高氯酸鹽降解菌的鑒定及特性研究.pdf

1、近年來(lái),高氯酸鹽在大量水、土壤和食物中均被檢測(cè)到,已經(jīng)引起全世界范圍內(nèi)人們的高度重視。由于高氯酸鹽攝入人體后會(huì)導(dǎo)致甲狀腺激素的分泌不足,進(jìn)而抑制人體正常的新陳代謝和生長(zhǎng)發(fā)育,因此,尋找消除此類污染物的有效方法成為全世界關(guān)注的重大環(huán)境問(wèn)題之一。微生物降解作用是環(huán)境中高氯酸鹽污染去除的最主要途徑,利用厭氧微生物在缺氧條件下將高氯酸鹽最終降解為無(wú)毒無(wú)害的氯化物,而且微生物降解是最為經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便、無(wú)二次污染的有效方法,倍受關(guān)注。本論文通過(guò)分離純化得

2、到兩種菌株,并借助分子生物學(xué)方法和生物信息學(xué)技術(shù)鑒定其菌屬,并通過(guò)試驗(yàn)確定其最佳生長(zhǎng)條件。
　　 主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
　　 (1)以從江濱泵站污水中分離所得的菌株JD15和從大港污水處理廠污水中分離得到的菌株JD22為研究對(duì)象,純化后在PCA培養(yǎng)基中富集培養(yǎng),提取培養(yǎng)基中總細(xì)菌的DNA,利用PCR擴(kuò)增技術(shù)克隆水體細(xì)菌的16S rDNA基因片段,測(cè)序結(jié)果在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行序列檢索,通過(guò)EBI比對(duì)序列和構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

3、,并與數(shù)據(jù)庫(kù)中已收錄的細(xì)菌16SrDNA序列進(jìn)行相似性比較分析。分析結(jié)果顯示:JD15和Dechloromonas sp SIUL序列相似度高達(dá)100％,JD22和Dechlorospirillum序列相似度達(dá)97％,兩者分別具有同源性。
　　 (2)以JD15和JD22為研究對(duì)象,利用分子生物學(xué)技術(shù)和生物學(xué)信息學(xué)技術(shù)對(duì)兩種菌株進(jìn)行了進(jìn)一步的分析,分析結(jié)果顯示:JD15與Dechloromonas agitate菌的ClO4還原

4、酶a亞基基因片段相似率達(dá)99％,JD22和Dechlorospirillum sp菌的ClO4還原酶a亞基基因部分片段相似率達(dá)99％。
　　 (3)改變影響Dechloromonas agitate和Dechlorospirillum的生長(zhǎng)條件,通過(guò)OD值測(cè)定和離子色譜儀分析,分別繪制生長(zhǎng)曲線和降解曲線。結(jié)果顯示:Dechloromonas agitate和Dechlorospirillum在24℃和pH=7時(shí)生長(zhǎng)較快且生長(zhǎng)狀態(tài)