針-板電暈電場的構(gòu)建及針板電暈電場介導(dǎo)大豆DNA轉(zhuǎn)化花棒的初步研究.pdf

1、目前，針-板電暈電場廣泛的應(yīng)用于空氣凈化、病毒滅活和聚合物表面的改性等方面，取得了令人矚目的成果。本論文成功的構(gòu)建了針-板電暈電場，將它做為轉(zhuǎn)基因的試驗器材，一方面進拓寬了針-板電暈電場的研究領(lǐng)域，另一方面豐富了轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方法。
　　 針-板電暈電場處理花棒種子引起的誘變效應(yīng)的研究過程中發(fā)現(xiàn)，針-板電暈電場的處理條件對花棒種子的發(fā)芽率有一定影響。實驗結(jié)果表明，當(dāng)處理時間為90min處理電壓為14～15kv時發(fā)芽率能達到相對較高

2、值。
　　 對花棒愈傷組織誘導(dǎo)的研究過程中發(fā)現(xiàn)，MS誘導(dǎo)培養(yǎng)基中含6-BA的濃度為1.5mg/L；2，4-D的濃度為2.5mg/L左右時，花棒愈傷組織的出愈率非常高，而且愈傷組織的質(zhì)量最好。用針-板電暈電場處理花棒愈傷組織時發(fā)現(xiàn)，不同處理條件對愈傷組織的存活率有一定影響，愈傷組織不宜在15kv電壓下較長時間處理。
　　 在針-板電暈電場介導(dǎo)重組質(zhì)粒pBI121/Gy3轉(zhuǎn)化花棒愈傷組織中，實驗結(jié)果表明將花棒愈傷組織在14k

3、v的電壓下處理90min時，愈傷組織的Gus瞬間表達率能達到52%左右，愈傷組織的存活率也較高，能達到80%左右。因此，利用針-板電暈電場介導(dǎo)DNA轉(zhuǎn)化愈傷組織的最佳處理條件為14kv的電壓下處理90min。
　　 將針-板電暈電場處理后的花棒愈傷組織移入含不同激素配比的分化培養(yǎng)基中，根據(jù)愈傷組織叢生芽分化率的實驗結(jié)果，可以得出MS培養(yǎng)基中含6-BA為2.0 mg/L、NAA為0.2 mg/L時，花棒愈傷組織分化時間相對較短并且