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1、 太原理工大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 I Acinetobacter sp. Y1 的氨氮去除性能及其關(guān)鍵酶的研究 摘 要 Acinetobacter sp. Y1 是一株從太原焦化廢水處理廠中篩選到的異養(yǎng)硝化好氧反硝化細(xì)菌。本實(shí)驗(yàn)對 Acinetobacter sp. Y1 進(jìn)行了氨氮和 COD 去除性能檢測, 氨氮去除路徑中關(guān)鍵酶-羥胺氧化還原酶(HAO)、 亞硝酸鹽還原酶(NIR)和硝酸鹽還原酶(NAR)的酶活性檢測,HAO 的分離純
2、化和酶學(xué)性質(zhì)研究,并對全基因組進(jìn)行測序和分析,得到的主要結(jié)論如下: 1. 檸檬酸鈉為碳源、硫酸銨為氮源,培養(yǎng) 24 h,Acinetobacter sp. Y1對氨氮、總氮、COD 的去除率分別達(dá)到 98%、94%、92%。硝化過程中羥胺、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮不積累。 2. 優(yōu)化超聲波破碎法提取粗酶的工作條件,得到最佳參數(shù)組合為:破碎功率 50 W,工作與間歇時(shí)間分別為 4 s 和 7 s,菌液密度 1.250,總工作時(shí)間 20 min
3、。檢測到 HAO、NIR、NAR 的比活力分別為 0.011、0.002、0.018 U/mg protein。 HAO 是周質(zhì)蛋白, SDS-PAGE 分析比較滲透壓休克法和超聲波破碎法得到的粗酶液, 發(fā)現(xiàn)滲透壓休克法得到的粗酶液雜蛋白種類少,含量低,HAO 酶活性高,比超聲波破碎法更適合用來提取 HAO。3. 優(yōu)化培養(yǎng)條件,得到檸檬酸鈉為碳源、硫酸銨為氮源、C/N=14、培養(yǎng)時(shí)間 16 h 時(shí), HAO 產(chǎn)量最高。 滲透壓休克法提取
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