抗菌步驟

1、抗菌測試抗菌測試試劑及儀器試劑及儀器（1）菌種：大腸桿菌；金黃色葡萄球菌；白色念球菌。（依條件而定）（2）樣品：含0%、3%、5%、7%、9%納米改性竹炭的聚丙烯母粒，3%纖維，含3%、5%納米改性竹炭聚丙烯無紡布，改性、未改性的竹炭粉體，外加竹炭滌綸、炭黑滌綸母粒。（可酌情選擇）（3）試劑：磷酸二氫鉀（或磷酸二氫鈉），瓊脂，牛肉膏，蛋白胨，氯化鈉，氫氧化鈉，鹽酸，去離子水。（4）儀器設(shè)備：分光光度計(jì)，濕熱壓力蒸汽滅菌鍋，電熱鼓風(fēng)干燥箱

2、，恒溫恒濕培養(yǎng)箱，超凈工作臺(tái)，數(shù)顯恒溫磁力攪拌器，玻璃恒溫水浴，菌落計(jì)數(shù)器，電子天平，三角燒瓶，培養(yǎng)皿，試管，定量刻度吸管，玻璃棒，等。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容在進(jìn)行無菌操作時(shí)，所用的實(shí)驗(yàn)材料、用具、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、操作者的手均需消毒、滅菌、以保證無雜菌干擾，操作者的手可以用乙醇擦拭消毒。緩沖液及生理鹽水稀釋液配制緩沖液及生理鹽水稀釋液配制制備34g100ml磷酸二氫鉀緩沖溶液，用NaOH溶液調(diào)節(jié)PH值為7.2～7.3，冷藏保存。實(shí)驗(yàn)前取1ml緩沖溶

3、液用去離子水稀釋至800ml，分別裝入試管、燒杯、燒瓶，在0.1MPa、121℃下高溫滅菌20min，冷藏待用。制備0.85％氯化鈉，在試管內(nèi)各裝9ml鹽水，封口，在103kPa的滅菌鍋內(nèi)滅菌20min。培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基配制制備液體培養(yǎng)液（營養(yǎng)肉湯）：牛肉膏5.0g，蛋白胨10g，氯化鈉5.0g，蒸餾水1000ml，加熱溶解后，以0.1molL的NaOH調(diào)PH為7.2～7.3，趁熱分裝，0.1Mpa高壓蒸汽滅菌20min。制備固體培養(yǎng)基

4、（營養(yǎng)瓊脂）：牛肉膏5.0g，蛋白胨10g，瓊脂粉25g，氯化鈉5.0g，蒸餾水1000ml，將除瓊脂以外的各成分加熱溶解后，以NaOH調(diào)PH為7.2～7.3，加入瓊脂粉，加熱煮沸，使瓊脂溶化，分裝入燒瓶，封口，0.1MPa蒸汽滅菌20min。菌懸液的制備菌懸液的制備用取菌環(huán)將保存的菌種以劃線法接種到營養(yǎng)瓊脂平皿上，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h(大腸桿菌為30℃、金黃色葡萄球菌為37℃、白色念珠菌為26℃)，取平皿上2～3個(gè)典型的菌落移到盛有肉

5、湯培養(yǎng)基的三角燒瓶中，在適宜的溫度下?lián)u晃培養(yǎng)24h，使其進(jìn)入穩(wěn)定的對(duì)數(shù)生長期，用分光光度計(jì)在475nm波長處測定營養(yǎng)肉湯中培養(yǎng)液的光密度為280，將該培養(yǎng)物用磷酸二氫鉀緩沖液稀釋至1000倍。振蕩搖瓶試驗(yàn)法振蕩搖瓶試驗(yàn)法①稱取0.75g試樣放入250ml的三角燒瓶中，加入70ml磷酸鹽緩沖溶液，高壓滅菌后加入5ml菌懸液，振搖2min，吸取1ml用0.85％生理鹽水稀釋液作梯度稀釋至l02，作為振蕩前樣液。②將0.75g試樣放入上述含有

6、70ml磷酸鹽緩沖溶液和5ml菌懸液的三角燒瓶中，振搖2h，吸取1ml樣液，用0.85％生理鹽水稀釋液作梯度稀釋至l02，作為振蕩后樣液。③瓊脂傾注法接種平皿：分別吸取振蕩前和振蕩后樣液各1ml，置于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)樣液接種兩個(gè)平皿。樣液移入平皿后，及時(shí)將涼至46℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿約15ml，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。實(shí)驗(yàn)時(shí)，可將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基放置在(461)℃水浴中，方便使用。④待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置于37℃恒溫下培養(yǎng)48h

7、取出，記錄菌落數(shù)。數(shù)據(jù)選擇依據(jù)數(shù)據(jù)選擇依據(jù)（1）菌種液濃度的選擇振蕩搖瓶試驗(yàn)法在操作過程中有一個(gè)關(guān)鍵內(nèi)容就是菌種濃度的選擇，因?yàn)樽詈蠹?xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果需用菌落記數(shù)儀記數(shù)，如果菌種液中細(xì)菌數(shù)目過多將無法記數(shù)，而細(xì)菌數(shù)目過少，又影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。一般選擇菌種液濃度使最后記數(shù)結(jié)果在200～20000之間，經(jīng)參考有關(guān)資料，實(shí)驗(yàn)確定營養(yǎng)肉湯中培養(yǎng)懸濁液濃度用分光光度計(jì)在475nm波長處測定光密度為280，可以滿足實(shí)驗(yàn)要求。（2）振蕩時(shí)間的選擇振蕩的目

8、的是為了使抗菌試樣與實(shí)驗(yàn)菌充分接觸。許多文獻(xiàn)認(rèn)為，對(duì)于抗菌整理過的織物，振蕩時(shí)間達(dá)30min時(shí)其培養(yǎng)基中的細(xì)菌即消失，而未經(jīng)處理的參照樣的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)卻隨著振蕩時(shí)間的延長而增加。因此選擇振蕩時(shí)間為30min。（3）培養(yǎng)時(shí)間的選擇細(xì)菌的培養(yǎng)是指將細(xì)菌溶液用瓊脂在培養(yǎng)皿中制備傾點(diǎn)板，在恒溫、恒濕狀態(tài)下使細(xì)菌成長繁殖為肉眼可見的菌團(tuán)，以便于記數(shù)。一般培養(yǎng)時(shí)間為24h，為保證菌團(tuán)完全長成，可延長培養(yǎng)時(shí)間到48h。評(píng)價(jià)指標(biāo)評(píng)價(jià)指標(biāo)在相同條件下