不同松林根際促生細菌的分離、篩選及其促生效應研究.pdf

1、植物根際促生細菌（Plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR）具有固氮、解磷、解鉀及分泌激素等生物活性。利用微生物固氮、解磷、解鉀的作用促進植物生長，彌補土壤營養(yǎng)的不足，已成為當前國內(nèi)外的研究熱點。但這方面的研究多集中在農(nóng)作物上，關(guān)于林木根際促生細菌的研究報道尚少。本試驗采用平板稀釋法對廣西南寧市郊區(qū)的濕地松、加勒比松、人工馬尾松和飛播馬尾松4種松林的根際促生細菌進行分離篩選。運用乙炔還原法（AR

2、A）測定固氮菌的固氮酶活性；通過測定菌株在固體平板以及液體培養(yǎng)基中的解無機磷能力，篩選解無機磷菌；通過測定菌落周圍產(chǎn)生解有機磷圈的大小，對解有機磷菌的解有機磷能力進行比較；采用火焰分光光度計測定解鉀菌的解鉀能力，篩選出生物活性較強的菌株。探討振蕩培養(yǎng)前后培養(yǎng)液pH值和解磷、解鉀量的關(guān)系，研究促生細菌的接種效應，同時對生物活力強的菌株進行16S rDNA序列測定，并在Genbank上進行比對分析，初步確定菌株的分類地位。
　　 主

3、要研究結(jié)果如下：
　　 （1）不同松林的根際促生細菌總量差異明顯，加勒比松林最多，人工馬尾松林最少，其他兩種松林相差不大；各類根際促生細菌數(shù)量在不同松林間均有顯著性差異；不同松林的根際促生細菌數(shù)量都以固氮菌最多，解鉀菌次之，解無機磷菌最少；4種松林中，不同松林兩兩間根際促生細菌的綜合效應差異均達顯著性水平；主成分分析結(jié)果表明，不同松林土壤肥力的排序是：飛播馬尾松>濕地松>加勒比松>人工馬尾松。
　　 （2）根際促生細菌的

4、生物活力測定結(jié)果顯示，固氮菌N4和N9菌株具有較強的固氮酶活性，其固氮酶活性分別為260.975 nmolC2H4/hL和149.787 nmolC2H4/hL：解無機磷菌P3、P1菌株的解無機磷能力較強，解無機磷量分別為7.00μg/ml和3.87μg/ml；解有機磷菌YP27菌株的解有機磷能力最強，解有機磷圈面積為5.29c㎡，遠遠大于其他菌株；解鉀菌K6菌株具有較強的解鉀能力，解鉀量為2.3μg/ml。解無機磷菌和解鉀菌生物活力的

5、定量測定中，它們的pH值下降與解無機磷量、解鉀量的增加都存在正相關(guān)關(guān)系，其中，解無機磷菌的解無機磷能力與pH值的下降達到極顯著相關(guān)關(guān)系。
　　 （3）對篩選出生物活力強的PGPR菌株進行16S rDNA序列測定，結(jié)果分析表明：固氮菌以腸桿菌屬（Enterobacter sp．）為主，占44.4％，另外還有根瘤菌屬（Rhizobium tropici）、土壤桿菌屬（Agrobacterium tumefaciens）、伯克霍爾德氏

6、菌屬（Burkholderia sp．）和歐文菌屬（Erwinia sp．）；解無機磷菌以假單胞菌屬（Pseudomonas sp．）為主；解鉀菌均為伯克霍爾德氏菌屬，各菌株的16S rDNA序列已在GenBank上注冊。
　　 （4）根際促生細菌回接試驗結(jié)果表明，10處理的綜合效應最好，即接種主菌為N11的處理綜合效應最好，其對苗木生長促進、根際微環(huán)境的改進綜合作用最大。試驗篩選出N11、P9、K8分別為最好的固氮菌、解無機磷