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文檔簡(jiǎn)介
1、SO2是我國(guó)當(dāng)前的主要大氣污染物,對(duì)玉米等農(nóng)作物的危害很大,直接制約著玉米的產(chǎn)量和品質(zhì)。實(shí)驗(yàn)室前期已克隆了玉米亞硫酸鹽氧化酶(Zea mays sulfite oxidase,ZmSO)全長(zhǎng)基因,本論文主要進(jìn)行以下三方面的研究:
1.ZmSO在不同脅迫下的表達(dá)分析。通過高溫、低溫、干旱、SO2處理玉米鄭58,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-timePCR)進(jìn)行表達(dá)量上的分析。低溫、高溫脅迫時(shí)ZmSO表達(dá)量降低,起到負(fù)調(diào)控
2、的作用,干旱、SO2處理時(shí)ZmSO表達(dá)量增高,起到正調(diào)控的作用。SO2脅迫時(shí)ZmSO表達(dá)量增高這與參與SO2解毒作用是一致的,但是干旱脅迫下,ZmSO通過何種途徑參與了機(jī)體的保護(hù),還需要繼續(xù)探討。
2.ZmSO調(diào)控元件分析。生物信息學(xué)分析得到ZmSO啟動(dòng)子(Zea mays sulfite oxidasePromoters ZmSOp)序列,設(shè)計(jì)不同啟動(dòng)子的缺失片段,構(gòu)建帶有GUS:ZmSOP的植物表達(dá)載體。分析ZmSO啟
3、動(dòng)子的功能域,經(jīng)GUS染色得到ZmSO啟動(dòng)子的功能域在100-700bp之間。
3.利用擬南芥AtSO的T-DNA插入突變體,研究ZmSO參與SO2脅迫抗性響應(yīng)的機(jī)制。構(gòu)建了植物表達(dá)載體p35S-GFP-ZmSO,轉(zhuǎn)化野生型擬南芥(Col)和T-DNA插入突變體atso,經(jīng)抗性篩選和分子鑒定,獲得ZmSO/WT、ZmSO/atso轉(zhuǎn)基因株系。SO2脅迫處理后,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系比對(duì)照株傷害程度較輕,表現(xiàn)出較高的抗性,進(jìn)一步的分
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