bluing reagent-081128

1、共5頁第1頁靛藍(lán)染色液靛藍(lán)染色液分類號分類號7602037使用須知使用須知用途用途本試劑主要用于體外診斷（IVD）。Ventana醫(yī)療系統(tǒng)（Ventana）靛藍(lán)試劑是一種碳酸鋰緩沖溶液。該試劑用于在Ventana自動切片染色機上用于藍(lán)化蘇木精染色的切片。要合理解釋任何染色結(jié)果的臨床意義必須同時結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察和適當(dāng)?shù)膶φ?。由資深的病理學(xué)家參考病人的臨床病史以及其它實驗室檢查結(jié)果進行評估。注意注意：美國聯(lián)邦法律規(guī)定本器材僅限由醫(yī)生或遵醫(yī)囑銷

2、售。摘要和說明摘要和說明靛藍(lán)試劑利用升高洗滌緩沖液的pH值和鋰離子的聯(lián)合作用進一步藍(lán)化蘇木精染色的切片。1靛藍(lán)試劑在蘇木精后使用，用以增強蘇木精的藍(lán)色染色。原理和操作原理和操作蘇木精復(fù)染后，在切片上應(yīng)用靛藍(lán)試劑并均勻混合。試劑可增強蘇木精染色效果，孵育結(jié)束時，Ventana自動切片染色機將通過清洗切片，及時終止反應(yīng)并去除未結(jié)合的試劑。若需更多信息，請參閱Ventana自動切片染色機的“操作者手冊”。材料和方法材料和方法提供的試劑提供的試

3、劑一個靛藍(lán)試劑分配器，含有25ml的即用型稀釋劑。內(nèi)含0.1M碳酸鋰溶于0.5M碳酸鈉溶液中。重建，混合，稀釋，滴定重建，混合，稀釋，滴定不需重建、混合、稀釋或滴定。本試劑針對結(jié)合Ventana檢測試劑盒、抗體與輔助試劑一同在Ventana自動切片染色機上的使用進行了優(yōu)化。所需的材料和試劑（未提供）所需的材料和試劑（未提供）以下列出了可能在染色中用到、但本試劑盒中未提供的試劑和材料：1.Ventana陰性對照試劑或兔陰性對照2.一抗3.

4、抗體稀釋劑4.顯微鏡載片，帶正電荷5.陽性和陰性組織對照6.能將溫度保持在70C5C的干燥爐7.條碼標(biāo)簽（適用于陰性對照和一抗）8.10%中性緩沖福爾馬林9.染色缸或染槽10.定時器11.二甲苯12.乙醇或梯度酒精13.去離子水或蒸餾水14.BiocareMedical的DecloakingChamber（ES和NexESIHC自動切片染色機）15.ES、NexESIHC、BenchMark和BenchMarkXT自動切片染色機16.i

5、VIEWTMDABAECVRed(ALKPHOS)EnhancedVReddetectionkits17.VentanaEndogenousBiotinBlockingKit18.VentanaAmplificationKit19.Detectionkitspecificsoftware(ESautomatedslidestaineronly)20.VentanaAPKWashSolution(ESNexESIHCautomatedsl

6、idestainers)21.VentanaLiquidCoverslipTMsolution(ESNexESIHCautomatedslidestainers)22.VentanaEZPrepTMsolution(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)23.VentanaReactionBuffer(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)2

7、4.VentanaLCS(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)25.VentanaCellConditioning1(CC1)CellConditioning2(CC2)(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)26.VentanaProteaseIIIIII27.VentanaHematoxylinCounterstain28.封固劑29.

8、蓋玻片30.光學(xué)顯微鏡（2080X）適用于特定檢測。儲存和處理儲存和處理儲存于28C。不可冰凍。對于不屬于包裝插頁中列出的儲存條件，使用者必須加以檢驗。為確保正確的試劑傳送和穩(wěn)定性，每次運行后必須更換蓋子，且必須立即將分配器垂直放置在冰箱里。每個試劑分配器都標(biāo)有有效期。如儲存適當(dāng)，本試劑可穩(wěn)定至標(biāo)簽上標(biāo)示的日期。一旦試劑過期，規(guī)定的儲存方法將不再適用。顯示本品不穩(wěn)定的跡象是試劑出現(xiàn)沉淀。在第一次出現(xiàn)試劑不穩(wěn)定跡象時，請立即聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐腣

9、entana辦事處。標(biāo)本的收集和準(zhǔn)備標(biāo)本的收集和準(zhǔn)備當(dāng)和Ventana一抗、檢測試劑盒、輔助試劑和自動切片染色機（見所需的材料和試劑（未提供）一節(jié)）一同使用時，本品適用于經(jīng)常規(guī)福爾馬林固定、石蠟包埋組織樣本的檢共5頁第3頁BenchMark或BenchMarkXT全自動切片染色機自動切片染色機1.使用載玻片條碼標(biāo)簽，該標(biāo)簽與待執(zhí)行的試驗方案相對應(yīng)。2.將一抗、相應(yīng)的檢測試劑盒分配器和所需的配套試劑放到試劑托盤上，并將其放置到自動切片染色

10、機上。檢查液體瓶和廢物缸。3.將載玻片放到自動切片染色機上。針對所有分析儀針對所有分析儀1.開始進行染色。2.染色結(jié)束后，將載玻片從自動切片染色機上拿下來。3.對于iVIEWDAB和VentanaRed試劑盒，用溫和的洗滌劑或酒精進行清洗，以去除蓋玻片上的溶液；在脫水和透明后，常規(guī)封片。4.對于AEC顯色，不要脫水和透明。用水溶性封固劑封片。應(yīng)在染色后的23天內(nèi)閱片，染色片于室溫（1525C）下可保存至少2年。質(zhì)控程序質(zhì)控程序陽性組織對

11、照陽性組織對照每次染色流程必須包含陽性對照。陽性對照的目的是為了確定試劑和儀器功能的可靠性。用于對照的組織可同時包含呈陽性和陰性染色的細(xì)胞或組織成分，以便同時提供陽性和陰性對照。用于對照的組織應(yīng)為新鮮的尸檢、活檢或外科手術(shù)切除標(biāo)本，并采用與試驗切片相同的方法盡快制備或固定。對照組織的目的是為了監(jiān)控程序的所有步驟，包括從標(biāo)本制備到染色的各個環(huán)節(jié)。使用與試驗樣本不同固定或處理方式的組織切片可對除固定和組織處理以外的所有試劑和方法步驟進行質(zhì)控

12、。可使用陽性染色較弱的組織來優(yōu)化質(zhì)控和檢測輕微的試劑降解。陽性對照只能用于評價實驗步驟和試驗試劑的正確性，而不能用來輔助評價病人樣本的診斷結(jié)果。如果陽性對照出現(xiàn)陰性結(jié)果，則實驗標(biāo)本的結(jié)果無效。陰性組織對照陰性組織對照可將用于陽性對照的同一組織用于陰性對照。由于在大多數(shù)組織中細(xì)胞類型多樣，故可同時提供內(nèi)部陰性對照位點，但使用者應(yīng)對此進行檢驗。如果陰性對照中出現(xiàn)特異性染色，那么病人樣本的結(jié)果應(yīng)被視為無效。疑難解答疑難解答當(dāng)對照試驗有任何問題

13、，請立即向您當(dāng)?shù)氐腣entana辦事處報告。如果對照試驗缺乏特異性，那么病人結(jié)果將視為無效。詳情請參見本說明書的“疑難解答”一節(jié)。在明確和解決問題后重復(fù)檢測病人樣本。陰性試劑對照陰性試劑對照對于免疫組化而言，為正確評判結(jié)果，每次試驗都應(yīng)設(shè)立陰性試劑對照。陰性試劑用于取代一抗來評估非特異性染色。通常情況下，陰性對照試劑采用小鼠或兔正常血清。使用Ventana抗體稀釋劑將其稀釋至與一抗同樣的濃度。稀釋劑本身也可作為陰性試劑對照。陰性試劑對照

14、的孵育時間應(yīng)與一抗的孵育時間相同。當(dāng)在一組連續(xù)切片上使用多個抗體時，應(yīng)用一個陰性試劑對照即可。檢測方案正確性檢驗檢測方案正確性檢驗每當(dāng)初次制定檢測方案，都應(yīng)首先進行陽性或陰性對照檢驗，用以驗證方法的特異性（參照本產(chǎn)品說明書中的“質(zhì)控程序”一節(jié)，以及美國病理家學(xué)院實驗室認(rèn)可體系、解剖病理檢查表和NCCLS批準(zhǔn)指南中的質(zhì)控建議）。在更換抗體批次或更改檢測參數(shù)時均應(yīng)重復(fù)此類質(zhì)控程序。結(jié)果解釋結(jié)果解釋Ventana自動染色程序會產(chǎn)生顯色反應(yīng)產(chǎn)物

15、。有關(guān)預(yù)期的顯色反應(yīng)信息請參見相應(yīng)的檢測試劑盒包裝插頁。有經(jīng)驗的病理學(xué)家必須在解釋結(jié)果之前對陽性和陰性對照進行評估。陽性對照組織陽性對照組織為明確試劑有效性，應(yīng)首先觀察陽性對照組織。如靶細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)適當(dāng)?shù)娘@色反應(yīng)產(chǎn)物，則表示存在陽性反應(yīng)。有關(guān)預(yù)期顯色反應(yīng)的詳情請參見檢測試劑盒的包裝插頁。復(fù)染的強度取決于所選的孵育時間。對于IHC復(fù)染，視孵育時間長短和所用的蘇木精效能的不同，細(xì)胞核呈灰白色至深藍(lán)色。復(fù)染過多或不充分都可能影響結(jié)果的正確判斷。