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文檔簡介
1、非生物脅迫(干旱、洪澇、高溫、冷害和鹽堿等),極大地降低了主要農(nóng)作物的產(chǎn)量,年平均損失超過總產(chǎn)量的50%。在全世界范圍,干旱是限制作物產(chǎn)量的一個主要因素。世界約45%農(nóng)田面積遭受不同程度的干旱。生殖生長期是水稻對干旱脅迫最敏感的時(shí)期之一,此時(shí)期受到干旱脅迫會導(dǎo)致稻穗和谷粒變小,從而造成產(chǎn)量的巨大損失。很多關(guān)于干旱脅迫機(jī)制的研究涉及目標(biāo)基因的表達(dá),目前實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)被廣泛應(yīng)用于檢測目標(biāo)基因表達(dá)產(chǎn)物mRNA的變化。
本研究
2、以水稻品種川秈955和9311為材料,建立和優(yōu)化了實(shí)時(shí)定量PCR的反應(yīng)條件,利用篩選得到的穩(wěn)定管家基因?yàn)閮?nèi)標(biāo),構(gòu)建了實(shí)時(shí)定量PCR檢測目的基因在干旱脅迫條件下表達(dá)的方法,研究了生殖生長期干旱脅迫下GS3基因(控制粒重和粒長的主效QTL)的差異表達(dá)。主要研究結(jié)果如下:
1.干旱脅迫條件下不同水稻品種粒型的變化
在幼穗分化期干旱脅迫處理?xiàng)l件下,2個供試品種的谷粒有不同程度的縮小。其中川秈955的粒長、粒寬及千粒重
3、的減小均達(dá)到了極顯著水平,而長寬比的變化不顯著;9311僅粒長的縮短達(dá)到了顯著水平,粒寬、長寬比和千粒重的變化則沒有達(dá)到顯著水平。
2.干旱脅迫條件下GS3基因在幼穗分化不同階段的差異表達(dá)
在水稻品種川秈955幼穗分化的初期(第3天和第6天),GS3在干旱脅迫條件下的表達(dá)水平略低于對照;然而在幼穗分化的第11天(穎花原基分化期),GS3在干旱處理下的表達(dá)水平急劇升高,達(dá)對照的4.8倍;在幼穗分化的第18天,G
4、S3在干旱處理下的表達(dá)水平有所下降,但仍高于對照。水稻品種9311中GS3在幼穗分化不同時(shí)期的差異表達(dá)比川秈955相對較小,但顯示了相似的變化趨勢。干旱脅迫下谷粒的縮小可能因?qū)攘4笮∑鹭?fù)調(diào)控作用的GS3基因的過表達(dá)引起。
3.管家基因的表達(dá)穩(wěn)定性
實(shí)時(shí)定量PCR檢測目標(biāo)基因在不同條件下的差異表達(dá)需要以相對穩(wěn)定表達(dá)的管家基因?yàn)閮?nèi)標(biāo)。對8個actic種內(nèi)同源基因、b-tub、和eEF-1共10個管家基因在干旱脅
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