遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)果蠅雜交設(shè)計(jì)書

1、遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)果蠅雜交設(shè)計(jì)書遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)果蠅雜交設(shè)計(jì)書一、單因子試驗(yàn)一、單因子試驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)原理分離定律（lawofsegregation）也稱孟德爾分離定律。一對(duì)基因在雜合狀態(tài)下不互相影響，各自保持相對(duì)的獨(dú)立性，而在形成配子的時(shí)候，就會(huì)互相分開，并按照原樣分配到不同的配子中去。在一般情況下，配子的理論分離比是1:1，子二代（F2）的基因型分離比是1:2:1，若顯性完全，F(xiàn)2的表型分離比是3:1。雜種后代分離出來的隱性基因純合體與原來

2、隱性親本在表型上是一樣的，隱性基因并不因?yàn)楹惋@性基因在一起而改變它的性質(zhì)。單因子雜交是指一對(duì)等位基因間的雜交。野生型果蠅是長翅（），其長翅超出腹部末端約13.殘翅果蠅的雙翅已經(jīng)退化，只留下少量殘跡（vgvg），無飛翔能力。Vg的基因座位于第二染色體67.0。對(duì)長翅（）完全隱性。用野生型長翅果蠅與殘翅果蠅雜交，子一代（F1）全是長翅。子一代系內(nèi)交配，子二代產(chǎn)生性狀分離，長翅：殘翅為3:1?；蛐蜑関g（長翅）雌雄均可產(chǎn)生兩種配子和vg，并

3、且各占12。簡單列表可知F2的性狀比為3:1。表1果蠅雜交實(shí)驗(yàn)的配子及雙翅形狀的遺傳F1♀配子F1♂配子1212vg1214長翅14vg長翅12vg14vg長翅14vgvg殘翅2、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)步驟（1）確定雜交親本，挑選處女蠅。選用選用2#與18#為親本進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。為親本進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。選用野生型長翅和突變型殘翅果蠅為雜交親本。雌蠅一定要選處女蠅。處女蠅的挑選方法：親本飼養(yǎng)2周之后，提前10—12小時(shí)把培養(yǎng)瓶內(nèi)所有活的成蟲倒干凈，然后

4、在倒掉成蟲的12小時(shí)內(nèi)吧新羽化的成蟲倒出來，裝進(jìn)消毒過的培養(yǎng)瓶或者平底試管進(jìn)行適度麻醉，麻醉后放在消毒過的白瓷板或者硬紙板上把雌雄蠅分別挑出，雌蠅即為處女蠅。根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需處女蠅數(shù)量的多少，可連續(xù)收集，但不要超過3天。（2）配好雜交組合，進(jìn)行正、反雜交。正交組合：野生型長翅（♀）突變型殘翅（♂）。用消毒過的毛筆把3—4只長翅處女蠅掃入培養(yǎng)瓶中，然后把培養(yǎng)瓶水平放置，一面麻醉狀態(tài)下的果蠅沾到培養(yǎng)基或水珠而被悶死，隨機(jī)用同樣方法掃入3—4只殘

5、翅雄蠅，塞緊棉塞，貼好標(biāo)簽，保持水平直至果蠅蘇醒后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。反交組合：將親本性別交換。（3）培養(yǎng)7天之后把親本果蠅成蟲全部倒出來處死。（4）再過7天F1成蠅出現(xiàn)，把F1成蠅轉(zhuǎn)移到經(jīng)過消毒的空瓶子里進(jìn)行適度麻醉，觀察F1翅形的變化，并把結(jié)果記錄。把5~6對(duì)適度麻醉的F1轉(zhuǎn)入另一培養(yǎng)瓶，標(biāo)明信息。表2正、反交F1果蠅翅形觀察結(jié)果記錄表觀察結(jié)果長翅♀殘翅♂殘翅♀長翅♂2、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)步驟選用選用2#與e進(jìn)行雜交試驗(yàn)進(jìn)行雜交

6、試驗(yàn)（1）分別挑選e、vg的處女蠅，要注意麻醉瓶、毛筆、白瓷板的消毒（烘箱60℃烘4h以上）。（2）把vg♀和e♂放在一培養(yǎng)瓶中，e♀和vg♂放在另一培養(yǎng)瓶中。操作類似單因子試驗(yàn)。（3）7天后將親本倒干凈處死。（4）7天后檢查F1成蟲的形狀。若全為灰身長翅，則雜交成功，否則為假雜種。成功的成功的組合組合挑選5~6對(duì)F1成蠅轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。（5）7天后倒出F1成蟲處死。（6）7天后，觀察F2成蟲，可連續(xù)觀察一周。表2果蠅兩對(duì)基

7、因雜交F2性狀觀察結(jié)果（正、反交合并）觀察結(jié)果統(tǒng)計(jì)日期灰身長翅黑身長翅灰身殘翅黑身殘翅合計(jì)（7）統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，處理數(shù)據(jù)，進(jìn)行卡方檢驗(yàn)。表3χ2測(cè)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)觀察結(jié)果灰身長翅黑身長翅灰身殘翅黑身殘翅合計(jì)實(shí)驗(yàn)觀察數(shù)（O）預(yù)期數(shù)（9:3:3:1）（C）偏差（OC）（OC）2C3、預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果、預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果（1）F1全為灰體長翅，且正反交結(jié)果一致。（2）F2出現(xiàn)形狀分離，且灰體長翅：灰體殘翅：黑體長翅：黑體殘翅約為9:3:3:1。且正反交結(jié)果類似。通過卡

8、方檢驗(yàn)證明實(shí)際分離值與理論分離值一致。三、三點(diǎn)測(cè)交與遺傳作圖三、三點(diǎn)測(cè)交與遺傳作圖1、實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)原理位于不同染色體上的兩對(duì)基因，它們決定的兩對(duì)形狀在F2中是自由組合的。而位于一條染色體上的基因則是連鎖的。同源染色體之間可以發(fā)生交換，使子代出現(xiàn)一定數(shù)量的重組型，重組型出現(xiàn)的多少反映出基因間發(fā)生交換的頻率的高低。根據(jù)基因在染色體中直線排列的原理，基因間距離越遠(yuǎn)，期間發(fā)生交換的可能性越大，即交換頻率越高；反之則小，交換律就低。因此交換值（

9、crossingovervalue）的大小可以用來表示基因間距離的長短。但交換值無法直接測(cè)定，只有通過基因之間的重組來估計(jì)所發(fā)生交換的頻率。所以通過計(jì)算重組值的大小，可以反映基因之間距離的大小。金銀圖距是通過重組值的測(cè)定而得到的。如果基因座相距很近，重組率與交換律的值相等，可以根據(jù)重組率的大小作為有關(guān)基因間的相對(duì)距離，把基因順序地排列在染色體上，繪制出基因圖。但在基因間相距較遠(yuǎn)的情況下，可能發(fā)生不止一次交換，這時(shí)如果簡單把重組率當(dāng)做交換