納米無機(jī)材料粉末抗菌性能試驗方法

1、GB/T 21510—××××附 錄 A（規(guī)范性）粉末抗菌性能試驗方法 振蕩法A.1 適用范圍本試驗方法適用于測定納米粉末的抗菌性能。A.2 試驗設(shè)備和材料A.2.1 試驗設(shè)備A2型二級生物安全柜、恒溫振蕩培養(yǎng)箱（300 r/min） 、恒溫培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌鍋、電熱恒溫干烤箱[（0~250）℃]、冷藏冰箱、 微波爐（輸出功率≥700w） 、 天平（感量0.001g） 。A.2.2 試驗器材三角

2、燒瓶(容量為500ml、250ml、150 ml)、 平皿（直徑為90mm） 、試管（18mm×180mm） 、量筒（100ml） 、吸管(10ml、5ml、1 ml)、酒精燈、試管架等。A.2.3 培養(yǎng)基及試劑A.2.3.1 普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化鈉 5g蒸餾水 1000ml調(diào)pH值至7.2～7.4，高壓蒸汽滅菌121℃，20 min。用途：用于金黃色葡萄球菌和大腸桿菌增菌培養(yǎng)。A.2.3.2 普通

3、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化鈉 5g瓊脂 20g蒸餾水 1000ml調(diào)pH值至7.2～7.4，高壓蒸汽滅菌121℃，20 min。 用途：用于金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的培養(yǎng)。A.2.3.3 沙堡氏瓊脂培養(yǎng)基蛋白胨 10g葡萄糖 40g瓊脂 20g蒸餾水 1000ml調(diào)pH值至5.4～5.8，高壓蒸汽滅菌115℃，30 min。用途：用于白色念珠菌的培養(yǎng)。A.2.3.4 含 0.1% 吐溫-80 的磷酸鹽緩沖液[PBS，0

4、.03mol/L, pH（7.2～7.4）]磷酸氫二鈉（Na2HPO4,無水） 2.83g磷酸二氫鉀（KH2PO4） 1.36g非離子表面活性劑吐溫-80 1.0g蒸餾水 1000ml高壓蒸汽滅菌121℃，20 min。 用途：用于菌液和試驗樣本的稀釋。GB/T 21510—××××將含對照樣本和試驗樣本的三角燒瓶固定于恒溫振蕩培養(yǎng)箱的搖床上，在作用溫度37℃±1℃條件下，以150r/m

5、in速度，檢測樣品需要稀釋后使用的材料振蕩接觸1h～4h，不需要稀釋直接使用的材料振蕩接觸4h～24h。A.3.2.6 振蕩接觸一定時間后活菌計數(shù)振蕩后的對照樣液和試驗樣液經(jīng)適當(dāng)稀釋后，分別取1.0 ml 的樣液接種于滅菌平皿中，每樣液平行接種2個平皿，傾注45℃～55℃已溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，待瓊脂培養(yǎng)基凝固后翻轉(zhuǎn)平板，將上述平板置于37℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。A.3.2.7 陰性對照組陰性對照組分別吸取試驗同

6、批次稀釋液、培養(yǎng)基與試驗樣本一起放入37℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。觀察有無污染。A.3.2.8 觀察結(jié)果對細(xì)菌培養(yǎng)24h～48h后觀察最終結(jié)果，對白色念珠菌培養(yǎng)48h～72h后觀察最終結(jié)果。菌落計數(shù)按中華人民共和國衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》(2017年版)中菌落總數(shù)測定方法。A.4 試驗要求A.4.1“0”接觸時間對照組的菌落數(shù)應(yīng)在 1×104cfu/ml～5×104cfu/ml。陰性對照應(yīng)無菌生長。A.4.2