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1、醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)6月1717日14:00~16:0014:00~16:00名解名解2020填空填空3030解答解答2020問答問答2020是非是非2020緒論緒論1.細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué):把形態(tài)與功能形態(tài)與功能相結(jié)合,以整體與動(dòng)態(tài)的觀點(diǎn),把細(xì)胞的顯微水顯微水平、亞顯微水平和分子水平平、亞顯微水平和分子水平有機(jī)結(jié)合,研究細(xì)胞的基本生命活動(dòng)規(guī)律。2.細(xì)胞生物學(xué)研究內(nèi)容①細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成②細(xì)胞核細(xì)胞器的功能③細(xì)胞的增殖與分
2、化④細(xì)胞的衰老與死亡。3.細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展簡史①細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)②細(xì)胞學(xué)說的創(chuàng)立與形成③細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)研究的興起④現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)的興起。第二章第二章1.肉眼的分辨率0.2mm光學(xué)顯微鏡的分辨率0.2um,電子顯微鏡的最大分辨率0.14nm2.觀察細(xì)胞及未經(jīng)染色的生物標(biāo)本的形態(tài)結(jié)構(gòu)①相差顯微鏡②微分干涉顯微鏡(采用的是平面偏正光)。3.電子顯微鏡技術(shù)由透射電鏡技術(shù)、掃描電鏡技術(shù)、電子顯微術(shù)透射電鏡技術(shù)、掃描電鏡技術(shù)、電子顯微術(shù)組成。4
3、.超薄切片技術(shù)的技術(shù)過程有固定、脫水、包埋、切片和染色固定、脫水、包埋、切片和染色。固定一般選擇戊二醛和鋨酸戊二醛和鋨酸雙重固定,包埋時(shí)常用的包埋劑是環(huán)氧樹脂包埋劑是環(huán)氧樹脂。5.負(fù)染色技術(shù):利用電子密度比標(biāo)本高的重金屬鹽將生物標(biāo)本包圍起來,增強(qiáng)背景散射電子的能力以提高反差,在黑暗的背景下顯示標(biāo)本的形態(tài)結(jié)構(gòu)。6.冷凍蝕刻技術(shù):又稱冷凍復(fù)型,此技術(shù)能保持細(xì)胞原來的結(jié)構(gòu),使之接近于生活狀態(tài),立體感鮮明,主要用于生物膜結(jié)構(gòu)的研究。7.冷凍蝕刻
4、技術(shù)的方法:首先將經(jīng)預(yù)處理的生物標(biāo)本在冷凍劑中快速冷凍,然后放到真空噴鍍儀中冷凍斷裂,再加熱使斷裂面上部分冰升華,立刻在斷裂面上噴鉑、噴碳形成一層復(fù)型膜,這一層復(fù)型膜印下了生物樣本斷裂面上的立體結(jié)構(gòu),然后將生物體樣本腐蝕掉,用銅網(wǎng)將復(fù)型膜撈起,就制成了冷凍蝕刻的電鏡樣品,可在電鏡下看到不同于超薄切片的具體立體感強(qiáng)的圖像。8.免疫熒光術(shù):用熒光素標(biāo)記抗體,并于熒光顯微鏡下觀察。9.免疫電鏡術(shù):抗體與辣根過氧化物酶等結(jié)合,進(jìn)行酶顯示后,再用
5、電鏡觀察。10.干細(xì)胞是一類具有自我更新與增殖分化能力的細(xì)胞,能產(chǎn)生表型與基因型和自己完全相同的子細(xì)胞。11.干細(xì)胞可分為三種類型:全能性干細(xì)胞,具有分化為完整個(gè)體的潛能多能性干細(xì)胞,具有分化出多種組織細(xì)胞的潛能單能干細(xì)胞,也稱定向或?qū)D芨杉?xì)胞,這類干細(xì)胞具有分化形成某一種類型細(xì)胞的能力。12.胚胎干細(xì)胞(ESC)是一類從早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始生殖細(xì)胞分離和克隆出的,具有自我更新和發(fā)育全能性并產(chǎn)生分化后代能力的早期細(xì)胞。13.多向分化潛
6、能是ESC細(xì)胞的主要特征,體外培養(yǎng)條件的略微變化就可誘導(dǎo)分化機(jī)制的啟動(dòng)。14.超速離心法的應(yīng)用:分級(jí)離心小鼠肝線粒體提取肝組織研磨后濾液經(jīng)2500rpm15min㈠余下沉淀2500rpm15min㈡上清涂片17000rpm20min①棄上清②沉淀氯化鈣混勻17000rpm20min15.熒光原位雜交(FISH)為一項(xiàng)分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù),是一種廢放射性原位雜交技術(shù)。其原理是用已知的標(biāo)記單鏈核算為探針,按照堿基互補(bǔ)的原則,與待檢材料中未知的
7、單鏈核算進(jìn)行異性結(jié)合,形成可被檢測(cè)的雜交雙鏈核酸。由于5.P位點(diǎn)即肽酰tRNA位點(diǎn),又叫供位或肽?;稽c(diǎn),主要位于大亞基。6.E位點(diǎn)是脫?;鵷RNA離開核糖體的出口部位。7.mRNA結(jié)合位點(diǎn):蛋白質(zhì)的起始合成,首先需要mRNA同小亞基的結(jié)合,推測(cè)在核糖體上必然有與mRNA結(jié)合的位點(diǎn)。8.mRNA中與核糖體16SrRNA結(jié)合的序列稱為SD序列。9.蛋白質(zhì)生物合成的具體步驟:氨基酸的活化與轉(zhuǎn)運(yùn);肽鏈合成的啟動(dòng);肽鏈延伸(進(jìn)位,轉(zhuǎn)肽,脫落,移
8、位);肽鏈合成的終止。10.多聚核糖體:在蛋白質(zhì)合成過程中,同一條mRNA分子能夠同多個(gè)核糖體結(jié)合,同時(shí)合成若干條蛋白質(zhì)多肽鏈。結(jié)合在同一條mRNA上的核糖體稱為多聚核糖體。第八章第八章1.內(nèi)膜系統(tǒng):指細(xì)胞內(nèi),在結(jié)構(gòu)、功能上或發(fā)生上相互聯(lián)系成為連續(xù)統(tǒng)一體的模性結(jié)構(gòu),包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、過氧化氫體、微體和各種小泡。2.葡萄糖—6—磷酸酶被視為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的標(biāo)志酶。3.粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能:①與蛋白質(zhì)的合成;②與蛋白質(zhì)的糖基化;③與蛋白質(zhì)
9、的運(yùn)輸;④與膜脂的合成。4.信號(hào)肽:在蛋白質(zhì)合成時(shí),先由游離核糖體翻譯出信號(hào)密碼編碼的一段多肽,一般由16~30個(gè)疏水氨基酸組成,其中至少含有9個(gè)疏水氨基酸。5.信號(hào)肽能夠引導(dǎo)游離核糖體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)合為附著核糖體,完成蛋白質(zhì)的合成.6.SPR介導(dǎo)核糖體與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的結(jié)合:信號(hào)識(shí)別顆粒(SRP)存在于細(xì)胞質(zhì)中,由6個(gè)不同的多肽亞單位和一個(gè)RNA分子構(gòu)成。SPR既能識(shí)別露出核糖體外的信號(hào)肽,又能識(shí)別內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的SRP受體,并與他們特異性結(jié)
10、合,從而將核糖體引申到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。P127圖7.內(nèi)信號(hào)肽能從不同的方向轉(zhuǎn)移多肽鏈,轉(zhuǎn)移方向取決于內(nèi)信號(hào)肽兩端氨基酸所攜帶的電荷,帶正電荷多的一端留在細(xì)胞基質(zhì)側(cè),而帶正電荷少的一端轉(zhuǎn)移入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)。8.ER—駐留蛋白是留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中發(fā)揮作用的自身結(jié)構(gòu)蛋白和酶蛋白。ER—駐留蛋白為什么不能被送往細(xì)胞其他部位?因?yàn)楹蠩R ̄保留信號(hào),即在蛋白羧基端有4個(gè)氨基酸負(fù)責(zé)保留蛋白在ER腔中。9.分子伴侶:能識(shí)別正在合成的或已部分折疊的多肽,并與這
11、些多肽的一定部位結(jié)合,予以正確的折疊但其在這一過程中只起陪伴作用不參與最終底物的形成10.駐留蛋白的羧基末端都有駐留信號(hào)序列:Lys—Asp—Glu—Aeu,他們能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的受體結(jié)合,使其駐留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中,對(duì)新生肽鏈進(jìn)行修飾、折疊和轉(zhuǎn)運(yùn)。11.在糖蛋白中,糖與蛋白質(zhì)的連接方式有兩種,一種是N—連接的寡聚糖蛋白,它是糖蛋白中最普通的一種,另一種是O—連接的寡聚糖蛋白,前者主要在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中合成,后者主要在高爾基復(fù)合體中合成。12.滑面
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