木繡球與莢蒾雜交的生殖生物學(xué)研究.pdf

1、莢蒾屬（Viburnum L.）是忍冬科(Caprifoliaceae)中最大的屬，木繡球（Viburnummacrocephalum）和莢蒾(Viburnum dilatatum)屬于莢蒾屬(Viburnum)。本試驗于泰山林業(yè)科學(xué)院進行，以荷蘭引進的莢蒾‘蒂娜’和‘泰山’木繡球（通過山東省林木優(yōu)良品種審定）為試材。研究內(nèi)容主要涉及以下幾個方面:一是種間雜交育種，探究雜交親和性;二是對比分析F1和父母本的形態(tài)指標(biāo);三是‘泰山’木繡球與

2、莢蒾‘蒂娜’雜交結(jié)實機理的研究，其中包括‘泰山’木繡球花性調(diào)查、花粉萌發(fā)及花粉管生長情況的熒光顯微觀察、F1及父母本指紋圖譜的建立。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1、以‘泰山’木繡球（Viburnum macrocephalum‘Taishan’）為母本、莢蒾‘蒂娜’（Viburnum dilatatum‘Dina’）為父本，采用6種授粉方式，以常規(guī)授粉方式作為對照，對‘泰山’木繡球（Viburnum macrocephal

3、um‘Taishan’）授粉，初步探討種間雜交親和性，統(tǒng)計坐果率。不同授粉方式對‘泰山’木繡球兩性花坐果的影響方式不同:重復(fù)授粉坐果率最高，可高達66.7％，提前授粉和延遲授粉均降低了坐果率，僅為33.3％和6.7％，母本去雄與否對雜交坐果率影響不大，采用切割柱頭法坐果率為0。綜上，適宜‘泰山’木繡球授粉的方式為重復(fù)授粉，坐果率比較高。
　　對于‘泰山’木繡球的單性花，采用6種授粉方式:常規(guī)授粉、切割柱頭、提前授粉、延遲授粉、重復(fù)

4、授粉、未去雄授粉，坐果率均為0。胚珠發(fā)育到一定階段出現(xiàn)敗現(xiàn)象。
　　2、觀察并對比F1與父母本的各種形態(tài)指標(biāo)。測量并記錄父母本及子代的葉、花、節(jié)間長、果實等形態(tài)指標(biāo)?！┥健纠C球（Viburnum macrocephalum‘Taishan’）花有二型:大部分是不孕花，只有一部分是可育花。初步確定‘泰山’木繡球自然條件下不育的原因是雄蕊退化和雌蕊發(fā)育不全。F1的形態(tài)指標(biāo)與父母本之間存在一定的相似性。
　　3、‘泰山’木繡球

5、花性調(diào)查:‘泰山’木繡球花雜性，有雌花和兩性花兩種花型，兩性花所占比例從0％-26.32％不等，有的植株花序上基本都是雌花，兩性花甚至為0。兩性花的比例明顯低于雌花比例。
　　4、莢蒾‘蒂娜’的花粉在10％蔗糖+0.02％硼酸培養(yǎng)基中萌發(fā)率最高。在根據(jù)觀測結(jié)果，莢蒾‘蒂娜’的花粉萌發(fā)率30％以上，可用于人工授粉?！┥健纠C球花粉在25中培養(yǎng)基中:5％蔗糖+0.01％硼酸，5％蔗糖+0.02％硼酸，5％蔗糖+0.03％硼酸，5％蔗

6、糖+0.04％硼酸，5％蔗糖+0.05％硼酸;10％蔗糖+0.01％硼酸，10％蔗糖+0.02％硼酸10％蔗糖+0.03％硼酸，10％蔗糖+0.04％硼酸，10％蔗糖+0.05％硼酸;15％蔗糖+0.01％硼酸，15％蔗糖+0.02％硼酸，15％蔗糖+0.03％硼酸，15％蔗糖+0.04％硼酸，15％蔗糖+0.05％硼酸;20％蔗糖+0.01％硼酸，20％蔗糖+0.02％硼酸，20％蔗糖+0.03％硼酸，20％蔗糖+0.04％硼酸，20

7、％蔗糖+0.05％硼酸;25％蔗糖+0.01％硼酸，25％蔗糖+0.02％硼酸，25％蔗糖+0.03％硼酸，25％蔗糖+0.04，％硼酸25％蔗糖+0.05％硼酸，萌發(fā)率均為0，初步確定‘泰山’木繡球花粉無活力。
　　5、‘泰山’木繡球兩性花與莢蒾‘蒂娜’雜交，取授粉后不同時間段的花柱壓片，熒光顯微觀察發(fā)現(xiàn)，授粉2～3h，花粉在柱頭上未萌發(fā)，6h開始萌發(fā)，花粉管在授粉24h后，伸入花柱的1/2處，花粉管數(shù)量差異不明顯，花粉管中存在

8、間斷出現(xiàn)的胼胝質(zhì)。72h后，花粉管均伸入花柱的3/4處，96h后，花粉管穿過花柱的基部并進入子房室，只有極少數(shù)花粉管進入子房室。對于‘泰山’木繡球單性性花與莢蒾‘蒂娜’雜交，0h～144h均未見花粉萌發(fā)。
　　6、分子標(biāo)記AFLP的電泳結(jié)果顯示:3個雜交子代均繼承了父本和母本的遺傳信息，確實為種間雜種?！┥健纠C球×莢蒾‘蒂娜’的雜交子代共有25條帶，三個子代與親本之間的共有帶為110、120、150、210、220bp，共5條

9、帶。雜交子代1號在70、80、90、100、140、160、170、180、190、200、230、240、250、310、340bp部位有父本的譜帶;在320、380bp部位有母本的譜帶3個子代均從父母本獲得了遺傳信息，同時三個子代也表現(xiàn)出不同于父本和母本的遺傳變異，這是表型差異的遺傳基礎(chǔ)。
　　7、雜交1號、雜交2號、雜交3號與‘泰山’木繡球的相似系數(shù)分別為:0.4417、0.40690、.4391。雜交1號、雜交2號、雜交3