外源亞精胺緩解黃瓜幼苗鹽脅迫傷害的蛋白質(zhì)組學(xué)及抗氧化機(jī)制研究.pdf

1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文外源亞精胺緩解黃瓜幼苗鹽脅迫傷害的蛋白質(zhì)組學(xué)及抗氧化機(jī)制研究姓名：杜長(zhǎng)霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師：郭世榮201006外源亞精胺緩解黃瓜幼苗鹽脅迫傷害的蛋白質(zhì)組學(xué)及抗氧化機(jī)制研究47)]裂解后按800“g上樣，梯度低壓除鹽進(jìn)行第一向等電聚焦達(dá)到總時(shí)間電壓積為35000Vh，膠條平衡后進(jìn)行第二向垂直的SDSPAGE(125％)電泳，考馬斯亮藍(lán)染色后獲得背景清晰、蛋白質(zhì)分辨率較高的雙向電泳圖譜。外源Spd

2、對(duì)鹽脅迫下黃瓜幼苗根系蛋白質(zhì)組影響的研究：比較對(duì)照和鹽脅迫處理的根系2DE圖譜發(fā)現(xiàn)了34個(gè)差異表達(dá)蛋白點(diǎn)，29個(gè)蛋白點(diǎn)成功得到鑒定，其中21個(gè)蛋白點(diǎn)在鹽脅迫下上調(diào)，spot12(液泡ATP合成酶催化亞基A)、spot13(熱激蛋白70)、spot21(類GRP蛋白2)和spot34(線粒體蘋(píng)果酸脫氫酶)，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的鹽誘導(dǎo)特性；8個(gè)蛋白點(diǎn)在鹽脅迫下下調(diào)，spot19(丙酮酸脫氫酶E1組分B亞基)、spot24(果糖二磷酸醛縮酶)和spo

3、t33(抗壞血酸過(guò)氧化物酶)，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的鹽抑制特性。外源Spd處理改變鹽脅迫介導(dǎo)的差異蛋白質(zhì)的積累特性，2759％的差異蛋白參與代謝、2413％參與防御脅迫反應(yīng)、1724％是調(diào)節(jié)蛋白，其它為能量和轉(zhuǎn)運(yùn)、蛋白質(zhì)生物合成和功能未知等蛋白這些結(jié)果暗示：外源Spd介導(dǎo)鹽脅迫下黃瓜幼苗根系蛋白質(zhì)的差異調(diào)節(jié)，可能通過(guò)修正代謝途徑響應(yīng)鹽脅迫，增強(qiáng)黃瓜植株耐鹽性外源Spd對(duì)黃瓜幼苗鹽逆境應(yīng)答蛋白基因表達(dá)的影響：除apx和叼，其它8個(gè)候選轉(zhuǎn)錄子與對(duì)應(yīng)的

4、蛋白豐度表現(xiàn)出了一致的轉(zhuǎn)錄積累特性，且hsp70、apx、czsod、ela和cat3對(duì)鹽脅迫反應(yīng)最大，推測(cè)這幾個(gè)轉(zhuǎn)錄子與黃瓜植株耐鹽性有關(guān)。除napod、uq和apx，其它7個(gè)候選轉(zhuǎn)錄子響應(yīng)外源Spd積累特性與它們相應(yīng)蛋白響應(yīng)Spd的積累特征一致，且5a11哩5、napod和cat3對(duì)外源Spd處理反應(yīng)最大，推測(cè)外源Spd增強(qiáng)黃瓜植株耐鹽性可能與這幾個(gè)轉(zhuǎn)錄子關(guān)系密切表明大多數(shù)候選蛋白轉(zhuǎn)錄積累特性與誘導(dǎo)蛋白積累特性一致，外源Spd從轉(zhuǎn)錄

5、水平上調(diào)節(jié)了鹽脅迫下差異蛋白的表達(dá)，增強(qiáng)黃瓜植株耐鹽性外源Spd對(duì)鹽脅迫下黃瓜幼苗活性氧代謝的影響：NaCI脅迫下，葉片和根系自由基的產(chǎn)生速率、H202和MDA含量顯著增加，POD和SOD活性提高。外源Spd處理進(jìn)一步提高鹽脅迫下黃瓜幼苗葉片乖根系中POD和SOD的活性，同時(shí)降低自由基的產(chǎn)生速率、H202和MDA含量，在葉片中分別檢測(cè)到5條IsOD同工酶、5條SOD同工酶和2條CAT同工酶條帶，在根系中分別檢測(cè)到7條POD同工酶、4條S