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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究以來自國(guó)內(nèi)外的扁穗冰草26份、沙生冰草9份、西伯利亞冰草3份、蒙古冰草1份和蘭莖冰草1份為供試材料,從形態(tài)多樣性分析和ISSR(簡(jiǎn)單重復(fù)序列區(qū)間)分子標(biāo)記兩個(gè)方面進(jìn)行了遺傳多樣性研究。主要研究結(jié)果如下: 1.表型多樣性的研究結(jié)果:冰草屬植物種質(zhì)資源存在豐富的形態(tài)變異,平均變異系數(shù)為22.94%,其中穗軸第一節(jié)間長(zhǎng)的變異系數(shù)最大。方差分析表明,供試材料種間及種內(nèi)均達(dá)到極顯著差異或顯著差異,表現(xiàn)出豐富的形態(tài)學(xué)多樣性。主成分分析
2、,前5個(gè)主成分的累積貢獻(xiàn)率達(dá)76.369%。聚類分析,40份冰草屬種質(zhì)材料在遺傳距離為15處聚為3類:第1類主要是來源于國(guó)外的扁穗冰草、第2類主要是沙生冰草、第3類主要是來源于國(guó)內(nèi)的扁穗冰草。聚類結(jié)果按種明顯區(qū)分開來,但在種間又有交叉;聚類結(jié)果同時(shí)表明,材料地理來源對(duì)系統(tǒng)聚類結(jié)果影響較大。 2.建立了冰草屬ISSR分析的技術(shù)體系,20μL的反應(yīng)體系中,含40 ng模板DNA,0.2mmol/LdNTP,0.5μmol/L ISS
3、R引物,1 U Taq DNA聚合酶,2μL10×PCRBuffer,2.5 mmol/L MgCl2。反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性4 min,94℃變性30 s,60℃(60℃~58℃)退火45 s,72℃延伸1 min45 s,共11個(gè)循環(huán),每個(gè)循環(huán)退火溫度降1℃;94℃變性30 s,50℃(50℃~48℃)退火45 s,共24個(gè)循環(huán);72℃延伸5min,25℃保溫,4℃保存。 3.篩選出11條ISSR引物對(duì)33份冰草材料進(jìn)行P
4、CR擴(kuò)增,結(jié)果表明:33份冰草材料得到84個(gè)位點(diǎn),其中多態(tài)性位點(diǎn)數(shù)為59,多態(tài)性位點(diǎn)百分率為70.2%,說明供試材料間存在較大的遺傳變異,多態(tài)性豐富。冰草屬材料的相似性系數(shù)分析,ISSR標(biāo)記的GS值在0.083到0.706之間,平均GS值為0.395。運(yùn)用NTSYS軟件,得到33個(gè)品種間的親緣關(guān)系樹狀圖,在GS值為0.52處將33份材料聚為4類,材料地理來源對(duì)系統(tǒng)聚類結(jié)果影響較大,基本依地理距離聚類,各來源地的材料在聚類圖又有交叉現(xiàn)象,
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