大豆耐低磷基因型的篩選及檢測(cè)質(zhì)膜h39;atpase基因半定量體系的建立

1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文大豆耐低磷基因型的篩選及檢測(cè)質(zhì)膜H-ATPase基因半定量體系的建立姓名：張曉紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：王冬梅20070610S c r e e n i n g o f t h e E f f i c i e n c tS o y b e a n sa n d t h eF o u n d a t i o no ft h e T e s t i n g S y s t e m o f t h e

2、P M H “- 峨P a s eG e n eU s i n g S e m i —R TP C RA u t h o r ：Z h a n g X i a o h o n gA d v i s o r ：P r o f e s s o r W a n g D o n g m e iM a j o r ：B o t a n yA b s t r a e tT h e s o i l l a c k i n go ft h ea v a

3、 i l a b l ep h o s p h o r u s n u t r i t i o na n d s o y b e a n S ’[ G l y c i n em a x( L ．) M e r r i l l ] l o we f f i c i e n t u t i l i z a t i o n a r et w oo ft h e l i m i t i n gf a c t o r s t h a t i n

4、f l u e n c et h ep r o d u c t i o no fs o y b e a n S ，an u t r i e n ts o l u t i o ne x p e r i m e n tw i t h 17s o y b e R av a r i e t i e s w h i c hp l a n t e db r o a d l yi n H e b e ip r o v i n c ew a s c a

5、 r r i e d o u to n t h e c h a r a c t e r i s t i co fp h o s p h o r u sa b s o r p t i o nS O a st os c r e e np h o s p h o r u se f f i c i e n tv a r i e t i e s ．T h er e s u l t sr e v e a l e dt h a t t h e r e

6、e x i s t e dg e n e t i c v a r i a t i o na m o n g t h e t e s t e dv a r i e t i e s e x a c t l y ．T h e d i f f e r e n ts o y b e a n v a r i e t i e se x h i b i t e dd i f f e r e n t l yo nt h er o o t o r s h

7、o o tb i o m a s s ，r o o ta n ds h o o tr a t i o ，r o o th a i rt o t a ll e n g t h ，r o o th a i ra c t i v ea b s o r b i n gs u r f a c e ，p h o s p h o r u se f f i c i e n c ya n d t h e a c i dp h o s p h a t a

8、s ea c t i v i t y a t l o wo rh i g h p h o s p h o r u sl e v e l ．A c c o r d i n gt o t h e r e s u l t s ，w es c r e e n e d t h r e ep h o s p h o r u se f f i c i e n tv a r i e t i e so f Z h o n g - h u a n g1 9

9、 ，z h o n g - h u a n g1 5a n d N f 3 7 a sw e l la st w oi n e f f i c i e n t v a r i e t i e s o fz h o n g - h u a n g l 0a n d J i - h u a n g l 3 ．A n e x p e r i m e n t w a sc o n d u c t e db e t w e e nz h o n

10、g - h u a n g l 9a n d J i - h n a n g l 3o nt h ea m o u n to f H + e x u d e d b ys o y b e a n sa th i 曲o rl o w p h o s p h o r u sl e v e l ．T h er e s u l t sr e v e a l e dt h a tt h e a m o u n to f t h eH + t h

11、a tW a s r e l e a s e db ye f f i c i e n t v a r i e t yw a s 15 9p e r c e n to f t h a to fJ i —h u a n g1 3 ．T h eq u a n t i t yo f H + e x u d e d b ys o y b e a n r o o t sw h i c h w e r ep l a n t e da tl o w p

12、 h o s p h o r u sl e v e lW a s 3 ．2 o r2 ．1 t i m e st h a n t h o s ep l a n t e d a th i g h p h o s p h o r u ss o l u t i o n ．A c c o r d i n g t oi t , w e i n f e r r e dt h a tt h e h i g h e ra m o u n t o fa

13、c i de x u d e db ys o y b e a nr o o t sm a y b e c o r r e l a t ew i t ht h ee n d u r a n c e u n d e rl o w p h o s p h o r u ss t r e s s ．At e s to nt h ee x p r e s s i o no fP M H + - A T P t u s eW a sc o n d u

14、 c t e db y s e m i - q u a n t i t a t i v eR T - P C R w i t l lW u X i n g 2 ．S o y b e a nr o o ta p i c e sw e r ee x c i s e d a n d u s e df o ri s o l a t i o no f t o t a lR N Au s i n g a n e x t r a c t i o n

15、r e g e n t a n d t h e p r i m e r s 白f P M H + - A T P a s eg e n e a n dh o u s e - k e e p i n gg e n e B - t u b l i nw e r ed e s i g n e da c c o r d i n gt ot h eg e n es e q u e n c es h o w e do nG e n b a n k

16、．T h er e s u l t so f P C R i n d i c a t e dt h a tt h el o w p h o s p h o r u ss t r e s si st h es a m e a st h eo t h e r e n v i r o n m e n t a lf a c t o r s ，P MH + 一A T P a s eg e n eW a se x p r e s s e ds l