常規(guī)知識和基本操作

1、常規(guī)知識和基本操作,臨床檢驗中心,一、血液常規(guī)檢查從接到申請單到報告單發(fā)出,（一）毛細血管采血與標本的檢測 1、毛細血管采血：需血量＜0.1ml的檢測項目—-血細胞計數(shù)、血紅蛋白測定、血液涂片等的采血。 [采血部位] 成人：我們用靜脈采血 兒童：一般用手指-----左手無名指或中指指尖內(nèi)側(cè)為宜。 半歲以下的嬰兒：若手指太小，可用足跟或拇指。 [采

2、血針] 一次性專用采血針。使用時一人一針。避免傳染病的交叉感染 [采血方法] ① 按摩：首先用手指按摩采血部位，使其充血。 ② 消毒：用碘伏消毒皮膚，用兩支無菌干棉簽蘸碘伏消毒兩次。 ③ 刺針：待消毒液自然蒸發(fā)干或消毒時間到后用干棉簽擦干，用左手拇指和食指固定采血部位，蹦緊局部皮膚，右手將一次性專用采血針迅速刺入皮膚，深約2—3mm，立即出針，血液自行流出。,（一）毛細血管采血與標本的檢測,如血流不暢，可于刺針點遠端的四

3、周向內(nèi)稍加壓力，切忌在刺針點近處用力擠捏，以免組織液混入血中而影響檢驗結(jié)果。 ④ 吸血：用消毒干棉簽擦去第一滴血，用一次性微量吸管吸取20µl血液，擦去管外余血，然后將血液吹入預(yù)先準備好的稀釋液中，用上清液沖洗吸管2—3次，混勻。同時推血片。 ⑤ 止血：采血完畢后，用消毒干棉簽在針刺傷口處壓迫止血。 [注意事項] ① 采血部位 ② 嚴格消毒皮膚并擦干 ③ 多項檢查時采血順序

4、 ④ 流血不暢時 ⑤ 出血不止時,（一）毛細血管采血與標本檢測,2、標本的檢測 門診化驗室、急癥化驗室：機器是KX—21，靜脈血和毛細血管血雙通道，測定時應(yīng)先選擇模式，待機器顯示可以測定時，開始檢測。檢測完畢，輸入病人資料，打印報告單。 南院：機器是F-800，WBC、RBC檢測雙通道，稀釋器稀釋管測RBC和PLT，原采血管加2—3滴溶血素，混勻待溶血后檢測WBC和HGB。

5、 北院：F –820 [檢測注意事項] （1）混勻 （2）加溶血素后放置時間不要過長，否則，不分類。,（二）靜脈血采血與標本檢測,1、靜脈采血：需血量＞0.2ml的檢測項目—血細胞比容、ESR測定、凝血因子測定，各種生化項目等，均需用靜脈采血。 [采血部位] 通常采用肘前靜脈。當肘前靜脈不明顯時，可采用手背靜脈或踝部靜脈。嬰幼兒可采用頸外靜脈。 [采血器材與消毒液]

6、采血器材：注射器、試管、墊巾等為一次性，壓脈帶用一次即消毒處理 后再用。 消毒液：碘伏 [采血方法] 1）準備：先按檢驗項目要求，準備好相應(yīng)的器材，如注射器、抗凝管、一次性試管等。若同時有其它檢測項目，一針抽出，如有需空腹抽血的，要詢問是否吃飯，另外，對害怕者需作適當安慰。以肘前靜脈采血為例，患者手臂伸直平放床邊或臺面墊枕上，暴露穿刺部位。,（二）靜脈采血與標本檢測,2）扎壓脈帶

7、 ：找好采血靜脈后，在上臂扎上壓脈帶。 3）消毒：用兩支棉簽蘸碘伏，于欲穿刺皮膚處從內(nèi)向外做順方向環(huán)形消毒兩次。 4）刺入靜脈：取一次性注射器（注意包裝是否封閉，有無過期），使針頭斜面和針管刻度向上，囑病人握緊拳頭，使靜脈顯露。左手拇指固定穿刺處下端，右手持穿刺針，先以約30O角度沿靜脈正面進針，快速刺入皮膚，然后降低角度刺入靜脈腔，見回血后，將針頭順勢深入少許，以免采血時針頭滑出血管。 5）抽血：右手

8、固定注射器，左手緩緩抽動注射器內(nèi)芯，抽至所需血量。 6）松壓脈帶：囑患者松拳，松開壓脈帶。 7）拔針止血：以無菌棉簽壓住穿刺處，快速拔出針頭。 8）注入試管：血RT、ESR、血凝等的專用管，不取針頭，直接將針,（二）靜脈采血與標本檢測,頭從特制管帽的中心刺入，注入規(guī)定的血量，輕輕顛倒混勻8次；其它檢查，先取下針頭，將血液沿管壁緩慢注入一次性試管或其它容器內(nèi)，待自行凝固，再分離血漿。 9）核對編號

9、：采血完畢，應(yīng)再次核對患者姓名與血標本編號，并立即將注射器的針頭放入專用一次性桶，針栓放入黃色醫(yī)療垃圾袋桶。 [注意事項] 1）采血前應(yīng)向患者作適當?shù)慕忉?以消除其不必要的顧慮和恐懼心理。如遇個別暈針患者,應(yīng)立即拔出針頭,讓其平臥休息片刻即可恢復(fù).如有其他情況,應(yīng)立即找醫(yī)生共同處理。 2）消毒皮膚應(yīng)嚴格按正確方法進行,在采血過程中應(yīng)嚴格無菌操作。 3）進針時，深度、角度要適宜，用力不能過猛，以免刺穿血管造成皮下

10、血腫。如發(fā)生此情況，應(yīng)囑咐患者事后要熱敷，促進吸收。,（二）靜脈采血與標本檢測,4）避免溶血。采血容器不干燥，壓脈帶捆扎時間太長，穿刺不順損傷組織過多，抽血速度過快，血液注入容器時未取下針頭或抗凝時過分振搖等，均可造成標本溶血。 5）抽血時，只能外抽，不能內(nèi)推，以免空氣注入靜脈形成氣栓，造成嚴重后果。2、標本的檢測：儀器均為五分類 如果儀器處于休眠狀態(tài)，按綠鍵啟動。 在機器處于可檢測狀態(tài)下，將已采集的血

11、標本輕輕顛倒混勻數(shù)次，同時仔細觀察血液是否有凝塊，然后開始檢測。 3、常用抗凝集： 血RT—EDTA—K2 ESR—濃度為0.106mml/L的枸櫞酸鈉 血凝—濃度為0.109mml/L的枸櫞酸鈉 大部分生化項目—肝素,（三）結(jié)果觀察,血常規(guī)結(jié)果測出，工作僅完成一部分。1、結(jié)果的觀察：首先要知道血常規(guī)各項的正常范圍 序號 英文縮寫 項目名稱

12、 結(jié)果 單位 參考值 1 WBC 白細胞 109/L 4.0—10.0 2 RBC 紅細胞 1012/L 3.50—5.50

13、 3 HGB 血紅蛋白 g/L 110—160 4 HCT 紅細胞壓積 % 37.0—49.0 5 MCV 平均紅細胞壓積

14、 fl 82.0—92.0 6 MCH 平均紅細胞血紅蛋白含量 pg 21.0—31.0 7 MCHC 平均紅細胞血紅蛋白濃度 g/L 320—360 8 RDW-SD

15、紅細胞分布寬度 fl 37.0—54.0 9 RDW-CV 紅細胞變異系數(shù) % 0.0—14.1 10 PLT 血小板 109/L

16、 100--300,(三)結(jié)果觀察,11 PDW 血小板分布寬度 fl 9.0—13.0 12 MPV 血小板平均體積 fl 9.0—17.0 13 P--LCR 大血小板比率

17、 % 10.0—30.0 14 NE# 中性粒細胞 109/L 2.00—7.50 15 LY# 淋巴細胞 109/L

18、 0.80—4.00 16 MO# 單核細胞 109/L 0.12—0.80 17 EO# 嗜酸性粒細胞 109/L 0.05—0.50 18 BA# 嗜堿性粒細胞

19、 109/L 0.00—0.10 19 NE% 中性粒細胞% % 50.0—75.0 20 LY% 淋巴細胞 % % 20.0—40.

20、0 21 MO% 單核細胞% % 3.0—10.0 22 EO% 嗜酸性粒細胞% % 0.5—5.0 23 BA% 嗜堿性粒細胞 %

21、 % 0.0—1.0,(三)結(jié)果觀察,2、WBC、RBC、PLT結(jié)果偏低或偏高都要推片、染色、鏡檢，或者稀釋后手工計數(shù)。 白細胞分類異?；虿环诸悾家破?、染色、鏡下手工分類。 RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC對比觀察。其數(shù)值的變化與貧血的關(guān)系。 大專教材：P34 中專教材：P54 3、報告單經(jīng)老師審核，雙簽名后方能發(fā)出。,二、尿液檢驗從接到申請單到報告

22、單發(fā)出,1、接到申請單，根據(jù)申請檢驗項目給病人盛標本的容器，并告知怎樣接標本，接多少。 [標本的種類] 晨尿、隨時尿、餐后尿、定時尿標本、培養(yǎng)用尿。 [收集標本的容器要求] 1）送檢尿標本的容器上要有標簽，并注明患者姓明、科別、床號、應(yīng)用藥物（Vit c）、收集標本的時間及檢測項目。 2）容器一次性使用、清潔、干燥，不含干擾實驗的物質(zhì)。培養(yǎng)用無菌瓶。 3）容器至少容納50ml尿液標本，

23、開口大于4cm，底部要寬。 4）嬰幼兒用特殊容器。,二、尿液檢驗從接到申請單到報告單發(fā)出,2、收標本： 1）下病房收標本：檢查標本是否合格，核對容器標簽及標簽填寫內(nèi)容與申請單是否相符，查對無誤后編號。 2）在門診收標本：檢查標本是否合格，詢問留取標本的時間，查對無誤后編號，同時，對門診病人告知取報告單時間，病房的，讓其送標本者先回去，檢驗結(jié)果統(tǒng)一送所在科室。對尿液標本留取時間超過2h、標本量常規(guī)檢查不足10m

24、l等不符合要求的標本，說明理由拘收。3、標本檢測： 1）記錄尿液理學(xué)性質(zhì)。 2）干化學(xué)檢測： 注意蘸條時間，每半分鐘測一個，但對每一個標本從蘸條到打印完結(jié)果是1分鐘。,二、尿液檢驗從接到申請單到報告單發(fā)出,3）標本的離心、涂片、鏡檢： 離心：10ml刻度離心管、10mL新鮮混勻尿、RCF378g（16cm半徑，1500轉(zhuǎn)/分鐘）、離心5分鐘。 涂片、鏡檢：棄去

25、上清夜，留沉渣0.2ml，混允，取20µl于載玻片上，用18×18mm蓋片覆蓋后鏡檢。4、報告單的審核： 1）結(jié)果觀察——尿11項 pH：變色范圍為pH4.5—9.0，可監(jiān)控尿pH變化對尿蛋白和相對密度測定的質(zhì)量。 PRO：正常人的蛋白質(zhì)＜100mg/L，均呈陰性反應(yīng)（黃色），當增至150—250mg/L時，可呈陽性反應(yīng)（顏色由綠色，進而為藍色）,對清蛋白反

26、應(yīng)敏感，對球蛋白反應(yīng)很弱，其敏感度為清蛋白的1/50左,二、尿液檢驗從接到申請單到報告單發(fā)出,右。當患者服用磺胺嘧啶和喹啉等藥物引起強堿性尿（pH＞8）時，超過了試帶模塊中緩沖劑的緩沖能力，無論尿中有無蛋白質(zhì)均產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。大劑量青霉素可使結(jié)果減弱。 GLU：葡萄糖氧化酶反應(yīng)原理。特異性高，不受乳糖、蔗糖、果糖、麥芽糖等影響。高濃度的酮體、Vc可使反應(yīng)減弱甚至呈假陰性。靈敏度受尿相對密度值和溫度影響，濃縮尿降低

27、靈敏度，室溫升高提高靈敏度。試帶為含酶制品，注意防潮、防高溫，否則酶失活而呈假陰性。 KET：對乙酰乙酸的檢測靈敏度為0.05—0.10g/L，對丙酮為0.4—0.7g/L,不于β-羥丁酸反應(yīng)。尿液標本要新鮮，及時送檢，以免丙酮揮發(fā)造成假陰性或陽性反應(yīng)減弱。糖尿病酸中毒早期病例主要酮體是β-羥丁酸，乙酰乙酸很少或缺乏，此時測酮體總量減少，在糖尿病酮癥酸中毒癥狀緩解之后，乙酰乙酸含量比初始急性期含量高。,二、尿液檢

28、驗從接到申請單到報告單發(fā)出,BLD：靈敏度 HGB 150 µg/L、RBC 5—10個/ µl。本試帶能與血紅蛋白、肌紅蛋白反應(yīng)，試帶模塊上產(chǎn)生全面綠色表示血紅蛋白存在，呈花斑狀提示有位溶解RBC存在。 正常人尿中有時可有少量RBC，可出現(xiàn)“+”結(jié)果。 假陽性：尿中某些不耐熱的酶、肌紅蛋白、菌尿。鏡檢對照，加熱煮 沸后再檢測。 假陰性：高濃度的Vc

29、 BIL：靈敏度為5mg/L。尿液必須新鮮，否則，在陽光照射下，膽紅素氧化為膽綠素，可致反應(yīng)減弱或假陰性。高濃度的Vc可致反應(yīng)減弱或假陰性。當患者接受大量氯丙嗪（鎮(zhèn)靜劑）治療、或尿中含有鹽酸苯偶氮吡啶（泌尿道止痛藥）代謝產(chǎn)物時可致假陽性反應(yīng)。 URO：檢測靈敏度2—10mg/L。,二、尿液標本從接到申請單到報告單發(fā)出,NIT：陽性結(jié)果提示菌尿存在——泌尿道革蘭陰性桿菌感染，一般是大腸埃希菌

30、。本反應(yīng)陰性不能排除菌尿存在。其原因① 菌尿如在膀胱中儲留不足4h，不能產(chǎn)生足夠的亞硝酸鹽； ②致病菌—球菌、真菌或支原體等不產(chǎn)生將硝酸鹽還原成亞硝酸鹽的酶。 SG：此試帶的測試范圍為1.010—1.030，當尿SG值高于1.030時，將尿液稀釋至1/2后再測試，將所得結(jié)果的后兩位數(shù) × 2。 當尿液的pH ＞7時，應(yīng)在測得的數(shù)值上增加0.005， pH ＞8時，應(yīng)加0.010以進行補正。尿中蛋

31、白質(zhì)增多時，該法測得SG比實際偏高。 WBC：白細胞中以中性粒細胞含酯酶最多，單核細胞次之。 Vit C（ASG）：尿中含高濃度的Vit C，可使葡萄糖、隱血試驗呈假陰性,二、尿液檢驗從接到申請單到報告單的發(fā)出,2）尿11項結(jié)果與尿沉渣結(jié)果綜合觀察 如：鏡下有大量RBC，而干化學(xué)中BLD陰性，此時看Vit C 鏡下有大量細菌，看NIT是否陽性

32、 尿pH＞8、且PRO陽性，看鏡下是否有RBC或管型。3）審核后雙簽名、發(fā)單。,三、大便檢驗從接到申請單到報告單發(fā)出,1、接到申請單后，根據(jù)檢驗項目給病人相應(yīng)的容器，并告知病人怎樣取標本，取什么樣的標本，取多少（一般檢查取指頭大小，約5g）。2、常規(guī)檢查： 1） 觀察理學(xué)性質(zhì)：顏色、性狀。 2）制片：玻片一張、加生理鹽水1—2滴，用竹簽挑?。寒惓４蟊闳∧撗ひ翰糠?，外觀無異常的大便在外邊和內(nèi)部不同

33、部位取材，涂片大小、厚度—以能透過字跡為宜，加上蓋玻片鏡檢。 3）鏡檢：低倍鏡觀察全片，檢查有無蟲卵、原蟲、和其他異常成分，再用高倍鏡觀察細胞及其他異常成分。,三、大便檢驗從接到申請單到報告單發(fā)出,4）報告：發(fā)現(xiàn)蟲卵報告“找到某某蟲卵”，細胞則報告10—20個視野的低限值至高限值或平均值。 5）審核、發(fā)報告單。 注意：糞便標本采集后1h內(nèi)檢查完畢。否則可因pH或消化酶的作用而導(dǎo)致有形成分破壞。3

34、、其它檢查： 如：作細菌培養(yǎng)的要用一次性專用盒。 菌群分級：涂片要厚薄適宜，干后經(jīng)火焰固定，革蘭染色，干后用油鏡觀察。,四、綜合抽血,1、常規(guī)項目抽血—— 血RT、ESR、血凝（PT、APTT、TT、Fg、D-二聚體等）、一般生化檢查 血RT的EDTA—K2管抽血不能太少（血液稀釋），也不能太多（抗凝效果不好，尤其影響PLT的檢測）。 ESR和血凝，抗凝集與血液的比例必須是1:4和