藤和煙草的商品化及廣泛應(yīng)用</p><p>　　?20世紀(jì)早期，微生物農(nóng)藥也悄然而生。如蘇云金桿菌</p><p>　　?20世紀(jì)40年代，農(nóng)藥發(fā)展進(jìn)入了有機(jī)合成時代。</p><p>　　?20世紀(jì)60－70年代，對于開發(fā)相對安全的生物農(nóng)藥的需求重新受到重視 ,有一批殺菌抗生素應(yīng)運(yùn)而生 </p><

20、;p>　　?90年代，新代生物農(nóng)藥得到加速發(fā)展。</p><p>　　農(nóng)用抗生素和活體微生物農(nóng)藥已發(fā)展成重要的農(nóng)藥類型；</p><p>　　昆蟲信息素、保幼激素和植物性拒食劑、引誘劑、驅(qū)避劑等已有相當(dāng)程度的開發(fā)應(yīng)用；</p><p>　　目前，生物農(nóng)藥在世界農(nóng)藥市場所占的份額很小，1995年僅占世界農(nóng)藥市場的1.3%。</p><p>

21、;　　?在2006年全球農(nóng)藥總銷售量小幅下降的背景下，生物農(nóng)藥卻出現(xiàn)小幅攀升。</p><p>　　?2006年全球生物農(nóng)藥總銷售額約10.4 億美元，占當(dāng)年全球農(nóng)藥總銷售額的2.9%，比2005年增加5.2%</p><p><b>　　四、生物農(nóng)藥的特點(diǎn)</b></p><p><b>　　1.優(yōu)點(diǎn)：</b></

22、p><p>　　(1)大多數(shù)生物農(nóng)藥對哺乳動物毒性較低，對人畜比較安全，對環(huán)境相容性高。</p><p>　　(2)生物農(nóng)藥防治譜較窄，選擇性強(qiáng)/作用方式獨(dú)特</p><p>　　(3)對環(huán)境的壓力較小，對非靶標(biāo)生物安全。 </p><p>　　(4)不容易產(chǎn)生抗性。</p><p>　　(5)開發(fā)與登記等費(fèi)用低。 <

23、;/p><p><b>　　2.缺點(diǎn)：</b></p><p>　　(1)大多數(shù)生物農(nóng)藥作用緩慢 </p><p>　　(2)穩(wěn)定性相對較差，特別是以活體微生物為有效成分的產(chǎn)品。</p><p>　　(3)一些生物農(nóng)藥如活體生物的應(yīng)用等技術(shù)要求高，對氣候條件要求較嚴(yán)格，不利于農(nóng)民掌握。</p><p>

24、;　　(4)生產(chǎn)工藝落后、技術(shù)力量等條件薄弱、工業(yè)化生產(chǎn)難度大等，使成本相高。</p><p>　?。?）存在一定程度的安全隱患 。</p><p>　　1)天敵的安全性問題主要是對生物多樣性的影響；</p><p>　　2)轉(zhuǎn)基因作物則存在 “基因污染”和 “基因漂移”等隱患， 對人類有無致病性、致畸性， 尚不明確。</p><p>　　3

25、)抗生素類令靶標(biāo)生物產(chǎn)生抗性， 對非靶生物也具有一定的毒性。</p><p>　　3.生物農(nóng)藥研究開發(fā)的途徑：</p><p>　　1)是充分利用生物資源，開發(fā)新品種的天然產(chǎn)物農(nóng)藥；</p><p>　　2)是對有效成分及其類似化合物進(jìn)行半合成改造；</p><p>　　3)是以天然產(chǎn)物作為創(chuàng)制新農(nóng)藥的先導(dǎo)化合物模型，人工合成新農(nóng)藥。<

26、/p><p>　　4)是運(yùn)用生物工程技術(shù)從事微生物等生物農(nóng)藥的研究開發(fā)，包括運(yùn)用基因工程作為作物保護(hù)的手段。</p><p>　　五、我國生物農(nóng)藥發(fā)展現(xiàn)狀</p><p>　　出口量較大的品種依次為阿維菌素、乙烯利、赤霉素、雙丙氨膦、蘇云金桿菌。出口的主要國家是歐盟，其次是美國和阿根廷、哥倫比亞、烏拉圭、巴西等南美國家。</p><p>　　我國

27、規(guī)劃到2015年生物農(nóng)藥占所有農(nóng)藥的份額將由現(xiàn)在的10%增加到30%。</p><p>　　（1）Bt殺蟲劑及其基因改良研究取得重要進(jìn)展</p><p>　?。?）農(nóng)用抗生素達(dá)到國際先進(jìn)水平</p><p>　　主要?dú)⒕鷦┯袦缥了亍⒍嗫姑顾睾娃r(nóng)抗120、井岡霉素、中生菌素、武夷菌素和寧南霉素等。</p><p>　　殺蟲抗生素有瀏陽霉素、華光

28、霉素和阿維菌素</p><p>　?。?）植物源農(nóng)藥進(jìn)行成批量生產(chǎn)</p><p>　　印楝在海南、廣東、云南、四川等地， 非洲山毛豆在廣東雷州， 魚藤在廣東豐順， 除蟲菊在云南曲靖， 黃杜鵑在安徽 </p><p>　?。?）轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)入商品化生產(chǎn)階段</p><p>　　（5）病毒類、真菌類農(nóng)藥開發(fā)應(yīng)用</p><

29、p>　　白僵菌、木霉菌、綠霉菌、淡紫擬青霉、蟲霉和蠟蚧輪枝孢</p><p><b>　?。?）市場前景好</b></p><p><b>　　(二) 生物殺蟲劑</b></p><p><b>　　一、特點(diǎn)：</b></p><p>　　1. 害蟲不易產(chǎn)生抗藥性<

30、/p><p>　　殺蟲生物特別是微生物與昆蟲長期共同生活的過程中，適應(yīng)了昆蟲的防衛(wèi)體系，它們依靠昆蟲而生存下來</p><p><b>　　2.有較強(qiáng)的選擇性</b></p><p>　　生物殺蟲劑具有對人畜等防治目標(biāo)以外生物安全無害的特點(diǎn)。</p><p>　　3.病原體可通過病蟲或蟲尸來散布蔓延</p>&

31、lt;p>　　4.通過對病原體的選擇，可以獲得致病力強(qiáng)的品系</p><p>　　5.病原體不但能抑制目標(biāo)昆蟲， 而且能深刻影響目標(biāo)昆蟲的群體 </p><p>　　二.生物防治及檢查方法方法 </p><p><b>　　1.防治</b></p><p>　　(1）將昆蟲病原體引入到害蟲的生態(tài)環(huán)境中，使其定居、繁

32、殖，通過疾病的自然流行，將害蟲密度控制在經(jīng)濟(jì)受損的水平以下。</p><p>　　(2) 人為地大量撒施而引入病原體。即使害蟲密度小，它也能引起流行，以達(dá)到短期內(nèi)減少害蟲種群的目的。</p><p><b>　　2.檢查方法</b></p><p>　　由于病原體作用于宿主昆蟲的緩慢性。短期內(nèi)的害蟲死亡率并不能完全代表生物殺蟲劑的全部效果。農(nóng)作

33、物被害程度的估計(jì)和葉面保存程度估計(jì)，可以作為檢查其防治效果的較好方法。</p><p>　　這種檢查方法不僅適用于長期防治，對短期防治也適用。</p><p><b>　　3.生物防治的策略</b></p><p>　　(1)長期防治--主要是應(yīng)用控制具有較高的經(jīng)濟(jì)閾限的害蟲，如森林、草原、牧場等</p><p>　　(

34、2)短期防治--它適用于控制農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)及對公眾健康很重要的那些害蟲</p><p>　　(3)綜合防治--采用將各種相容的病原體混合作用和結(jié)合化學(xué)元素殺蟲劑一起作用</p><p>　　三、影響生物殺蟲劑的因素</p><p><b>　　1、劑量和濃度</b></p><p>　　（1)、劑量--是指引起宿主死亡的實(shí)

35、際感染單位（的數(shù)量），指被宿主接觸或消化的感染單位的數(shù)量；</p><p>　　(2)濃度--是指作用于宿主（暴露于宿主），并引起死亡的感染單位的數(shù)量。指作用于宿主（暴露于宿主）而不完全被消化或接觸的感染單位的數(shù)量。</p><p>　　劑量和濃度都可以用，一般來講，劑量會更直接，濃度更為方便，應(yīng)用也更為廣泛。</p><p><b>　　2．使用時間&l

36、t;/b></p><p>　　時間是影響殺蟲效果的一個重要因素。如果害蟲未處在敏感階段，或天氣條件不適于殺蟲生物的存活或保持感染能力，那么生物殺蟲劑將不能防治害蟲。</p><p><b>　　3. 覆蓋率 </b></p><p>　　對短期防治來說，完全覆蓋顯得尤其重要。桿狀病毒、細(xì)菌、原蟲等病原微生物不像化學(xué)殺蟲劑那樣具有熏蒸等作

37、用方式，而是必須攝食來感染害蟲，特別是某些真菌和某些線蟲則必須與表皮接觸才能感染害蟲。</p><p><b>　　4． PH值的影響</b></p><p>　　水的PH值應(yīng)接近于7為好。 蘇云芽孢桿菌的δ-內(nèi)毒素（晶體蛋白）在堿性條件下均會降解，從而減低它們的毒力。 桿狀病毒的多角體能被棉花葉的堿性滲出液或露珠部份溶解，從而降低了病毒粒子的活性。</p>

38、;<p><b>　　5． 抗微生物物質(zhì)</b></p><p>　　草食性昆蟲攝入植物的種類能明顯影響它們對疾病的敏感性。很多植物產(chǎn)生的抗微生物復(fù)合物能抑制病原微生物的活力，使昆蟲的敏感性降低。也存在取食不同食物而使昆蟲的敏感性增加的現(xiàn)象。</p><p><b>　　6． 目標(biāo)害蟲 </b></p><p&g

39、t;　　害蟲的蟲齡和生理?xiàng)l件是影響生物殺蟲劑的殺蟲效果的重要因素-低齡幼蟲對病原體更敏感害蟲在其它壓力下，食物量發(fā)生改變，或種群擁擠等都有利于防治。</p><p><b>　　7． 相容性</b></p><p>　　生物殺蟲劑與化學(xué)殺蟲劑的混合物可產(chǎn)生協(xié)同或頡抗作用。因此必須逐一研究病原微生物與其它某一殺蟲劑混合的相容性以決定可否混合使用。</p>

40、<p><b>　　8． 宿主的抗性</b></p><p>　　病原體對宿主的特異性，說明昆蟲種群對病原微生物具有天然的抗性。對病原體敏感的昆蟲通過成熟免疫和環(huán)境及遺傳因素也顯示了抗性，也存在抗藥性的問題。</p><p>　　四、 生物殺蟲劑的抗性及防治策略 </p><p>　　1.害蟲對生物殺蟲劑產(chǎn)生抗性的可能性 </p

41、><p>　　在反復(fù)的選擇壓力下，害蟲可對病原體產(chǎn)生抗性。目前已確定部分害蟲對細(xì)菌和病毒類微生物病原體產(chǎn)生了遺傳性抗性。蘇云金芽孢桿菌的田間應(yīng)用產(chǎn)生抗性的唯一昆蟲是小菜蛾。盡管已發(fā)現(xiàn)長期使用生物防治害蟲會產(chǎn)生一定程度的抗性，但與化學(xué)藥劑相比生物防治產(chǎn)生的抗性要小得多。</p><p>　　2.害蟲對蘇云金芽孢桿菌的抗性 </p><p>　　（1）室內(nèi)藥劑篩選 <

42、/p><p>　　在實(shí)驗(yàn)室多代選擇壓力下，已有10余種昆蟲對B.t產(chǎn)生了抗藥性，如印度谷螟、粉斑螟、煙草夜蛾、小菜蛾、甜菜夜蛾、?；页嵋苟辍⒚乐迼钊~蟬、家蠅和黑尾果蠅等。害蟲對B.t的不同毒素蛋白會產(chǎn)生交互抗性。用B.t鲇澤變種（B.t，sub sp .aizawai）的Cry IC 蛋白對?；页嵋苟?Spodoptera ittoralis)進(jìn)行選擇，結(jié)果14代后，害蟲對B.t毒素產(chǎn)生了50倍抗性，該抗性蟲對Cry

43、IE和CryID毒素也產(chǎn)生了交互抗性。 </p><p><b>　?。?）田間抗性研究</b></p><p>　　只有幾種昆蟲在自然環(huán)境中對B.t產(chǎn)生了抗性，目前唯一確定而且抗性水平較高是小菜蛾。研究表明B.t轉(zhuǎn)基因植物可以產(chǎn)生與B.t殺蟲劑相似的抗性。</p><p>　　（3）產(chǎn)生抗性的機(jī)制</p><p>　　

44、對B.t的抗性機(jī)理主要包括：</p><p>　　1)腸壁細(xì)胞表面受體的數(shù)目下降；</p><p>　　2)使中腸內(nèi)壁細(xì)胞表面受體結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生改變；</p><p>　　3)蛋白酶失活或含量下降導(dǎo)致原毒素不能被激活為成熟毒素；</p><p>　　4)中腸內(nèi)相關(guān)解毒酶表達(dá)量增加導(dǎo)致毒素的降解；</p><p>　　5)

45、昆蟲基因自發(fā)突變。 </p><p>　　（4）抗性的監(jiān)測方法</p><p>　　1)．常規(guī)生物測定法</p><p><b>　?、賲^(qū)分劑量法　</b></p><p><b>　?、贔2篩選法 </b></p><p><b>　　③田間篩選法 </b&

46、gt;</p><p><b>　　2）分子生物學(xué)技術(shù)</b></p><p>　　DNA分子標(biāo)記(遺傳連鎖標(biāo)記) </p><p>　　(5)抗性防治的策略</p><p>　　與化學(xué)農(nóng)藥相比，害蟲對B.t生物農(nóng)藥及轉(zhuǎn)毒素產(chǎn)品產(chǎn)生抗性的速度比較緩慢，深入研究害蟲對B.t抗性的生化及遺傳機(jī)制的基礎(chǔ)上，按照害蟲綜合治理的原

47、則，結(jié)合田間生態(tài)環(huán)境，建立合理、有效的抗性管理策略。盡可能采取綜合防治策略，可以防止和延緩抗性的產(chǎn)生，促進(jìn)生物防治的持續(xù)發(fā)展。</p><p><b>　　防治的策略---</b></p><p>　　1）輪換和更替毒素：將B.t殺蟲劑與其它毒素、其它生物殺蟲劑和化學(xué)農(nóng)藥更替使用。</p><p>　　2）混用：將不同的毒素混用也可延緩抗性的產(chǎn)

48、生。理論上不同B.t毒素在昆蟲中腸上皮有不同的受體結(jié)合點(diǎn)。</p><p>　　或?qū)煞N或多種毒素基因轉(zhuǎn)移到同一植株上，使其同時產(chǎn)生不同的B.t毒素蛋白。</p><p>　　3）敏感蟲的救護(hù)：飼喂受毒殘留蟲或遷移敏感個體；使敏感性昆蟲能夠存活下來，是目前唯一確定的抗性防治策略。</p><p>　　將受B.t處理，殘留的敏感蟲和擴(kuò)增的敏感蟲遷移至產(chǎn)生抗性的害蟲種群

49、，能減緩抗性的發(fā)展。</p><p>　　4）增高或降低毒素劑量：</p><p>　　低劑量：減少施用頻率；低施用速度；低防治的徹底性及轉(zhuǎn)基因植物的低水平表達(dá)，其目標(biāo)是逐年緩慢地減少害蟲種群。</p><p>　　增高劑量：對B.t生物農(nóng)藥產(chǎn)生抗性的昆蟲是由于發(fā)生了隱性基因突變。即這種抗性是由一對隱性基因(rr)控制的，采用調(diào)高劑量的B.t殺蟲劑，或在轉(zhuǎn)基因抗蟲植

50、物殺蟲晶體蛋白高劑量表達(dá)下，雜合體Rr將被殺死。</p><p>　　5）轉(zhuǎn)基因植物B.t毒素表達(dá)的</p><p>　　基因調(diào)節(jié)：如果通過基因調(diào)控使轉(zhuǎn)基因植物只在某一生長期，植物的特定組織（相應(yīng)于害蟲的取食部位）表達(dá)B.t毒素，則抗性的選擇壓力就可能降低，抗性的產(chǎn)生就可能減慢。</p><p>　　五 生 物 防 治 的 安 全 性 </p>&l

51、t;p>　　1、生物防治的安全性 </p><p>　　生物殺蟲劑的昆蟲病原體早已存在自然界，脊椎動物（如鳥類、哺乳類）以及人類等已經(jīng)暴露于環(huán)境中接觸了病原體。如果人為地進(jìn)行野外撒播，就會有自然界不增發(fā)生過的大量昆蟲病原體分布到，甚至本來不存在這種病原體的場所中去---必須慎重地研究制劑的安全性問題。大多數(shù)真菌和細(xì)菌往往會引起人和動物的一些過敏性反應(yīng)，它們的毒素可能也是一個不安全的隱患。 </p>

52、;<p>　　白僵菌孢子被小白鼠長期反復(fù)地吸入，會導(dǎo)致小白鼠間質(zhì)性肺炎，甚而出現(xiàn)早期纖維化等改變。井崗霉素的毒性雖然很低， 但高劑量濫用時，可導(dǎo)致水稻葉綠素和光合作用降低30%以上。</p><p>　　阿維菌素【3】急性經(jīng)口毒性屬高毒，大鼠LD50為10mg/kg。在生產(chǎn)和使用阿維菌素時應(yīng)注意防護(hù)。植物源藥劑煙堿與馬錢子堿對鼠的急性口服LD50 分別為50～60mg/kg和16mg/kg。<

53、/p><p>　　英國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，魚藤酮的化學(xué)結(jié)構(gòu)與“四氫吡啶”十分相似，而后者的代謝物在人腦中會干擾神經(jīng)細(xì)胞線粒體中的電子轉(zhuǎn)移并釋放出自由基，最終使神經(jīng)細(xì)胞死亡。美國通過法律對一切處理糧食作物的藥品進(jìn)行登記，確保安全性。</p><p>　　(1)．關(guān)于生物制劑的安全性試驗(yàn)</p><p>　　安全性試驗(yàn)不能僅僅停留在毒性試驗(yàn)上，還必須證明該生物在脊椎動物體內(nèi)不增殖也

54、不殘留，也不發(fā)生相互作用。國內(nèi)對微生物農(nóng)藥的登記要求提供資料，基本毒理學(xué)資料：急性經(jīng)口毒性、急性經(jīng)皮毒性、急性吸入毒性、眼睛刺激性、致敏性、致病性試驗(yàn)（包括經(jīng)口致病性、吸入致病性、注射致病性，其中細(xì)菌和病毒進(jìn)行靜脈注射試驗(yàn)；真菌或原生動物進(jìn)行腹腔注射試驗(yàn)）、細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)。如果發(fā)現(xiàn)微生物農(nóng)藥產(chǎn)生毒素、出現(xiàn)明顯的感染癥狀或者持久存在等跡象，可以視情況補(bǔ)充試驗(yàn)資料：</p><p>　　如亞慢性毒性、致突變性、生殖毒性

55、、慢性毒性、致癌性、免疫缺陷、靈長類動物致病性等。</p><p>　　按“農(nóng)藥登記要求”所需的相應(yīng)試驗(yàn)，依次分為四個階段，</p><p>　?、瘢簞游锛毙远拘栽囼?yàn)、過敏試驗(yàn)和眼睛刺激試驗(yàn)，對病毒還要求進(jìn)行哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)；</p><p>　?、颍盒罘e毒性試驗(yàn)和致突變試驗(yàn)；</p><p>　?、螅喊?3周亞慢性毒性試驗(yàn)，遲發(fā)性神經(jīng)

56、毒性試驗(yàn)，兩代繁殖試驗(yàn)，致畸試驗(yàn)和代謝試驗(yàn)；</p><p>　?、簦郝栽囼?yàn)和致癌試驗(yàn)。 </p><p>　　（2）對非靶標(biāo)有機(jī)體和環(huán)境的影響</p><p>　　俄勒風(fēng)州發(fā)現(xiàn)應(yīng)用B.t防治午毒蛾時，卻使食葉的非靶標(biāo)的鱗翅目昆蟲數(shù)目減少。廣泛使用Bt還會對用于防治有害雜草的敏感昆蟲的種群產(chǎn)生消極影響。減少那些作為鳥類食物的昆蟲數(shù)量，而且還會危及稀有的和瀕危昆蟲種

57、類的生存。 </p><p><b>　　六、微生物殺蟲劑</b></p><p>　　1.活體微生物殺蟲劑</p><p>　　已有168種病毒、411種真菌、1504種原生動物、51種細(xì)菌和146種線蟲登記在昆蟲病原體數(shù)據(jù)庫中 </p><p>　　2. 真菌殺蟲劑【4】：</p><p>　

58、　在昆蟲病原微生物中，由真菌引起的疾病最多，約占昆蟲疾病種類的60%以上，在真菌中由白僵菌引起的約占21%?，F(xiàn)已知有500多種真菌能寄生于昆蟲和螨類，導(dǎo)致寄主發(fā)病和死亡。殺蟲真菌分屬卵菌綱、接合菌門、子囊菌門、擔(dān)子菌門和半知菌類。在自然界它們是害蟲的天敵。 接合菌中的主要是蟲霉目蟲霉科的真菌寄生于昆蟲體. 蟲霉目（Entomophthorales），分生孢子易于傳播，抗逆能力強(qiáng)，侵染快，在適合條件下，能引起寄主害蟲的大規(guī)模流行病?；认x霉

59、（Entomo phthoragrylli）蝗蟲死亡數(shù)高達(dá)95%，蚜霉（E.abhidis）能在多種蚜蟲、螨和蚧類上寄生。 </p><p>　　（1）蟲霉屬已知有104種?，F(xiàn)已知有40余種蟲霉可以人工培養(yǎng)，有近10種已成功地在實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)，在250升發(fā)酵罐中的生產(chǎn)亦已獲得成功。 </p><p>　?。?）半知菌絲孢綱: </p><p>　　（3）綠僵菌屬、白僵菌

60、屬、擬青霉屬、輪枝孢屬、野村菌屬，瘤痤孢目的鐮刀菌屬，腔孢綱的座殼孢屬，束梗孢目的多毛菌屬等。 </p><p>　　（4）殺蟲真菌的致病機(jī)理：</p><p>　　其侵染方式有經(jīng)口、皮膚及氣門侵入，主要是經(jīng)皮膚侵染具有觸殺效果。 病原真菌由表皮侵入蟲體后在體內(nèi)寄生，導(dǎo)致寄主昆蟲死亡?？煞譃椋?</p><p>　　1)附著階段 ：分生孢子（conidia）、子囊孢

61、子（ascospore）主要借助氣流、雨水、土壤、蟲體相互接觸等；游動抱子（zoospores借助在水中游動，附著到健康昆蟲的表皮上。 </p><p>　　2)穿入階段： 附著在表皮上的孢子逐漸膨脹萌發(fā)，從端部或側(cè)面長出芽管(ermtllbes)；芽管直接穿入寄主表皮或在未端膨大，形成一種固著結(jié)構(gòu)－附著胞（appressori)固著和產(chǎn)生入侵刺絲（infection pegs）。在這同時，芽管或附著胞分泌蛋白

62、酶、脂酶和幾丁質(zhì)酶等胞外酶。經(jīng)過這些酶的作用后，芽管或入侵刺便容易穿過局部溶解的表皮進(jìn)入寄主血腔。有些真菌也可直接形成附著孢穿入寄主表皮。 </p><p>　　3)血腔繁殖階段 ： 真菌直接分解和利用昆蟲的體液作養(yǎng)分進(jìn)行生長和繁殖。菌絲體在體內(nèi)不斷產(chǎn)生芽生孢子，芽生孢子再形成菌絲體，在蟲體內(nèi)大量繁殖，通過血腔在蟲體內(nèi)擴(kuò)散。 </p><p>　　芽生孢子和菌絲體彌漫于血腔不但防礙了昆蟲血

63、液循環(huán)，而且菌絲的代謝產(chǎn)物如草酸鈣在血腔中大量積累，造成害蟲的新陳代謝機(jī)能紊亂而死亡 。 </p><p>　　寄主死亡后，真菌才回復(fù)到典型的菌絲生長，并侵入到寄主所有器官和組織。 此外真菌產(chǎn)生毒素能引起昆蟲死亡。目前已從昆蟲病原真菌主要是半知菌類的培養(yǎng)濾液和菌絲體中分離鑒定了幾種低分子量的毒素。 這些毒素可促使害蟲組織衰變，破壞細(xì)胞器的膜結(jié)構(gòu)，干擾神經(jīng)系統(tǒng)，增加氧的消耗，干擾蛻皮或變態(tài)并使害蟲致死。 </

64、p><p>　　4）常見的毒素有白僵菌素、綠僵菌素、蟲草素和擬青霉素等。 </p><p>　?、?白僵菌（beauveria）【5】</p><p>　　是目前國內(nèi)外應(yīng)用最廣泛的一種殺蟲真菌。屬好氧性菌。在培養(yǎng)基上可存活1-2年，蟲體上可存活6個月，陽光直射很快失活。有兩個種： </p><p>　　1>球形白僵菌，球形孢子占50%； &

65、lt;/p><p>　　2>卵形白僵菌，卵形孢子占98%。 </p><p>　　殺蟲作用是靠分生孢子接觸蟲體后，在適宜條件下萌發(fā)，生出芽管侵入蟲體，大量繁殖，分泌白僵菌素影響血液循環(huán)，干擾代謝，2-3天后昆蟲死亡。蟲尸干硬，蟲體長出菌絲，產(chǎn)生分生孢子，呈白色茸毛狀，叫白僵菌。產(chǎn)生的真菌毒素在昆蟲疾病和致死過程中起到特別重要的作用。 </p><p><b&

66、gt;　　特點(diǎn)：</b></p><p>　　<1>由昆蟲病原菌半知菌類叢梗孢目叢梗孢科白僵菌屬發(fā)酵加工成的制劑。不污染環(huán)境，不易產(chǎn)生抗性； </p><p>　　<2>毒性：對人、畜、魚、環(huán)境安全，但對蠶染病力很強(qiáng)； </p><p>　　<3>劑型：粉劑、可濕性粉劑、顆粒劑； </p>

67、<p>　　<4>適用范圍：適用于鱗翅目、同翅目、膜翅目和直翅目等約200種害蟲及其蛹； </p><p>　　<5>使用方法：使用1億孢子/ml或菌粉，可防治玉米螟、松毛蟲、大豆食心蟲、高梁條螟、馬鈴薯甲蟲、茶葉毒蛾、稻苞蟲、稻葉蟬、稻飛虱等。 </p><p><b>　　<6>注意事項(xiàng)： </b></p>

68、<p>　　A.施藥最佳時期為陰天、雨后或早晚濕度大時使用； </p><p>　　B.在害蟲卵乳化盛期施藥最佳； </p><p><b>　　C.養(yǎng)蠶區(qū)忌用； </b></p><p>　　D.不可于化學(xué)殺菌劑混用，但在害蟲密度較高、蟲齡較大的時候，可將白僵菌與樂斯本等殺蟲劑混用 。 </p><p>

69、　?、?綠僵菌（Metarhizinum）</p><p>　　是最早用于防治農(nóng)業(yè)害蟲的真菌，寄主范圍很廣。能寄生8個目昆蟲，30個科共二百多種，也能寄生于螨類，患病僵死的蟲體上覆蓋著綠色孢子，故稱綠僵病。 綠僵菌有金龜綠僵菌和黃綠僵菌等變種，生產(chǎn)上主要用金龜綠僵菌制劑來防治害蟲，在國外有黃綠綠僵菌注冊防治蟑螂、白蟻蚱蜢和蝗蟲。 </p><p>　　1>毒性：低毒，對人畜、環(huán)境安全

70、，但對家蠶毒性很強(qiáng)。 </p><p>　　2>作用及特點(diǎn)：屬半知菌類絲胞綱叢梗孢目綠僵菌屬真菌。綠僵菌分生孢子具有較好的耐高溫和耐旱性，孢子能保持活力3~5年，在高溫和低濕的條件下，其殺蟲效果甚至優(yōu)于白僵菌。綠僵菌也能產(chǎn)生外毒素，目前已知的毒素有腐敗菌素（有人稱為綠僵菌外毒素）A、B、C、D和脫甲基致腐敗菌素B，綠僵菌的致病作用是靠分泌的腐敗毒素A、B使昆蟲中毒而死【6】。 </p><

71、;p>　　3>制劑：粉劑（含50～80億活孢子/g），10%顆粒劑。 </p><p>　　4>適用范圍：綠僵菌主要防治地下害蟲金龜子、象甲、天牛、飛蝗、蚊幼蟲等【7】。 </p><p><b>　　5>使用方法： </b></p><p>　　A.防治地下害蟲蠐螬，采用菌土法施藥，每667m2用量為2kg，拌細(xì)土50

72、kg，中耕時均勻撒入土中； </p><p>　　B.防治蝗蟲，每hm2450g菌粉加4 500 ml植物油噴霧； </p><p>　　C.防治蔬菜害蟲小菜蛾和菜青蟲有綠僵菌菌粉對水稀釋成0.05億～0.1億孢子/ml的菌液噴霧。 </p><p>　　6>注意事項(xiàng)：除了與白僵菌的注意事項(xiàng)相同外，還要注意部分化學(xué)殺蟲劑對綠僵菌分生孢子萌發(fā)有抑制作用，濃度越高

73、抑制作用越強(qiáng)，但適當(dāng)?shù)幕煊每商岣邭⑾x效果。 </p><p>　　毒力蟲霉Entomophthora virulenta） </p><p>　　A.其它名稱：殺蚜霉素，EB-82滅蚜菌（或EC.t—107殺蚜霉素）。 </p><p>　　B.特性：1982年中國農(nóng)科院生防所分離獲得。，其代謝產(chǎn)物有觸殺蚜蟲物質(zhì)，并有伴生菌存在。為嗜蟲寄生菌，在自然界可引起蚜蟲疫病

74、流行。 </p><p>　　C.防治對象：蚜蟲，包括菜蚜、瓜蚜、蘿卜蚜、苜蓿蚜、蘋果蚜等。 </p><p>　　D.使用方法：200倍液噴霧。 </p><p>　　③ 赤座霉（Aschersonia）</p><p>　　1>培養(yǎng)特征：培養(yǎng)適溫23~27℃，培養(yǎng)10天可長滿菌絲體，一個月左右可長滿紅色孢子 </p>

75、<p>　　2>使用方法：在20℃以上，相對濕度80%，赤座霉40倍稀釋液，防治黃瓜、番茄粉虱死亡率可達(dá)70%左右， </p><p>　　3>注意：使用時宜在傍晚濕度較大時進(jìn)行。 </p><p>　　粉虱座殼孢防治白粉虱和介殼蟲；淡擬紫青霉防治根結(jié)線蟲；蠟蚧輪枝孢防治蚜蟲和白粉虱。湯氏多毛孢防治柑桔銹螨 </p><p><b>

76、　　3.細(xì)菌殺蟲劑 ：</b></p><p>　　在昆蟲病原微生物中，雖然真菌種類多，但細(xì)菌數(shù)量占絕對優(yōu)勢。 由于細(xì)菌尤其是芽孢桿菌類具有對外界抵抗力強(qiáng)，繁殖快，發(fā)病周期短，毒力持久，易于培養(yǎng)等優(yōu)點(diǎn)，因此在微生物防治害蟲中具有重要作用。細(xì)菌能感染許多昆蟲，最主要的是鱗翅目、膜翅目、雙翅目和鞘翅目昆蟲，有的致病率可達(dá)100%。細(xì)菌不但能感染幼蟲，而且有的成蟲和螨類也能被感染。 細(xì)菌殺菌劑的作用機(jī)理：

77、</p><p>　　(1)細(xì)菌通過營養(yǎng)體、芽孢在昆蟲體內(nèi)繁殖，并產(chǎn)生活性蛋白毒素殺死目標(biāo)昆蟲，從而使昆蟲患敗血癥而死亡【8】。 </p><p>　　(2)多數(shù)昆蟲病原細(xì)菌是通過消化道感染昆蟲，只有少數(shù)通過卵、體壁和氣管感染，也可通過寄生蟲和捕食昆蟲攜帶感染。 </p><p>　　昆蟲被細(xì)菌感染后的癥狀為： </p><p>　　不大活動

78、、食欲減退、口吐黃水和腹瀉等。死亡后蟲體顏色加深，迅速變?yōu)楹稚蚝谏?，蟲體大多腐爛軟化失去原型。內(nèi)部組織也可因潰爛而呈粘著性，或流出有臭味的黏稠液體。 </p><p>　　(3)目前已分離到的昆蟲病原菌的菌種和變種約有100多種，生產(chǎn)的商品僅有十幾種，其中研究最多，效果最好的是芽孢桿菌屬的蘇云金桿菌類和日本的金龜子芽孢桿菌。</p><p><b>　　1)芽孢桿菌屬:<

79、/b></p><p>　　菌細(xì)胞較大，芽孢生于菌體中央或偏端，芽孢串一般不膨大。革蘭氏染色陽性，借周身鞭毛運(yùn)動，或無鞭毛不運(yùn)動。均為好氣性。 </p><p>　　蘇云金桿菌Bacillus thuringinensis(BT)是當(dāng)前國內(nèi)外研究最多，生產(chǎn)上應(yīng)用最廣的一種微生物殺蟲劑，它用于害蟲防治已有40多年的歷史。生產(chǎn)廠家有500多家，年生產(chǎn)能力達(dá)50萬t，占微生物殺蟲劑總量的9

80、5%以上。目前在60多個國家共120個品種登記。對近600種昆蟲和有害生物有活性，其中鱗翅目就有372種 這種細(xì)菌有許多變種，已發(fā)現(xiàn)77個血清型，82個亞種，全世界已分離保存的B.t菌株有60 000多個。不同亞種對同種昆蟲毒力不同，不同菌株產(chǎn)生不同的毒素特異性殺死不同的昆蟲。B.t殺蟲劑的劑型不斷發(fā)展，包括粉劑、可濕性粉劑、懸浮劑、濃乳劑、油劑、油乳劑、顆粒劑、片劑、微囊劑、生物包被劑等。 蘇云金芽孢桿菌的其它制劑有： SD-5菌劑，

81、防治銀紋夜蛾：HD-1，即庫斯塔克制劑，活孢子數(shù)129億/克，芽孢與晶體比1.5:1；鲇澤亞種，主要防治鱗翅目害蟲；以色列亞種，主要防治環(huán)境與溫室中的雙翅目害蟲如蚊子幼蟲。擬步甲亞種，防治馬鈴薯上一些鞘翅目害蟲如科羅拉多馬鈴薯甲蟲；青蟲菌6號液劑（又稱蘇云金芽孢桿菌蠟螟變種菌劑，可防豆天蛾）；天門變種，常稱為7216； 武漢變種，常稱為1</p><p>　　① 主要特征是營養(yǎng)細(xì)胞為桿狀，在生活一定階段形成芽孢，

82、同時在菌體的另一端形成菱形、正方形或不規(guī)則形的伴孢晶體。伴孢晶體是一種對鱗翅目幼蟲有強(qiáng)烈毒性的蛋白質(zhì)毒素。</p><p>　?、?殺蟲機(jī)理：主要以胃毒作用方式為主，經(jīng)口進(jìn)入體內(nèi)而感染昆蟲，特別是對鱗翅目昆蟲的幼蟲毒殺能力很強(qiáng)。死亡昆蟲顏色加深變黑，蟲體軟化腐爛失去原型，并有臭味。 </p><p>　　A.在昆蟲體內(nèi)大量增殖，利用昆蟲的營養(yǎng)物質(zhì)使昆蟲不能正常發(fā)育； </p>

83、<p>　　B.是B.t還產(chǎn)生毒素可在短時間內(nèi)起殺蟲作用；</p><p>　　蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生毒素共4種： </p><p>　　A.蛋白質(zhì)晶體內(nèi)毒素（又叫δ- 內(nèi)毒素，簡稱B.t毒素，是一種堿性蛋白質(zhì)），即伴孢晶體。完整的伴孢晶體不表現(xiàn)毒性，只有在敏感昆蟲中腸堿性pH腸液和蛋白酶作用下反應(yīng)生成毒性核心片段，對昆蟲造成致命傷害。是4種毒素中最重要的，能在幾分鐘內(nèi)麻痹昆蟲腸道

84、，腸道內(nèi)膜被破壞后桿菌營養(yǎng)細(xì)胞極易穿透腸壁進(jìn)入昆蟲血淋巴，最后昆蟲因饑餓和敗血癥而死亡。 </p><p>　　B .熱穩(wěn)定外毒素（即蘇云金素，又叫β-外毒素）它抑制和干擾RNA的生物合成，主要抑制RNA聚合酶活性，而RNA在蛋白質(zhì)生物合成中起作用。但作用緩慢，只是在蛻皮與變態(tài)時作用明顯。 </p><p>　　C .蜂毒素（又叫γ -外毒素）。 </p><p&

85、gt;　　D.α -外毒素，能影響細(xì)胞磷脂膜，造成細(xì)胞的破裂和壞死，使昆蟲腸道中的細(xì)菌易于進(jìn)入體腔。 </p><p>　?、?其它名稱：敵寶，快來順，滅蛾靈，先力，康多惠，力寶，蘇得利，殺蟲菌一號。 </p><p>　?、?毒性：屬低毒殺蟲劑，對家禽、家畜、魚、蜜蜂的急性和慢性試驗(yàn)未見異常，但對蠶的毒性高。 </p><p>　?、?作用及特點(diǎn)：生產(chǎn)原料和有效成

86、分屬于天然產(chǎn)物，不污染環(huán)境；害蟲不易產(chǎn)生抗藥性，并可與多種化學(xué)殺蟲劑混用；通過現(xiàn)代生物技術(shù)、基因工程對菌種進(jìn)行改造，可改進(jìn)性能，提高品質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)。 存在問題：如速效性差、殘效期短、光穩(wěn)定性差、不具內(nèi)吸作用只能防治食葉性害蟲、需要降低成本，提高市場競爭力等。 </p><p>　　⑥ 制劑：B.t可濕性粉劑（100億活芽孢/g、150億活芽孢/g），B.t乳劑（100億孢子/ml），B.t懸浮劑（100億活芽孢/g）

87、。 </p><p>　　⑦ 適用范圍：可用于防治直翅目、雙翅目、鞘翅目、膜翅目，特別是鱗翅目的多種害蟲。 </p><p><b>　?、?使用方法： </b></p><p>　　A.森林害蟲防治 防治松毛蟲將菌粉兌滑石粉，配成每克含5億孢子的濃度噴粉，用飛機(jī)防治時可將菌粉按1:10濃度噴施。 </p><p>　

88、　B.農(nóng)業(yè)害蟲防治 100億孢子/g的菌粉，每667m2用100～400g兌水2 000倍液噴施，可防治對B.t最敏感的稻苞蟲、稻螟、棉小造橋蟲、沙棗尺蠖、剌蛾和菜粉蝶。用B.t乳劑1 000倍液可防治棉鈴蟲、菜青蟲和小菜蛾，用1 000倍液可防治煙青蟲， 500倍液加敵敵畏乳油1 000倍液混合噴霧防治效果更好。 </p><p>　?、?注意事項(xiàng)：對低齡幼蟲效果好；因速效性差使用要比化學(xué)農(nóng)藥提前2～3d，施

89、藥溫度高于30℃效果更好；紫外線對蘇云金芽孢桿菌有抑制，要避免強(qiáng)烈陽光下使用；不能和內(nèi)吸有機(jī)磷或殺菌劑混合使用；對蠶毒性強(qiáng)，避免在養(yǎng)蠶區(qū)使用；應(yīng)保存在25℃下，防止暴曬和潮濕，以免變質(zhì)。 </p><p><b>　　2） 殺螟桿菌</b></p><p>　　① 劑型：100億活芽孢/克可濕性粉劑 </p><p>　?、?作用特點(diǎn)：從稻螟蟲

90、尸體分離獲得。主要胃毒、觸殺作用。作用機(jī)制是進(jìn)入昆蟲體內(nèi)后產(chǎn)生毒素和芽孢麻痹昆蟲的消化系統(tǒng)，停止取食，并很快破壞腸壁，最終昆蟲因饑餓和敗血癥死亡。 </p><p>　?、?毒性：屬低毒，對作物安全，但蠶致病力強(qiáng)。 </p><p>　?、?防治對象：主治菜青蟲、小菜蛾、棉鈴蟲、造橋蟲、斜文夜蛾等。 </p><p>　?、?使用方法：水750公斤噴霧；或每公頃用可

91、濕性粉劑750克加細(xì)土225公斤拌勻后噴粉；死蟲可再利用。 </p><p>　　⑥ 注意事項(xiàng)：嚴(yán)禁污染桑園，一旦污染桑葉可用0.1%漂白粉消毒；使用溫度20℃以上為好；不能與內(nèi)吸性有機(jī)磷殺蟲劑和殺菌劑混用；貯藏在陰涼干燥處，避免陽光和水濕。 </p><p>　　3） 青蟲菌：其它名稱：蠟螟桿菌3號 </p><p>　?、?劑型：制劑為白色或淡黃色粉末，每克含活

92、芽孢100億以上； </p><p>　?、?特點(diǎn)：對高溫有很強(qiáng)的忍耐力，在75℃經(jīng)15分鐘不死。伴孢晶體較小，受熱和酸堿處理不變性，長期貯存不失活。持效期長，在穩(wěn)定的生態(tài)環(huán)境中，一次施藥很長時間有效。 </p><p>　?、?作用機(jī)理：與蘇云金桿菌相同。 </p><p>　?、?使用對象與方法：能防治幾十種害蟲，特別是鱗翅目的菜青蟲、棉鈴蟲、玉米螟、刺蛾等害蟲

93、。防治蔬菜害蟲用菌粉500倍液噴霧；防治果樹和林木害蟲用菌粉300-500倍液噴霧。 </p><p>　?、?注意事項(xiàng)：施藥應(yīng)在害蟲低齡期進(jìn)行；在有效期內(nèi)盡早使用；與敵百蟲等混用有增效作用。 </p><p><b>　　4）乳狀芽孢桿菌</b></p><p>　　均為專性寄生。當(dāng)金龜子幼蟲被侵染后，由于細(xì)菌在體內(nèi)大量繁殖，使蟲體變?yōu)槿榘咨?/p>

94、，似牛奶狀，故稱為乳狀菌或乳菌。 包括日本金龜子芽孢桿菌和緩死芽孢桿菌。目前實(shí)際應(yīng)用，是從活體培養(yǎng)生產(chǎn)，其它名稱：金龜子乳狀桿菌。</p><p>　　① 作用及特點(diǎn)：對蠐螬主要是胃毒作用，通過口器進(jìn)入，在中腸萌發(fā)產(chǎn)生營養(yǎng)體，穿過腸壁進(jìn)入體腔，在血淋巴內(nèi)大量繁殖，菌體在形成芽孢同時，還形成一個具有折光性的伴孢晶體芽孢有折光性，能耐80℃的高溫10min。單生或成對不運(yùn)動，形成芽孢時，芽孢位于菌體一端隨著芽孢的膨大

95、，菌體變成梨形。屬專性病原菌，只能在金龜子幼蟲（蠐螬）體內(nèi)生長發(fā)育，形成營養(yǎng)體和芽孢。在人工培養(yǎng)基上不易生長。離開寄主后，營養(yǎng)體迅速死亡。芽孢則能在土壤中存活多年。單生或成對不運(yùn)動，形成芽孢時，芽孢位于菌體一端隨著芽孢的膨大，菌體變成梨形，對干燥有抵抗能力，是一種長效細(xì)菌殺蟲劑。 </p><p>　?、?使用方法：配成毒餌：用250克含有1億左右活芽孢的乳狀菌劑，拌土并加入麩皮制成毒餌，撒入一畝地。 </

96、p><p><b>　?、?注意事項(xiàng)： </b></p><p>　　A.要保證一畝地施藥量不少于1000億活孢子。 </p><p>　　B.溫度對乳狀菌的致病力影響較大，在26℃~30℃條件下，感病率高，發(fā)病快，在20℃下則不易感病。 </p><p>　　C.對蠐螬的致病力因蠐螬種類不同而異，對銅綠類金龜子的蠐螬有較強(qiáng)

97、的致病力，但對暗黑金龜子和小黑棕金龜子的蠐螬的致病力較差。 </p><p><b>　　5）其它致病菌</b></p><p>　　① 蠟質(zhì)芽孢桿菌(Bac. cerus)是腐生細(xì)菌，有時也可以引起昆蟲疾病，寄主范圍相當(dāng)廣,只產(chǎn)生芽孢不產(chǎn)生伴孢晶體，產(chǎn)生一定量的卵磷酯酶從而幫助細(xì)菌進(jìn)入血腔。 </p><p>　?、?枯草芽孢桿菌(Bac.

98、Subtilis)是一種腐生性細(xì)菌，對水稻稻瘟病有效，對某些昆蟲幼蟲如黃粉甲、蠟螟等有致病力。20%可濕性粉劑，商品名為力寶。 </p><p>　?、?球形芽孢桿菌(Bac. Sphaericas) 對多種蚊類幼蟲有致病作用，在蚊子幼蟲1～4齡期均可使用，中毒癥狀在取食1h后出現(xiàn)。 </p><p>　?、?還有螻蛄芽孢桿菌、昆蟲芽孢桿菌、軟化芽孢桿菌等。 </p><

99、;p><b>　　4.病毒殺蟲劑:</b></p><p>　　昆蟲病毒是指以昆蟲為寄主的病毒類群，具有宿主特異性強(qiáng)，能在害蟲群體內(nèi)流行，持效期長等優(yōu)點(diǎn)。 昆蟲病毒為專一性寄生，對人畜無毒，被用來防治農(nóng)林害蟲的潛力很大，目前在11目43科900多種昆蟲中發(fā)現(xiàn)1 690多種病毒。其中60%為桿狀病毒，這些病毒可使1 100多種昆蟲和螨類致病死亡。已經(jīng)商品化的病毒殺蟲劑有36種，其中俄羅斯

100、11種，歐洲10種，美國6種，中國9種。已經(jīng)分離到昆蟲病毒1200多種。作用機(jī)理：主要經(jīng)口侵入蟲體后，病毒在寄主細(xì)胞內(nèi)大量復(fù)制，擾亂了寄主細(xì)胞和機(jī)體的正常代謝功能而使寄主死亡。 </p><p>　　(1)昆蟲病毒的種類 </p><p><b>　　1)包涵體病毒:</b></p><p>　　包括桿狀病毒、呼腸孤病毒、痘病毒,具有蛋白質(zhì)性質(zhì)

101、的包涵體，將病毒粒子包埋在其中，起著抵抗不良環(huán)境、保護(hù)病毒的作用，這類病毒是病毒殺蟲劑的最佳選用對象。特別是其中的桿狀病毒，因它的病毒粒子為特殊的杯狀，與其他動、植物的病毒均不相同，除對昆蟲及一小部分甲殼綱的動物有感染力外，對高等動物及植物均無危害,有以下特點(diǎn)： </p><p>　?、賹δ繕?biāo)昆蟲毒力極高； </p><p><b>　?、诩闹鲗；詮?qiáng)； </b>&l

102、t;/p><p><b>　?、鄄划a(chǎn)生抗藥性； </b></p><p>　?、苣芤鹱匀涣餍胁≡矗?</p><p>　?、菘勺鳛橥庠椿虮磉_(dá)的載體等特點(diǎn)。 </p><p>　　2）非包涵體病毒 :</p><p>　　包括：彈狀病毒科、細(xì)小病毒科、腸道病毒科和虹彩病毒科。由于其病毒粒子裸露，在自

103、然界中不夠穩(wěn)定，并且病毒粒子形狀及大小與人、畜及植物的十分相似，鑒于非包涵體病毒在自然界中的不穩(wěn)定性及對人畜的不安全因素，使其在微生物殺蟲劑的競爭中處于劣勢。 在比較病毒學(xué)的研究中卻起著重要的作用，我國昆蟲病毒資源豐富，已從197種昆蟲體內(nèi)分離獲得250余株昆蟲病毒。其中核型多角體病毒（NPV）147株；顆粒體病毒（GV）53株。可返復(fù)感染或通過卵世代相傳，有長效作用。例如用黃松順蜂核型多角體病毒防治松毛蟲蜂，應(yīng)用一次可控制蟲害15年。

104、 </p><p><b>　　5.病毒殺蟲劑 </b></p><p>　　(1)核型多角體病毒（NPV）</p><p>　　包涵體(即多角體)位于細(xì)胞核內(nèi)，病毒被包在多角體中，屬桿狀病毒科的A亞屬，病毒粒子為桿狀。在寄主細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行增殖，其包涵體的形狀不同，分別稱為3、4、5、6及多角體，每個多角體內(nèi)包埋的病毒粒子數(shù)量不等，呈單?；蚴鵂铍S

105、機(jī)散布在多角形的蛋白質(zhì)晶體內(nèi)。 </p><p><b>　　1）致病機(jī)理:</b></p><p>　　當(dāng)NPV經(jīng)口侵入昆蟲體內(nèi)后，多角形的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)被蟲體中腸的堿性消化液（pH＞ 9）和酶溶解，釋放出大量病毒粒子；病毒粒子先進(jìn)入中腸細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，核衣殼經(jīng)核膜孔進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，在細(xì)胞核內(nèi)合成自身的核酸和蛋白。病毒數(shù)量逐漸增加，細(xì)胞核明顯膨大。但不形成多角體，一部分子代

106、病毒再復(fù)制，另一部分子代病毒則穿出中腸細(xì)胞進(jìn)入血腔，在血腔中侵染脂肪、氣管皮膜、真皮、血球等敏感組織，繼而幾乎在所有組織內(nèi)增殖， 最后在細(xì)胞核內(nèi)形成多角體，當(dāng)大量多角體充塞于整個核內(nèi)后，核膜破裂、細(xì)胞崩潰，多角體又被釋放進(jìn)血腔中。 </p><p><b>　　2）中毒癥狀:</b></p><p>　?、?感染4天后的體液因充滿了多角體而呈乳白色、或體色變淡或呈現(xiàn)油

107、光 </p><p>　　② 隨后蟲體軟化、體內(nèi)組織液化，體節(jié)腫脹，表皮脆弱易破裂并流出白色或褐色濃稠液體，內(nèi)含大量新形成的多角體，流出的液體在腐生細(xì)菌侵入前并無特殊臭味。 </p><p>　?、?致死時間為3～5天。 </p><p>　　(2)質(zhì)型多角體病毒（CPV）</p><p>　　與NPV的主要區(qū)別是多角體在昆蟲的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)發(fā)育，

108、病毒粒子不是桿狀，而是近球型，屬呼腸病毒科，在寄主細(xì)胞質(zhì)內(nèi)復(fù)制。包涵體的形狀不一，以立方和六面居多，大小在1-4微米之間，病毒粒子呈20面體（近球形），大小為70納米，任意散布在包涵體內(nèi)。 </p><p><b>　　1）中毒癥狀:</b></p><p>　　感染后期，由于這些細(xì)胞內(nèi)充滿白色的多角體，使中腸由正常綠色變?yōu)槿榘咨?；中腸細(xì)胞一正常代謝機(jī)制完全破壞，無法

109、合成生長所需的營養(yǎng)，幼蟲出現(xiàn)食欲減退、行動呆滯、最后完全停止生長直至死亡。致死時間7-20天。寄主專化性不如NPV強(qiáng)，可以隔科感染，寄主范圍也較廣泛，可感染葉蛾、松針黃毒蛾、黃地老虎和松毛蟲等，其中以防松毛蟲的效果較好，感病的鱗翅目幼蟲表現(xiàn)活躍、急燥、腸道硬化、肥大并呈乳白色、大便石黃色，其中含有成團(tuán)的多角體，幼蟲體內(nèi)組織不液化，常吐淡褐色液體，并排泄粘液粘著于肛門。體腔萎縮，表皮不脆，死后不倒掛，寄生部位在中腸細(xì)胞。</p>

110、;<p>　　(3)顆粒體病毒（GV） </p><p>　　又稱莢膜病毒，產(chǎn)生病毒莢膜（即蛋白質(zhì)外殼）包圍著核衣殼，充塞了受害細(xì)胞的原生質(zhì)和細(xì)胞核，屬桿狀病毒科B亞屬，包涵體呈顆粒狀，顆粒外殼似豆莢，有卵形、橢圓、長卵形和不正常形。 內(nèi)含1個或2個病毒粒子，病毒粒子桿狀，由兩層膜包圍著，外膜脫掉后，呈球形。內(nèi)膜直接包圍病毒粒子，其殺蟲機(jī)制與NPV十分相似。中毒幼蟲表現(xiàn)首先是食欲不振，直至停止取食，

111、行動遲緩、體節(jié)腫脹、體色乳白，蟲體腹面一般逐漸變?yōu)榈谆蛉榘祝つw常出現(xiàn)斑點(diǎn)等癥狀。病死蟲體有時因腹足倒掛枝葉上呈“◇”形，死后很快變?yōu)楹谏?。致死時間4-7天。它的寄</p><p>　　主?；员萅PV強(qiáng)，交叉感染只發(fā)生在不同種間，寄主范圍只限于鱗翅目昆蟲，至少有68種，如云杉卷葉蛾、菜粉蝶等。 </p><p>　　(4)昆蟲痘病毒（EPV） </p><p>

112、　　屬痘病毒科。在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)增殖。包涵體為球形和橢圓形，直徑約10-20微米，病毒粒子卵圓形，隨機(jī)分布在包涵體內(nèi)，病毒侵染的主要部位是脂肪體和血細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)。 寄主被痘病毒感染后的癥狀為：體色變?yōu)槿榘咨?，活動力減退，致病至死亡需要6～20天或更長。除幼蟲外，蛹和成蟲都能感染。痘病毒對寄主具有較強(qiáng)的特異性，能感染鞘翅日、雙翅目、鱗翅目及直翅目的昆蟲。 </p><p>　　（5）棉鈴蟲核多角體病毒</p>

113、<p>　　其它名稱：Ha NPV，S01－43，殺蟲病毒、棉鈴蟲病毒 </p><p>　　1)毒性：對人、禽、畜、鳥、益蟲、魚安全。 </p><p>　　2)劑型：10億核型多角體病毒/克可濕性粉劑。 </p><p>　　3)作用特點(diǎn)：主要胃毒作用，有傷口時也有觸殺作用。易被紫外線照射失活，作用緩慢。 </p><

114、p>　　4)適用范圍：適用于鱗翅目害蟲的防治。 </p><p>　　5)使用方法：每公頃用可濕性粉劑1500-2250克加水900-1200公斤，于棉鈴蟲卵盛期噴霧； </p><p>　　6)注意事項(xiàng)：由于作用緩慢，防治害蟲時期應(yīng)適當(dāng)提前；低濕、避光保存。不能與酸性物質(zhì)混用。 </p><p>　　(6)銀紋夜蛾核型多角體病毒</p><

115、;p>　　其它名稱：奧綠一號，AcNPV </p><p>　　1）毒性：屬低毒農(nóng)藥，大鼠口服LD50>5000mg/kg。 </p><p>　　2）劑型：10億病毒/ ml懸浮液。 </p><p>　　3）作用特點(diǎn)：具有藥效持久，害蟲不易產(chǎn)生抗藥性的特點(diǎn)，是蔬菜的無公害農(nóng)藥。 </p><p>　　4）使用方法：防治十字花科