球孢白僵菌的生物學(xué)特性研究及其對(duì)西花薊馬的防效.pdf

1、將田間采集的感病蟲體在青島農(nóng)業(yè)大學(xué)昆蟲生態(tài)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分離、鑒定和ITS序列分析;同時(shí)篩選對(duì)西花薊馬成蟲具有高效致死作用的菌株，在掃描電鏡下觀察其在西花薊馬成蟲體表的附著、萌發(fā)和侵染的過程;并將高毒力的白僵菌與低劑量的多殺菌素混合后噴施西花薊馬成蟲，比較各處理的毒力差異性;同時(shí)，比較經(jīng)相同濃度白僵菌處理的西花薊馬成蟲和煙薊馬成蟲的死亡率差異。主要結(jié)果如下:
　　 1.白僵菌生物學(xué)特性研究
　　 將室外采集的被蟲生真菌侵染的

2、草履蚧帶回室內(nèi)進(jìn)行分離純化，經(jīng)形態(tài)學(xué)初步鑒定為球孢白僵菌（Beauveria bassiana），但各菌株的菌落形態(tài)、生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量存在一定差異，通過PCR擴(kuò)增得到CYT4菌株的ITS序列，并建立系統(tǒng)進(jìn)化樹，確定CYT4菌株為球孢白僵菌（B.bassiana）。
　　 采用37℃、38℃、39℃和40℃的高溫分別處理CYT1、CYT4、CYT5、CYT8和CYT10菌株的孢子各1h、2h、3h、4h、5h，結(jié)果表明，37℃高溫

3、對(duì)孢子萌發(fā)幾乎無影響，且萌發(fā)率略高于25℃的對(duì)照處理，其它高溫處理時(shí)間越長(zhǎng)，孢子萌發(fā)率越低。低溫采用5℃和10℃處理10d，結(jié)果表明，相較于25℃，低溫處理的孢子萌發(fā)率明顯降低，但5℃和10處理之間，萌發(fā)率差異不顯著。
　　 2.白僵菌對(duì)西花薊馬的毒力及其在體表侵染的掃描電鏡觀察
　　 用分離的13株白僵菌的1×108孢子·mL-1的孢懸液處理西花薊馬成蟲，CYT12和CYT4菌株對(duì)西花薊馬成蟲的死亡率最高分別為:81.

4、48％和66.08％，CYT11菌株致死率最低，僅為17.83％，說明各菌株間毒力差異較為明顯。在室內(nèi)測(cè)定了白僵菌CYT4菌株的不同濃度對(duì)西花薊馬成蟲和若蟲的致死作用。結(jié)果表明球孢白僵菌的致死率隨濃度的增加而增加，處理6d后，1×109、1×108、1×107和1×106孢子·mL-1的孢懸液對(duì)成蟲的致死率分別為83.57％、66.08％、49.78％和20.22％，對(duì)二齡若蟲的致死率分別為72.84％、42.49％、33.49％和10

5、.04％，但均低于對(duì)成蟲的致死率。
　　 用1×108孢子·mL-1白僵菌處理西花薊馬成蟲后，掃描電鏡下觀察球孢白僵菌孢子在成蟲體表的附著情況，結(jié)果如下:在觸角基節(jié)、復(fù)眼、足部褶皺區(qū)、剛毛窩、翅、產(chǎn)卵器和各體節(jié)連接處均有大量的分生孢子附著和萌發(fā)，但腹部的分生孢子量很少，尤其在節(jié)間膜處幾乎無分生孢子;分生孢子在1h時(shí)即附著在體表，12h時(shí)已萌發(fā)，36h時(shí)有穿透體壁現(xiàn)象，48h以后整個(gè)蟲體被菌絲包被。
　　 3.白僵菌與低劑

6、量多殺菌素混合對(duì)西花薊馬成蟲的毒力
　　 0.03、0.04、0.05、0.06μL·mL-1的多殺菌素與1×108孢子·mL-1的球孢白僵菌混合后，孢子萌發(fā)率均在90％以上，初步證明多殺菌素對(duì)白僵菌孢子萌發(fā)無影響。1×108孢子·mL-1白僵菌懸浮液與低劑量多殺菌素混合對(duì)西花薊馬成蟲的致死作用結(jié)果顯示:在RH90％的條件下，0.04和0.06μL·mL-1的多殺菌素與1×108孢子·mL-1的球孢白僵菌混合后，對(duì)西花薊馬的致死

7、率達(dá)到89.42％和95.76％;改變濕度條件時(shí)，在RH90％處理8h的死亡率≈RH90％處理24h＞RH40％處理。
　　 4.白僵菌對(duì)煙薊馬的毒力
　　 在相對(duì)濕度90％條件下處理24h，1×108孢子·mL-1白僵菌對(duì)煙薊馬成蟲致死率的三次重復(fù)分別為50.73％、65.82％和77.08％，均低于對(duì)西花薊馬成蟲的致死率70.95％、71.33％和77.75％，但各處理間差異不顯著。均高于完全在相對(duì)濕度40％條件下處