中江丹參連作土壤微生物特性研究.pdf

1、從四川省中江石泉鄉(xiāng)丹參GMP示范基地采集患病丹參根際(HD1)和非根際土壤(HD2),正常生長(zhǎng)丹參根際(CK1)和非根際土壤(CK2)土樣，測(cè)定了供試土樣的微生物類群數(shù)量、微生物量碳、氮以及土壤酶活性。用稀釋平板法分離獲得46株細(xì)菌，采用BOXAIR-PCR、16SrDNAPCR-RFLP、16SrRNA基因全序列分析，研究了供試細(xì)菌的遺傳多樣性，初步確定了代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育及分類地位。同時(shí)，利用PCR-DGGE技術(shù)分析了供試土樣的微生

2、物多樣性。結(jié)果如下：
　　 (1)中江丹參種植土壤根際與非根際土壤中微生物數(shù)量差異較大。細(xì)菌數(shù)量最多，放線菌其次，真菌最少。
　　 (2)從中江丹參種植土壤中分離獲得了46株細(xì)菌，其中，G+占有相當(dāng)?shù)膬?yōu)勢(shì)，共有25株，G-共有21株。其中G+細(xì)菌中芽孢桿菌為優(yōu)勢(shì)菌群。
　　 (3)土壤微生物量的測(cè)定結(jié)果表明，正常生長(zhǎng)丹參的土壤(CK1)根際微生物量碳、氮比患病丹參土壤(HD1)的高出32.4％和64％，而非根際土

3、壤（CK2和HD2）差別不明顯。
　　 (4)從土壤酶活性看，患病丹參根際土壤(HD1)，其酶活比對(duì)照土壤(CK1)低，其中，ALP降低53.3％，URE降低38.5％,CAT降低11.1％。說(shuō)明患病丹參可降低其根際土壤的酶活性。
　　 (5)遺傳多樣性分析結(jié)果表明，丹參種植土壤細(xì)菌存在著豐富的遺傳多樣性。BOXAIR-PCR將46株細(xì)菌被分為7個(gè)遺傳群；在16S rDNA PCR-RFLP中，這些菌株在79％的水平處被

4、分為7個(gè)遺傳群。(6)據(jù)16S rRNA基因全序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，確定了12個(gè)代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育地位和分類地位，它們分屬于芽孢桿菌屬(Bacillus)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、短桿菌屬（Brevibacterium）、土壤桿菌屬(Agrobacterium)、Lysinibacillus屬。
　　 (7)在PCR-DGGE分析中，不同樣品之間條帶差異明顯，多樣性指數(shù)差別較大。而在連作患病丹參根際發(fā)現(xiàn)有球毛殼屬C