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1、抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆(RoundupReadySoybean簡(jiǎn)稱RRS)是美國孟山都公司通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育而成的轉(zhuǎn)基因作物新品種,其釋放到農(nóng)田后的風(fēng)險(xiǎn)與安全性備受國內(nèi)外關(guān)注。
本論文以RRS、親本(RRS-S)、栽培大豆(D-46)和野生大豆(W-S)四種不同基因型大豆為實(shí)驗(yàn)材料,進(jìn)行對(duì)比分析。試驗(yàn)采用PCR-DGGE結(jié)合amoA基因測(cè)序的方法,研究轉(zhuǎn)基因大豆對(duì)根際土壤中與氮素轉(zhuǎn)化有關(guān)的功能性菌類-氨氧化細(xì)菌(AOB)和氨氧
2、化古菌(AOA)群落多樣性的影響。
對(duì)氨氧化細(xì)菌(AOB)群落研究結(jié)論如下:RRS根際土壤氨氧化細(xì)菌(AOB)的多樣性指數(shù)(Dsh)及均勻度指數(shù)(Jsh)均要低于其親本RRS-S、W-S與D-46;主成分分析顯示,RRS與其他基因型大豆根際土壤氨氧化細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)差異較大,尤其與親本RRS-S有很大差異;amoA基因測(cè)序與系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建進(jìn)一步證實(shí)了不同基因型大豆根際土壤的氨氧化細(xì)菌群落中,大多數(shù)屬于duster3a,clu
3、ster9和cluster1類群,其中Nitrosospira類氨氧化細(xì)菌(Nitrosospira-likeAOB)是不同基因型大豆根際土壤中AOB優(yōu)勢(shì)類群。另外,有一部分已檢測(cè)的AOB在文獻(xiàn)中并無記錄和歸類,這其中包括RRS的特有條帶10。RRS的種植抑制了根際土壤中氨氧化細(xì)菌某些類群的生長(zhǎng)(如條帶1、8、12、20所代表的AOB類群),同時(shí)也促進(jìn)了某些類群的生長(zhǎng)(如條帶10和19所代表的AOB類群)。研究結(jié)果表明在一定程度上RRS
4、的種植減少了根際土壤中氨氧化細(xì)菌群落的多樣性,改變了氨氧化細(xì)菌群落的結(jié)構(gòu),并且影響了某些氨氧化細(xì)菌類群的生長(zhǎng)與分布。
對(duì)氨氧化古菌(AOA)群落研究結(jié)論如下:RRS根際土壤氨氧化古菌(AOA)的多樣性指數(shù)(Dsh)和均勻度指數(shù)(Jsh)與其親本(RRS-s)及其他基因型大豆相比差異均不顯著;主成分分析結(jié)果顯示RRS與其他品種大豆(W-S和D-46)根際土壤氨氧化古菌群落結(jié)構(gòu)差異較大,但與親本(RRS-s)差異不明顯;amo
5、A基因測(cè)序與系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建證實(shí)了不同基因型大豆根際土壤中的AOA一部分屬于已有文獻(xiàn)中記錄的土壤AOA類群(soil/sediment),一部分在現(xiàn)有文獻(xiàn)中沒有記錄(soil),但這其中沒有AOA屬于水生環(huán)境(water)或海洋底泥(sediment)中的AOA類群,此外,不同基因型大豆根際土壤樣品中的AOA主要屬于amoA基因的cluster6、cluster7和cluster8,其中cluster6類群的AOA是不同基因型大豆根際土
6、壤中AOA優(yōu)勢(shì)類群。另外,有眾多已檢測(cè)的AOA在文獻(xiàn)中并無記錄和歸類,這其中包括RRS的缺失條帶1、20及25和特有條帶3。試驗(yàn)證明了RRS的種植可能抑制了根際土壤中氨氧化古菌某些類群的生長(zhǎng)(如條帶1、20和25所代表的AOA類群),同時(shí)也促進(jìn)了某些類群的生長(zhǎng)(如條帶3所代表的AOA類群)。這些研究結(jié)果表明RRS的種植對(duì)根際土壤中氨氧化古菌群落的多樣性沒有影響或只有微小影響,同時(shí)對(duì)氨氧化古菌群落的結(jié)構(gòu)也只產(chǎn)生較弱的影響,但影響了某些氨氧
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