實(shí)驗(yàn)技術(shù)習(xí)題

1、1《分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)》課堂練習(xí)題《分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)》課堂練習(xí)題參考答案參考答案學(xué)號：學(xué)號：姓名：姓名：一、填空題。一、填空題。1.在用SDS分離DNA時，要注意SDS濃度，0.1%和1%的SDS作用是不同的，前者，后者。2.SDS是一種提取DNA時常用的陰離子去污劑，它可以溶解膜蛋白和脂肪，使細(xì)胞膜和核膜破裂，使核小體和核糖體解聚，釋放出。它還可以使蛋白質(zhì)變性沉淀，也能抑制。3.在分離DNA時，需要帶手套操作，是因?yàn)椤?.用

2、酚氯仿抽提DNA時，通常在氯仿或酚氯仿中加入少許異戊醇，這是因?yàn)橛袡C(jī)溶劑異戊醇可以。另外，異戊醇有助于分相，使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白質(zhì)相和下層有機(jī)溶劑相維持穩(wěn)定。5.在分離DNA時，要用金屬離子螯合劑，如EDTA和檸檬酸等，其目的是：。6.在DNA分離過程中，造成DNA分子斷裂的因素很多，主要有：、和。7.在分離DNA時，常用酸變性、堿變性、熱變性和來去除蛋白質(zhì)。8.用乙醇沉淀DNA的原理是：。9.用乙醇沉淀DNA時

3、，通常在DNA溶液中加入單價陽離子，如氯化鈉和乙酸鈉，其目的是。10.通?？稍?種溫度下保存DNA：4～5℃、20℃和70℃，其中以℃為好。11.濃縮DNA的方法通常有：包埋吸水法、蒸發(fā)法、膜過濾法和。12.堿裂解法和清亮裂解法是分離質(zhì)粒的兩種常用方法，二者的原理不同，前者是根據(jù)，后者是根據(jù)。13.在技術(shù)中，DNA限制性酶切片段經(jīng)凝膠電泳分離后，被轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素薄膜上，然后與放射性標(biāo)記的DNA探針雜交。14.SSC是氯化鈉和檸檬酸鈉組

4、成的試劑，其中前者作用是：，后者的作用是：。15.在southern雜交中，DNA轉(zhuǎn)移的速度取決于、和。3二、判斷題。二、判斷題。1.氯霉素擴(kuò)增DNA時，加氯霉素的時間是重要的，因?yàn)榧拥锰?，菌?shù)不夠，加人時間過遲，菌齡過老，容易自溶。（）2.在DNA貯存液中加一滴三氯甲烷，可防止真茵的污染。（）3.DNA、RNA在pH8.5的TAE緩沖夜中電泳時，由正極向負(fù)極移動。（）4.作為一個基因克隆的載體，主要由藥物抗性基因、供插入外源DNA片

5、段的多克隆位點(diǎn)和外源片段插入篩選標(biāo)志這3大部分構(gòu)成。（）5.用pUC質(zhì)粒作克隆載體克隆DNA時，人們用顯色法篩選重組質(zhì)粒，即在有IPTG和Xgal的平板上，顯示白色的菌落含有原始質(zhì)粒，而顯示藍(lán)色的菌落含有重組質(zhì)粒。（）6.在克隆載體pUC系列中，完整的lacZ基因提供了一個外源基因插入的篩選標(biāo)記，藍(lán)色的轉(zhuǎn)化菌落通常表明克隆是失敗的。（）7.在克隆載體pBSK質(zhì)粒中，利用完整的lacZ基因作為篩選標(biāo)記，白色的轉(zhuǎn)化菌落表明重組質(zhì)?？隙ú迦胪?/p>

6、源片段。（）8.Xgal顯色反應(yīng)的基本原理是使載體與受體互補(bǔ)的失活。（）9.堿法和煮沸法分離質(zhì)粒DNA的原理是不同的。（）10.根據(jù)構(gòu)建方法的不同，基因文庫分為基因組文庫、cDNA文庫等。（）11.一旦有了一套已知序列的基因組克隆，通過從文庫中獲得覆蓋目的突變基因所在基因組區(qū)的所有克隆，就可以進(jìn)行染色體步移。（）12.核酸雜交的原理是根據(jù)分子間雜交。（）13.在Nthern雜交中，為了防止RNA形成部分發(fā)夾結(jié)構(gòu)，影響遷移率，所以要用變性

7、緩沖液進(jìn)行電泳。（）14.用限制性內(nèi)切核酸酶BglⅡ（識別位點(diǎn)是A↓GATCT）酶切載體DNA，用BamHⅠ（識別位點(diǎn)是G↓GATCC）酶切供體DNA，可以直接通過粘性末端進(jìn)行連接。（）15.不匹配的粘性末端可以通過部分填補(bǔ)或補(bǔ)平后進(jìn)行連接。（）16.單克隆抗體是淋巴細(xì)胞和瘤細(xì)胞雜交后形成的單個雜交瘤細(xì)胞經(jīng)無性繁殖而生特異性抗體。（）17.基因組學(xué)強(qiáng)調(diào)從基因組的整體而不是單個基因的角度把握生物體遺傳變異的規(guī)律。（）18.利用足夠數(shù)量的S