顯微鏡原理、調(diào)試、使用和保養(yǎng)

1、顯微鏡原理、構(gòu)造、調(diào)試、使用和保養(yǎng)顯微鏡原理、構(gòu)造、調(diào)試、使用和保養(yǎng)顯微鏡是人類(lèi)認(rèn)識(shí)物質(zhì)微觀(guān)世界的重要工具，是現(xiàn)代科學(xué)研究工作不可缺少的儀器之一。顯微鏡自1666年問(wèn)世以來(lái)已有300多年的歷史了，其間隨著科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，顯微鏡的品種不斷增加，結(jié)構(gòu)和性能逐步得到完善和提高。根據(jù)不同的使用用途，光學(xué)顯微鏡可分為普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡、倒置顯微鏡、體視顯微鏡、偏光顯微鏡等10多種。目前，世界上許多國(guó)家都可以生產(chǎn)

2、光學(xué)顯微鏡，牌名、種類(lèi)繁雜，其中德國(guó)、日本等國(guó)制造的顯微鏡品質(zhì)、數(shù)量占優(yōu)勢(shì)，但價(jià)格昂貴。對(duì)于現(xiàn)代的光學(xué)顯微鏡，包括各種簡(jiǎn)單的常規(guī)檢驗(yàn)用顯微鏡、萬(wàn)能研究以及萬(wàn)能照相顯微鏡等，首先要認(rèn)識(shí)其構(gòu)造及各部件的功能，同時(shí)要掌握正確的調(diào)試、使用和保養(yǎng)方法，才能在實(shí)際應(yīng)用中面對(duì)各種要求時(shí)以不同的顯微鏡檢方法，充分發(fā)揮顯微鏡應(yīng)有的功能，提高常規(guī)檢驗(yàn)工作效率。光學(xué)顯微鏡的原理和構(gòu)造光學(xué)顯微鏡的原理和構(gòu)造隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，顯微鏡檢方法由最傳統(tǒng)的明視野、暗視

3、野發(fā)展出了相差法、偏光方法；熒光方法也由透射光激發(fā)進(jìn)展為落射光激發(fā)，使熒光效率大為提高；微分干涉相襯方法基于偏光方法，而巧妙地利用了微分干涉棱鏡，使之能應(yīng)用于醫(yī)學(xué)與生物學(xué)的樣品，又能應(yīng)用于金相樣品的分析與檢驗(yàn)。下面以德國(guó)ZEISS公司生產(chǎn)的Axioplan萬(wàn)能研究用顯微鏡，簡(jiǎn)單介紹萬(wàn)能顯微鏡的基本組成部件。1.顯微鏡主機(jī)體（st）顯微鏡的主機(jī)體設(shè)計(jì)成金字塔形，而底座的截面呈T字形，使顯微鏡的整體相當(dāng)穩(wěn)固。顯微鏡的光學(xué)部件和機(jī)構(gòu)調(diào)節(jié)部件、

4、光源的燈室、顯微照相裝置、電源變壓穩(wěn)壓器等，都可安裝在主機(jī)體上或主機(jī)體內(nèi)。2.顯微鏡的底座（base）底座和主機(jī)體通常組成一個(gè)穩(wěn)固的整體。底座內(nèi)通常裝有透射光照明光路系統(tǒng)（聚光、集光和反光）部件，光源的濾光片組，粗微調(diào)焦機(jī)構(gòu)，光源的視場(chǎng)光闌也安裝在底座上。3.透射光光源（tranilluminat）透射光光源由燈室（lamphousing）、燈座（lampsocket）、鹵素?zé)簦╤alogenlamp）、集光與聚光系統(tǒng)（lampcoll

5、ectlampcondenser）及其調(diào)整裝置組成。(1)控制雜散光在成像光路系統(tǒng)中的影響，特別是免除雜散光對(duì)照相系統(tǒng)的干擾，使顯微照相的底片不至于蒙上一層灰霧；(2)控制照明光束的大小，使所觀(guān)察的視域能受到均勻的照明；(3)在熒光顯微鏡檢方法中，可以把激發(fā)光限制在所需激發(fā)樣品的視域范圍內(nèi)，以防止視域外的樣品過(guò)早受到激發(fā)。9.聚光鏡系統(tǒng)（condensersystem）聚光鏡系統(tǒng)是照明光路系統(tǒng)中的重要部件之一，它也只能按照庫(kù)勒照明系統(tǒng)的

6、調(diào)整要求來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)。聚光鏡系統(tǒng)調(diào)整的好壞，可以直接影響顯微鏡視域中照明的均勻性，也可影響顯微鏡的分辨力，還可以直接控制顯微照相底片上的反差。聚光鏡系統(tǒng)通常由以下幾個(gè)部件組成：(1)聚光鏡本體（condenser）可以是簡(jiǎn)單的阿貝聚光鏡，也可以是消球差消色差的優(yōu)質(zhì)聚光鏡，另外還有一種是消除了內(nèi)應(yīng)力的偏光聚光鏡。聚光鏡的重要參數(shù)之一是數(shù)值孔徑（NA），通常為0.32；這樣的數(shù)值孔徑太小，只能與以下的物鏡配合使用，因此需配用前端透鏡來(lái)提高數(shù)值

7、孔徑，以便與不同倍數(shù)的物鏡靈活配合使用；(2)前端透鏡（frontlens）前端透鏡本身的數(shù)值孔徑通常為0.63、0.90、1.30或1.40，它要附裝在聚光鏡本體上，可以方便地?cái)[進(jìn)或擺出光路。最常用的前端透鏡數(shù)值孔徑為0.90，當(dāng)它擺入光路時(shí)，可以和10及以上的物鏡配用，擺出光路時(shí)可以和10以下的物鏡如6.3、5及2.5等物鏡配用；(3)聚光鏡的孔徑光闌（aperturediaphragm）孔徑光闌實(shí)際上是一個(gè)可變光圈，它是顯微鏡照明

8、光路系統(tǒng)中的又一個(gè)重要部件，在透射光明視野法、微分干涉相襯法以及偏光法所使用的聚光鏡中，都裝有孔徑光闌。它可以影響顯微鏡在作觀(guān)察時(shí)的分辨力；直接控制顯微照相底片上的反差；可用來(lái)調(diào)節(jié)聚光鏡的數(shù)值孔徑，配合所用物鏡的數(shù)值孔徑，以取得最佳的分辨本領(lǐng)，或最大的分辨本領(lǐng)；還可以使光源的發(fā)光體成像于孔徑光闌所在的平面上，從而滿(mǎn)足庫(kù)勒照明系統(tǒng)的前提條件。在實(shí)際操作中，調(diào)節(jié)聚光鏡孔徑光闌可以改變顯微鏡中所觀(guān)察到的視野亮度，這是由于歷史上對(duì)聚光鏡孔徑光闌