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1、1,2,4-三氯苯(1,2,4-TCB)是工業(yè)中最常見(jiàn)的一類重要的氯苯類化合物(CBs),在各種水體中均已檢測(cè)到很高的殘留量,水生生物可以通過(guò)食物鏈的傳遞或直接從水體中吸收環(huán)境污染物。因而研究1,2,4-TCB在環(huán)境中的行為方式及生態(tài)毒性效應(yīng),對(duì)于了解1,2,4-TCB在水環(huán)境中的遷移分布及致毒機(jī)理具有重要意義。本論文利用微宇宙模擬水生生態(tài)系統(tǒng)對(duì)1,2,4-TCB在水體環(huán)境中的行為及對(duì)魚(yú)類和植物的生物毒性效應(yīng)進(jìn)行了研究。
2、1.1,2,4-TCB在模擬水生生態(tài)系統(tǒng)中的環(huán)境行為研究
利用微宇宙模擬水生生態(tài)系統(tǒng)對(duì)1,2,4-TCB在水體、生物體(紅劍魚(yú)、銅錢(qián)草、對(duì)蝦)不同介質(zhì)及生物體不同組織和器官中含量、分布、富集積累等動(dòng)態(tài)變化過(guò)程進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),水環(huán)境中1,2,4-TCB10d內(nèi)有66.7%向大氣中揮發(fā),而剩余的1,2,4-TCB向不同生物體內(nèi)轉(zhuǎn)移或代謝,其中植物體含量?jī)?nèi)占有1.8%,魚(yú)體含量占22.68%,對(duì)蝦體內(nèi)含量占8.78%。進(jìn)一
3、步對(duì)其在各種生物體內(nèi)的吸附過(guò)程進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),植物銅錢(qián)草對(duì)1,2,4-TCB有一定程度的吸收且其吸附過(guò)程是一個(gè)物理吸附過(guò)程,在處理10d時(shí)1,2,4-TCB在植物體內(nèi)達(dá)到最高隨后逐漸降低,到第15d后,植物體內(nèi)的1,2,4-TCB維持在平衡狀態(tài);且在莖組織中富集量高于葉片;對(duì)蝦和魚(yú)對(duì)1,2,4-TCB有不同程度的吸附和積累,在前10d,1,2,4-TCB進(jìn)入各組織中的速率最快,隨后進(jìn)入魚(yú)體和蝦體的速率減慢,最后均維持在一個(gè)平衡狀態(tài)。魚(yú)體內(nèi)
4、各組織富集程度:心臟>鰓>性腺>腸>肌肉。這說(shuō)明1,2,4-TCB在各組織中積累量與不同組織中脂肪含量密切相關(guān)。由于對(duì)蝦甲殼的保護(hù)作用,在前10d其體內(nèi)1,2,4-TCB含量變化較魚(yú)體各組織變化緩慢,且低于魚(yú)體各組織中含量。1,2,4-TCB在魚(yú)體內(nèi)富集最高,其次是對(duì)蝦,水草中富集最低。
2.1,2,4-TCB的生物毒性效應(yīng)
(1)以水培銅錢(qián)草為材料,研究1,2,4-三氯苯(1,2,4-TCB)染毒引起植株葉
5、綠素、類胡蘿卜素和可溶性蛋白含量等生理指標(biāo)的毒性響應(yīng),并從葉片丙二醛(MDA)含量及各種抗氧化酶(超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)和過(guò)氧化物酶(POD))的改變探討了1,2,4-TCB的毒性作用機(jī)理。結(jié)果表明:低濃度1,2,4-TCB(5、10 mg·L-1)處理,銅錢(qián)草葉片各種生理代謝指標(biāo)與1,2,4-TCB處理呈現(xiàn)一定濃度-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系,但與對(duì)照組間無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。葉綠素含量、葉綠素a/b和可溶性蛋白含量均隨
6、著1,2,4-TCB處理時(shí)間延長(zhǎng)先升高后降低;MDA含量隨處理時(shí)間和濃度增加而增加,SOD、CAT和POD活性隨處理時(shí)間延長(zhǎng)先升高后降低。相同處理時(shí)間,低濃度(5、10 mg·L-1)組銅錢(qián)草葉片抗氧化酶活性增加,在10 mg·L-11,2,4-TCB處理4~6 d時(shí),各種抗氧化酶活性均達(dá)到最大。而高濃度(15、20 mg·L-1)組抗氧化酶活性與對(duì)照組相比,顯著降低,各組間也呈現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
(2)以半靜態(tài)生物試驗(yàn)方式研
7、究1,2,4-TCB對(duì)斑馬魚(yú)的毒性和胚胎發(fā)育毒性。結(jié)果表明1,2,4-TCB初加入時(shí)會(huì)引起斑馬魚(yú)跳動(dòng)、亂竄、呼吸急促等毒性癥狀,在24、48、72 h其半數(shù)致死濃度(LC50)分別為4.33、4.26、2.72 mg·L-1。1,2,4-TCB對(duì)斑馬魚(yú)胚胎體外染毒及對(duì)成年斑馬魚(yú)染毒其胚胎發(fā)育均產(chǎn)生各種毒性癥狀,可導(dǎo)致胚胎發(fā)育畸形,主要的毒性特征為:原腸胚外凸,尾短,心包囊水腫,脊椎彎曲,甚至死亡。不同階段斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育的毒理學(xué)終點(diǎn)不同。
8、1,2,4-TCB對(duì)斑馬魚(yú)正常受精和產(chǎn)卵數(shù)量均有一定影響。對(duì)成年斑馬魚(yú)染毒,隨著1,2,4-TCB處理濃度的升高,斑馬魚(yú)產(chǎn)卵數(shù)量下降,且正常受精卵數(shù)量減少。胚胎死亡率和致畸率均有所增加,其幼魚(yú)出膜時(shí)間超過(guò)72h。斑馬魚(yú)胚胎體外染毒毒性效應(yīng)比胚胎在成年斑馬魚(yú)體內(nèi)染毒毒性效應(yīng)敏感。
(3)采用1,2,4-TCB對(duì)成年斑馬魚(yú)染毒,研究了其對(duì)斑馬魚(yú)及幼魚(yú)體內(nèi)SOD、CAT和堿性磷酸酶(AKP)活性影響,對(duì)1,2,4-TCB接觸對(duì)斑
9、馬魚(yú)的毒性機(jī)制進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),低濃度(2、4、8 mg·L-1)1,2,4-TCB處理對(duì)SOD活性有一定的應(yīng)激作用,且在暴露8 d后均高于對(duì)照組,而后酶活性降低。當(dāng)16 mg·L-11,2,4-TCB接觸時(shí),斑馬魚(yú)體SOD活性明顯抑制。各處理組CAT活性隨暴露時(shí)間延長(zhǎng)先升高后降低。1,2,4-TCB處理的斑馬魚(yú)體細(xì)胞AKP活性在處理前4 d無(wú)顯著變化,2、4 mg·L-1處理組AKP活性在暴露8 d后與對(duì)照組相比呈極顯著的升高。16
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