九龍江河口紅樹(shù)林濕地石油降解菌群落結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、在21世紀(jì)，環(huán)保工作者們對(duì)紅樹(shù)林濕地以及紅樹(shù)林中具有海洋污染生物修復(fù)功能的微生物資源的研究已經(jīng)成為一個(gè)熱點(diǎn)。本研究的目的是探索紅樹(shù)林區(qū)微生物在石油污染壓力下的細(xì)菌數(shù)量、代謝活性以及群落結(jié)構(gòu)的變化，并從中分離篩選石油降解菌。樣品采集于中國(guó)福建省九龍江口紅樹(shù)林濕地的3個(gè)站位，以原油和柴油為選擇壓力富集馴化樣品中的微生物。在富集馴化過(guò)程中，測(cè)定了可培養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量、微生物的代謝活性，并用PCR-DGGE的方法分析了馴化過(guò)程中細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的變化。

2、結(jié)果如下： 1.經(jīng)過(guò)富集馴化，從紅樹(shù)林沉積物中獲得了大量的可培養(yǎng)細(xì)菌。非轉(zhuǎn)接組在馴化過(guò)程的第一周到第五周，細(xì)菌的數(shù)量恒定，從第六周開(kāi)始到第八周，所有實(shí)驗(yàn)組的細(xì)菌數(shù)量都呈緩慢的減少趨勢(shì)。在轉(zhuǎn)接組，15號(hào)站位可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量最高，其次是14號(hào)站位，12號(hào)站，豐度最低的是海水的馴化樣品。結(jié)果還顯示，以柴油為富集壓力下的樣品中的平均細(xì)菌數(shù)高于原油樣品，此外，所有站位樣品以2216E作為富集培養(yǎng)基得到的細(xì)菌數(shù)均高于經(jīng)R2A培養(yǎng)的。

3、 2.測(cè)定了不同站位以及富集富集馴化的微生物的電子傳遞系統(tǒng)的活性(ETSA)。在非轉(zhuǎn)接組中，ETSA值從第一周到第五周基本不變，第六周到第八周開(kāi)始下降。在轉(zhuǎn)接組中的結(jié)果表明，15號(hào)站位的樣品表現(xiàn)有最高的活性，其次是海水富集物)，14號(hào)站位和12號(hào)站位。另外，以柴油為富集壓力下的樣品的ETSA平均值高于原油的。同時(shí)發(fā)現(xiàn)所有站位的樣品在以2216E作為富集培養(yǎng)基得到的ETSA平均值高于R2A。 3.利用PCR-DGGE方法分析了

4、研究了紅樹(shù)林沉積物在原油和柴油污染壓力下微生物群落結(jié)構(gòu)的變化。DGGE的條帶表明，第一周到第八周，細(xì)菌的群落結(jié)構(gòu)沒(méi)有明顯的變化。并且，對(duì)獲得的8條優(yōu)勢(shì)條帶進(jìn)行了測(cè)序，結(jié)果表明它們的分別屬于Hbrio natriegens，Vibronaeeae bacterium，Vibrio campbellii， Uncultured marine bactyerium，Vibrioparahaemolyticus，Pseudomonas sp，V

5、ibrio sp和Vibrio alginolyticus。 4.從原油和柴油富集培養(yǎng)基中分離得到了11株菌，16S rDNA文庫(kù)分析表明，絕大多數(shù)分離到得細(xì)菌其序列相對(duì)應(yīng)的細(xì)菌為此前已確定的潛在的多環(huán)芳烴(PAHs)降解菌，在Gene bank比對(duì)結(jié)果表明這11株菌分別歸屬于Pseudomonas sp.， Flexibacteraceae bacterium，Rhodobacteraceae bacterium，Marin