血液分析儀器

1、血細胞分析儀器,,血細胞分析儀,一、血細胞分析儀分型 半自動 全自動 工作站 光電型 激光型 電阻抗型等 二分群 三分群 五分群 +網(wǎng)織紅,二、電阻抗基本原理 根據(jù)血細胞的非傳導性的性質，以對電解質溶液中懸浮顆粒在通過計數(shù)小孔時引起的電阻變化進行檢測為基礎，這一原理的應用實現(xiàn)了血細胞計數(shù)的自動化，此方法稱為庫爾特原理,血細胞分析儀,電阻抗基本原理,,,,電阻抗基本原理,電阻抗法白細胞分群從電阻抗的原理

2、可以看出不同體積的白細胞通過小孔時，產(chǎn)生的脈沖大小不同，而不同類型的白細胞(如淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞)經(jīng)溶血作用后有明顯的差異，因此根據(jù)脈沖的大小，即可人為地將血中的白細胞分成幾群,電阻抗法,白細胞分類原理經(jīng)過溶血劑處理后的白細胞根據(jù)體積大小可以初步確認其相應的種類：第一群〔小細胞群)是淋巴細胞(LYM)，第二群是單個核細胞區(qū)(MONO)，也被稱為中間細胞(MID)；相當于粒細胞的細胞群(GRAN)位于第三群(大細胞群)35

3、-90fl的顆粒被計數(shù)為淋巴細胞，90-160fl的顆粒計數(shù)為單個核細胞，160fl以上的顆粒計數(shù)為粒細胞,,,紅細胞計數(shù)原理,原理同白細胞檢測，紅細胞通過小孔時，形成相應大小的脈沖，脈沖的多少即紅細胞的數(shù)目，脈沖的高低代表單個脈沖細胞的體積,血紅蛋白測定原理,被稀釋的血液加入溶血劑后，紅細胞溶解，釋放血紅蛋白，后者與溶血劑中有關成分結合形成血紅蛋白的衍生物，進入血紅蛋白測試系統(tǒng)，在特定波長(一般在530—550nm）下比色，吸光度變化

4、與液體中血紅蛋白含量成正比,血小板測定原理,血小板隨紅細胞一起在一個系統(tǒng)中進行檢測根據(jù)不同的閾值、計算機分別給出血小板與紅細胞數(shù)目,,檢測流程,血細胞分析儀檢測結果,直方圖分析,紅細胞直方圖白細胞直方圖血小板直方圖,（一）紅細胞直方圖在貧血中的應用 1.小細胞性貧血（1）RDW正常：輕型地中海貧血 （2）RDW輕度增高：缺鐵性貧血 （3）RDW明顯增高，兩個細胞峰，小細胞峰明顯左移：鐵粒幼細胞性貧血、缺鐵性貧血經(jīng)治療有

5、效,正常紅細胞,小紅細胞大小不均,2.大細胞性貧血(1) RDW正常，細胞主峰明顯右移：溶血性貧血白血病前期再生障礙性貧血巨幼細胞性貧血(2) RDW輕度增高，紅細胞峰明顯右移，基底增寬：葉酸、維生素B12缺乏性巨幼細胞性貧血。(3)RDW明顯增高，紅細胞峰明顯右移，出現(xiàn)兩個峰： 巨幼細胞貧血，葉酸、維生素B12治療初。,巨紅細胞且大小不均,巨幼細胞性貧血治療有效,3.正細胞性貧血 （1）RDW正常：慢性病

6、急性失血骨髓纖維化骨髓發(fā)育不良 (2) RDW輕度增高：血紅蛋白異常骨髓纖維化 （3） RDW明顯增高： 早期或混合性營養(yǎng)不良,（二）白細胞直方圖臨床應用直方圖只能提示白細胞比例變化或可能出現(xiàn)異常細胞，故要求用顯微鏡復查血涂片。 1.中性粒細胞增高(淋巴細胞相對減低) 嗜中性粒細胞增多淋巴細胞減低癥,正常白細胞,淋巴細胞減少和中性粒增多,（二）白細胞直方圖臨床應用直方圖只能提示

7、白細胞比例變化或可能出現(xiàn)異常細胞，故要求用顯微鏡復查血涂片。 2.中性粒細胞減低（淋巴細胞比例增高）嬰幼兒再生障礙性貧血嗜中性粒細胞缺乏癥淋巴細胞增多癥傳染性單核細胞增多癥慢性淋巴細胞白血病,淋巴細胞增多和中性粒減少,3.嗜酸性粒細胞或單核細胞 淋巴細胞與單核細胞之間區(qū)域異常。可能存在：異型淋巴細胞、漿細胞，原始細胞，嗜酸性粒細胞，嗜堿性粒細胞等。 4.急性白血病 白血病細胞在某一區(qū)域出高大細胞峰，

8、同時有報警。5.慢性白血病 在單個核細胞區(qū)和嗜中性粒細胞區(qū)左側范圍有一高大的細胞峰。,原始、幼稚白細胞增多,中間細胞（單個核細胞）,單個核細胞（中間細胞）,（三）血小板直方圖臨床應用 1. 紅細胞碎片 可干擾血小板直方圖2. 血小板聚集 直方圖峰左側起點較高MCV和RDW正常，可排除小紅細胞干擾 3. 小紅細胞干擾 峰右側離橫坐標較高，呈脫尾狀。 4. 小血小板 峰左移，MPV偏小。血涂片可見

9、較多小血小板。,血小板直方圖,大血小板增多,聯(lián)合檢測型血細胞分析儀,一、容量、電導、光散射（VCS） 體積 電阻抗 血細胞計數(shù)、體積測量 電導性 電磁探針 內(nèi)部結構 光散射 激光器 顆粒的構型、質量,Coulter maxm,,容量、電導、光散射（ VCS）檢測,VCS 計數(shù)技術可使血細胞未經(jīng)任何處理，在與體內(nèi)形態(tài)完全相同的自然狀態(tài)下得出檢測結果。首先在標本中加入只作用紅細胞的溶血劑使紅細胞溶解，然后

10、加入抗溶血劑起中和前溶血劑的作用，使白細胞表面、胞質及細胞大小等特征仍然保持與體內(nèi)相同狀態(tài)，接受VCS三種技術同時檢測,檢 測 原 理,體積（V）測量使用的是電阻抗法，脈沖峰大小決定細胞體積，脈沖的數(shù)量決定于細胞數(shù)量電導性（C）根據(jù)細胞壁能產(chǎn)生高頻電流的性能采用高頻電磁探針，測量細胞內(nèi)部結構，細胞核、細胞質的比例，細胞內(nèi)質粒大小和密度光散射（S）在10°~70°對每一個細胞掃描分析，提供細胞結構（核分葉、核

11、形態(tài)），特別是對細胞顆粒的構型和質量的鑒別,三維分析技術,將檢測過的8,192個細胞分布到一個以V、C、S為三維坐標的空間內(nèi)，顯示出細胞群特征。高智能的計算機軟件分析細胞群的位置、相對密度、輪廓和大小。三維坐標的數(shù)據(jù)分析位點多過16×106個。,,聯(lián)合檢測型血細胞分析儀,二、電阻抗、射頻、細胞化學嗜酸性粒細胞檢測系統(tǒng)嗜堿性粒細胞檢測系統(tǒng)淋巴、單核和粒細胞檢測系統(tǒng)幼稚細胞檢測系統(tǒng),SE-9000,,淋巴、單核和粒細胞

12、檢測系統(tǒng),采用電阻抗與射頻聯(lián)合檢測直流電及射頻兩種電流．直流電不能透過細胞漿，僅能測量細胞大小，而射頻可透入細胞內(nèi)，測量核大小及顆粒的多少，因此細胞進入小孔時產(chǎn)生兩個不同的脈沖信號脈沖的高低分別代表細胞的大小(Dc)和核及顆粒的密度(RF)，以DC信號為橫坐標，RF為縱坐標，就可根據(jù)兩個信號作為一個細胞定位于二維的細胞散射圖,,,幼稚細胞檢測系統(tǒng),原理 幼稚細胞膜上脂質較成熟細胞少，在細胞懸液中加入硫化氨基酸，結合在

13、幼稚細胞上的氨基酸較成熟細胞多，且對溶血劑有抵抗作用，當加入溶血劑，成熟細胞溶解，而幼稚細胞不受破壞,三、多角度激光散射、電阻抗 檢測細胞在多個角度的散射光的強度，反映細胞的大小、核形、核質比以及顆粒的性質,聯(lián)合檢測型血細胞分析儀,SF-3000血細胞分析儀,多角度激光反應,細胞分類原理 采用半導體激光及流式原理從兩個角度分析白細胞，低角度（1°~6°）散射光分析白細胞體積大小，

14、高角度散射光（8°~20°）分析白細胞的內(nèi)部結構,內(nèi)部,1°-6°,8°-20°,四、激光與細胞化學檢測原理 Bayer ADVIA 120利用激光散射和過氧化物酶染色技術白細胞計數(shù)及分類嗜堿性粒細胞/分葉核粒細胞測量紅細胞/血小板測量血紅蛋白測量,聯(lián)合檢測型血細胞分析儀,ADVIA 120,,過氧化物酶通道,嗜堿細胞／分葉核通道,,嗜堿細胞/分葉核通道白細胞分類原

15、理圖1.噪音 2.幼稚細胞核 3. 單個核白細胞 （單核細胞、淋巴細胞） 4.嗜堿性粒細胞 5. 可疑嗜堿性粒細胞 6.飽和度 7.多核白細胞（中性粒細胞、嗜酸性粒細胞）,血小板檢測原理,網(wǎng)織紅細胞檢測原理,四、方法學評價 （一）儀器類型和特點 1.單純電阻抗法三分群血液分析儀特點 （1）檢測參數(shù)：紅細胞、白細胞、血小板 （2）白細胞分類 （3）直方圖 （4）報警(flag)功能：文字、圖標,2.

16、綜合光學電學技術血液分析儀特點 （1）檢測參數(shù)：紅細胞白細胞血小板網(wǎng)織紅細胞幼稚細胞,（2）白細胞分類五分類，準確性較三分群血液分析儀高。 （3）直方圖和散點圖：紅細胞直方圖白細胞直方圖血小板直方圖白細胞分類散點圖。（4）報警功能：文字、圖標,3.自動化程度 操作過程：半自動、全自動儲存信息：質量控制：質量控制軟件、顯示質控圖形 至今，血液分析儀還只能用作健康人血液篩檢之用，尚不能完全

17、代替顯微鏡功能。,(二)儀器性能評價（ICSH） 1. 可比性 (comparability) 指血液分析儀測定結果，與常規(guī)方法所測結果相比較。顯微鏡法是血細胞檢驗基礎。P＞0.05有可比性。P＜0.05無可比性結論：計數(shù)細胞越多、選用吸管、計數(shù)盤越多，計數(shù)結果接近真值。實際工作中，鏡檢法很難達到此要求。,經(jīng)嚴格校正的血液分析儀：計數(shù)細胞多操作步驟標準化精確性高（ CV可＜2%）準確性較高,2. 準確性

18、(accuracy) 準確性是指測定結果與真值一致性的程度。 3. 總重復性( overall precision ) 指同一份標本多次測量的結果接近的程度。重復測定1份抗凝靜脈血10次，計算CV值。,4.精密度 (precision) 批內(nèi)（within- batch）精密度：同一批樣本重復測定結果的評價。批間(between-batch)精密度：對兩批或兩批以上樣本重復測定結果的評價。 攜帶污染率(

19、carry over)：連續(xù)測定1份高值樣本3次（i1、i2、i3）再測定1份低值樣本3次（j1、j2、j3） 攜帶污染率（%）＝（j1-j3）/（i3-J3）,精確度和準確度,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,5. 線性范圍 指測定值與稀釋倍數(shù)是否呈比例關系。線性關系范圍越寬越理想。P ＜ 0.01, 非線性相關。 P ＞ 0.05，未偏離線性。,（三）影響直方圖變化的因