實(shí)驗(yàn)報(bào)告-不同因素對(duì)酶的影響

1、實(shí)驗(yàn)報(bào)告課程名稱：指導(dǎo)老師：成績(jī)：實(shí)驗(yàn)名稱：實(shí)驗(yàn)類型：分離鑒定實(shí)驗(yàn)同組學(xué)生姓名：一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅ū靥睿┒?、?shí)驗(yàn)內(nèi)容和原理（必填）三、主要儀器設(shè)備（必填）四、操作方法和實(shí)驗(yàn)步驟五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄和處理六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析（必填）七、討論、心得Ⅰ.Ⅰ.酶的基本性質(zhì)酶的基本性質(zhì)——底物專一性底物專一性一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵笠?、?shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?.了解酶的專一性。2.掌握驗(yàn)證酶的專一性的基本原理及方法。3.學(xué)會(huì)排除干擾因素，設(shè)計(jì)酶學(xué)實(shí)驗(yàn)。二、實(shí)驗(yàn)基本

2、原理二、實(shí)驗(yàn)基本原理酶是一種具有催化功能的蛋白質(zhì)。酶蛋白結(jié)構(gòu)決定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的反應(yīng)（酶促反應(yīng)）要比相應(yīng)的沒有催化劑的反應(yīng)快1031017倍。酶催化作用的一個(gè)重要特點(diǎn)是具有高度的底物專一性，即一種酶只能對(duì)某一種底物或一類底物起催化作用，對(duì)其他底物無催化反應(yīng)。根據(jù)各種酶對(duì)底物的選擇程度不同，它們的專一性可以分為下列幾種：1.相對(duì)專一性一種酶能夠催化一類具有相同化學(xué)鍵或基團(tuán)的物質(zhì)進(jìn)行某種類型的反應(yīng)。2.絕對(duì)專一性：有些酶對(duì)

3、底物的要求非常嚴(yán)格只作用于一種底物，而不作用于任何其他物質(zhì)。如脲酶只能催化尿素進(jìn)行水解而生成二氧化碳和氨。如麥芽糖酶只作用于麥芽糖而不作用其它雙糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纖維素。3.立體異構(gòu)專一性有些酶只有作用于底物的立體異構(gòu)物中的一種，而對(duì)另一種則全無作用。如酵母中的糖酶類只作用于D型糖而不能作用于L型的糖。本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶、蔗糖酶對(duì)淀粉、蔗糖水解反應(yīng)的催化作用來觀察酶的專一性。采用Benedict試劑檢測(cè)反應(yīng)產(chǎn)物。Bene

4、dict試劑是堿性硫酸銅溶液，具有一定的氧化能力，能與還原性糖的半縮醛羥基發(fā)生氧化還原反應(yīng)，生成磚紅色氧化亞銅沉淀。Na2CO32H2O2NaOHH2CO3CuSO42NaOHCu(OH)2Na2SO4還原糖(—CHO—C=O)2Cu(OH)2Cu2O(磚紅色或黃色)2H2O糖的氧化產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)上，淀粉幾乎沒有，而蔗糖、棉子糖全無半縮醛基，它們均無還原性，因此它專業(yè)：姓名：學(xué)號(hào)：日期：地點(diǎn)：裝訂線生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)（甲）酶的基本性質(zhì)實(shí)驗(yàn)——

5、底物專一性劑、激活劑和抑制、最適溫度注：可增加一組蔗糖酶液經(jīng)100℃加熱3min處理后的樣品對(duì)照組。六、結(jié)果分析討論各試管觀察結(jié)果依次是：（一）：1號(hào)藍(lán)綠色，2號(hào)藍(lán)色，3號(hào)藍(lán)色Benedict試劑是堿性硫酸銅溶液，具有一定的氧化能力，能與還原性糖的半縮醛羥基發(fā)生氧化還原反應(yīng)，生成磚紅色氧化亞銅沉淀。3只試管都為藍(lán)色說明幾只試管中都沒有果糖和葡萄糖，說明在不加酶時(shí)，淀粉和蔗糖不易水解。試劑無干擾因素的存在。（1號(hào)試管是藍(lán)綠色可能是因?yàn)橛猩?/p>

6、部分的淀粉水解）（二）：1號(hào)土黃色，2號(hào)黃綠色，3號(hào)藍(lán)色加入唾液淀粉酶，1號(hào)試管底物是淀粉，所以很容易水解成葡萄糖，與Benedict試劑共熱，即產(chǎn)生紅棕色Cu2O沉淀。所以1號(hào)顏色變化比較大。（2號(hào)可能是因?yàn)檎崽窃?7℃恒溫水浴中也有少部分水解，所以顏色變化，但變化不明顯。）總的來看可以看出唾液淀粉酶只對(duì)淀粉有催化活性，不能催化蔗糖水解，具有對(duì)淀粉的底物專一性。3號(hào)是對(duì)照。（三）：1號(hào)藍(lán)色，2號(hào)紅棕色，3號(hào)藍(lán)色加入蔗糖酶，2號(hào)試管底物

7、是蔗糖，所以很容易水解成果糖和葡萄糖，與Benedict試劑共熱，即產(chǎn)生紅棕色Cu2O沉淀。所以2號(hào)顏色變化比較大。（1號(hào)可能是因?yàn)榈矸墼?7℃恒溫水浴中也有部分水解，所以有顏色變化，但變化不明顯。）從這三支試管看出蔗糖酶只對(duì)蔗糖的水解有催化作用，對(duì)淀粉無催化作用，具有對(duì)蔗糖的底物專一性。3號(hào)是對(duì)照。七、思考題1觀察酶專一性實(shí)驗(yàn)為什么要設(shè)計(jì)這3組實(shí)驗(yàn)？每組各有何意義？蒸餾水有何用？第一組作為整個(gè)實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照組，檢測(cè)Benedict試劑

8、對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顏色有何影響，排除干擾因素的存在。第二組作為檢測(cè)淀粉酶的專一性實(shí)驗(yàn)組，第三組作為檢測(cè)蔗糖酶的專一性的實(shí)驗(yàn)組。蒸餾水作為每一個(gè)組中的空白對(duì)照，與組內(nèi)其余兩組進(jìn)行對(duì)照。2將酶液煮沸10min后，重做二、三的操作，觀察有何結(jié)果？各試管都為藍(lán)色，因?yàn)槊冈谥蠓羞^程中已經(jīng)變性，失去催化活性，故不能催化各自對(duì)應(yīng)底物的水解反應(yīng)。3在此實(shí)驗(yàn)中，為什么要用0.5%淀粉(0.3%NaCl)溶液？0.3%NaCl的作用是什么？0.3%NaCl中的C