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文檔簡介
1、媒介昆蟲的暴發(fā)會對作物造成嚴重的損害,因為它們不僅通過取食損害作物,而且傳播病毒疾病?;绎w虱(Small brown planthopper,SBPH)(Laodelphax striatellus)是水稻、小麥和玉米等病毒病的媒介害蟲,可以從麥田轉移到稻田。近年來在中國許多省份灰飛虱暴發(fā)導致水稻毀滅性損失。然而,暴發(fā)的原因和機制仍不很清楚。本文從藥劑對灰飛虱生殖的刺激或抑制效應探討了其暴發(fā)原因及分子機制。結果如下:
1兩種殺
2、菌劑對灰飛虱生殖的反向效應
灰飛虱Laodelphax striatellus(Fallén)是水稻的重要害蟲之一,也是農(nóng)藥誘導再猖獗型害蟲。本文研究了兩種殺菌劑,井岡霉素(JGM)和多菌靈(CBM)對灰飛虱生殖的影響,表現(xiàn)出刺激生殖和抑制生殖的相反效應。井岡霉素抑制灰飛虱生殖,而多菌靈則刺激生殖。為了探究其原因,我們進行了一系列生理生化試驗,結果顯示井岡霉素處理后,灰飛虱體重減輕,體形變小,腹部產(chǎn)卵瓣變短,蛋白質含量減少,而
3、多菌靈處理后則相反。
2井岡霉素和多菌靈處理后灰飛虱的蛋白質組學分析
本文利用iTRAQ技術對井岡霉素和多菌靈處理后的灰飛虱進行了蛋白質組學分析,井岡霉素處理組共鑒定到4749個蛋白質,其中有95個差異蛋白(上調62個,下調33個);多菌靈處理組共鑒定到5828個蛋白質,其中有818個差異蛋白(上調452,下調366)。比較后發(fā)現(xiàn),井岡霉素上調而多菌靈下調的有3個,井岡霉素下調而多菌靈上調的有13個。其中,卵黃原蛋白
4、在井岡霉素處理組中表達下調,而在多菌靈處理組中表達上調,符合產(chǎn)卵規(guī)律。此外,在井岡霉素處理組中,分析共得到20個差異蛋白與生殖,生殖過程,生物調節(jié),代謝過程有關(上調12個,下調8個);而在多菌靈處理組中,分析共得到50個差異蛋白與生殖,生殖過程,生物調節(jié)有關(上調24個,下調26個)。
3兩種殺菌劑處理的灰飛虱沉默相關基因對生殖的影響
兩種殺菌劑處理后對灰飛虱的生殖產(chǎn)生了反向效應,蛋白質組學分析表明井岡霉素作用下能
5、夠引起灰飛虱長鏈-3-羥?;o酶A脫氫酶(LCHAD)的表達量下調,而多菌靈作用下能夠引起灰飛虱羥基類固醇脫氫酶(HSD)的表達量上調,且兩個基因在同一位點。這里利用飼喂法進行RNAi,分別敲除灰飛虱體內的這兩個基因來觀察其生殖力的變化。敲除LCHAD基因的相對表達量分別下降了56.7%(Control+dsLCHAD VS Control),58.4%(Control+dsLCHAD VS Control+dsGFP)。沉默LCHAD
6、后產(chǎn)卵量分別減少了53.5%(Control+dsLCHAD VS Control)和51.6%(Control+dsLCHAD VS Control+dsOFP)。沉默LCHAD使產(chǎn)卵前期和雌蟲壽命延長,對產(chǎn)卵期無顯著影響。敲除HSD基因的相對表達量分別下降了71.7%(CBM+dsHSD VS CBM),72.6%(CBM+dsHSD VS CBM+dsGFP)。沉默HSD灰飛虱的產(chǎn)卵量分別減少了72.8%(CBM+dsHSD VS
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