柑橘木虱內(nèi)共生菌檢測與取食時間對其獲毒效率的影響.pdf

1、柑橘木虱（Diaphorina citriKuwayama）屬半翅目Hemiptera，木虱科Psyllidae，是蕓香科植物上的重要害蟲。柑橘木虱是柑橘黃龍病（Citrus huanglongbing，HLB）亞洲種“CandidatusLiberibacteria asiticus”和美洲種“CandidatusLiberibacteria americus”在田間傳播的唯一媒介昆蟲。
　　昆蟲體內(nèi)含有大量的內(nèi)共生菌，已有研究

2、表明，柑橘木虱的獲毒效率與其體內(nèi)的內(nèi)共生菌種類與含量密切相關(guān)，然而，迄今為止，柑橘木虱體內(nèi)的共生菌感染情況尚不明確，本文利用分子生物學(xué)手段對廣東地區(qū)柑橘木虱種群內(nèi)共生菌類群進行檢測，以期為柑橘木虱的生物防治提供新的思路和理論依據(jù)。
　　柑橘黃龍病的田間傳播和流行與木虱的帶菌量及其活動有十分密切的關(guān)系，研究取食時間對柑橘黃龍病獲菌率的影響是研究柑橘木虱與柑橘黃龍病的互作關(guān)系的重要內(nèi)容之一。因此，本論文在柑橘木虱共生菌檢測，取食時間影

3、響木虱獲毒效率方面做了幾個方面的研究工作。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.柑橘木虱內(nèi)共生菌檢測
　　本研究應(yīng)用 PCR方法，對采集自廣東潮州、茂名、江門、佛山、中山、云浮以及廣州等7個地區(qū)的柑橘木虱種群進行內(nèi)共生菌種類和感染率的檢測。研究結(jié)果顯示，廣東7個地區(qū)采集的柑橘木虱，在共生菌種類上并無明顯差異，但感染率相差較大。所有柑橘木虱均含有原生共生菌 Carsonella（100％），其余4種共生菌 Wolbachia、Ar

4、senophonus、Profftella、Oxalobacter&Herbaspirillum感染率各不相同。4種共生菌感染率從高到底依次為Profftella95.91%，Wolbachia88.14%，Arsenophonus78.75%，Oxalobacter& Herbaspirillum40.95%。
　　2.柑橘黃龍病病菌的檢測
　　柑橘黃龍病病菌Ca.L.asiaticus在潮州、茂名、江門、佛山、中山、云浮

5、6個地區(qū)均有檢出，感染率由高到低依次為云浮93.33%、潮州86.67%、江門83.33%、佛山80.00%、中山66.67%、茂名63.33%，說明柑橘黃龍病在廣東省傳播的范圍已經(jīng)很廣，危害已經(jīng)很嚴重。
　　3.取食時間對柑橘木虱獲取黃龍病菌效率的影響
　　已有結(jié)果表明柑橘木虱在帶病樹葉韌皮部取食1小時后即可在體內(nèi)檢測出黃龍病病原，且?guī)Ь上x在柑橘嫩梢上取食5小時以上即可使得健康苗木感病。但是迄今為止，取食時間對柑橘木虱黃

6、龍病獲毒效率的影響機制尚不明確。本實驗按照1、3、5、7、9、11小時6個接蟲時間，早上：7點-15點、下午：15點-23點和晚上：23點-7點3個時間段將柑橘木虱接蟲在帶菌柑橘苗上。利用巢式 PCR技術(shù)檢測不同接蟲時間單頭柑橘木虱體內(nèi)黃龍病病原。研究結(jié)果表明，接蟲時間1、3、5、7小時的接蟲時間柑橘木虱獲菌率無差異，9小時和11小時的接蟲時間柑橘木虱獲菌率無差異。9小時和11小時接蟲時間和1、3、5、7四個接蟲時間的獲毒率存在差異。早