人可溶性e選擇素se-selectinelisa試劑盒使用方法

1、人可溶性人可溶性E選擇素選擇素(sEin)ELISA(sEin)ELISA試劑盒使用方法試劑盒使用方法檢測范圍：檢測范圍：96T1ngL60ngL使用目的：使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中可溶性E選擇素(sEin)含量。實驗原理實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人可溶性E選擇素(sEin)水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入可溶性E選擇素(sEin)，再與HRP標記的抗體結

2、合，形成抗體抗原酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的可溶性E選擇素(sEin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人可溶性E選擇素(sEin)濃度。試劑盒組成試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml1瓶7終止液6ml1瓶2酶標試劑6ml1瓶8標準品（120ngL）0.5ml1瓶3酶標包被板12孔8條

3、9標準品稀釋液1.5ml1瓶4樣品稀釋液6ml1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml1瓶12密封袋1個標本要求標本要求1標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于20℃保存，但應避免反復凍融2不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試

4、管中進行稀釋。60ngL5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液30ngL4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液15ngL3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5ngL2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液3.75ngL1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔

5、、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此3各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次

6、加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數（n5）。5封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6底物請避光保存。7嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9本試劑不同批號組分不