溶瘤病毒介導(dǎo)的基于熱休克蛋白的體內(nèi)個(gè)體化腫瘤疫苗的研究.pdf

1、腫瘤疫苗是腫瘤系統(tǒng)治療具有前景的發(fā)展方向，但腫瘤是一個(gè)攜帶數(shù)目巨大基因突變的細(xì)胞群體，導(dǎo)致腫瘤抗原在患者個(gè)體之間的存在很大的異質(zhì)性和個(gè)體化。因此要求腫瘤疫苗所針對(duì)的抗原譜系盡可能與患者腫瘤的抗原譜系吻合，即個(gè)體化疫苗。雖然來源于患者自身的抗原庫有可能激發(fā)個(gè)體化抗腫瘤免疫發(fā)應(yīng)，如何將個(gè)體化的腫瘤抗原庫傳遞給免疫系統(tǒng)則是個(gè)關(guān)鍵問題。目前個(gè)體化腫瘤疫苗的策略主要包括經(jīng)修飾的自體瘤細(xì)胞疫苗、自體瘤細(xì)胞-樹突細(xì)胞(Dendritic Cell，D

2、C)融合疫苗、自體瘤細(xì)胞提取物(DNA、RNA、蛋白質(zhì))疫苗以及自體瘤細(xì)胞提取物(DNA、RNA、蛋白質(zhì))沖擊的DC疫苗等。但是上述個(gè)體化腫瘤疫苗策略均為回體(ex vivo)疫苗，即存在將患者自體腫瘤進(jìn)行體外加工，而且必須針對(duì)每位患者單獨(dú)進(jìn)行制備，極大地限制了該類疫苗的臨床應(yīng)用和工業(yè)化生產(chǎn)。 溶瘤病毒是一種可在腫瘤細(xì)胞內(nèi)選擇性復(fù)制進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤溶破的條件復(fù)制性病毒。溶瘤病毒治療腫瘤的概念首先被一種E1B-55KD缺失的腺病毒(H

3、101)所證實(shí)，該病毒作為世界上首個(gè)溶瘤病毒藥物被中國SFDA批準(zhǔn)用于腫瘤的治療。溶瘤病毒溶破-腫瘤時(shí)所釋放的抗原則有可能用于激發(fā)個(gè)體化的抗腫瘤免疫。熱休克蛋白(Heat shockprotein，HSP)具有分子伴侶功能，可與蛋白抗原非共價(jià)鍵結(jié)合，進(jìn)而形成HSP-多肽復(fù)合物(Heat Shock Protein-Peptide Complexe，HSPPC)；同時(shí)專職抗原呈遞細(xì)胞(professional antigen presen

4、ting cell，pAPC)表面存在HSP受體，通過受體介導(dǎo)可將HSPPC呈遞給T淋巴細(xì)胞，進(jìn)而激活腫瘤抗原特異性免疫反應(yīng)。本研究所涉及的腫瘤疫苗是將選擇性溶瘤病毒與熱休克蛋白HSP疫苗相結(jié)合，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)體內(nèi)(in vivo)個(gè)體化腫瘤疫苗策略。H103是攜帶有HSP基因的選擇性溶瘤病毒，該病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)選擇性復(fù)制的同時(shí)，高表達(dá)所攜帶的HSP基因，HSP蛋白與瘤細(xì)胞內(nèi)的腫瘤抗原非共價(jià)鍵結(jié)合，形成大量的HSP-腫瘤抗原復(fù)合物。這些復(fù)合物

5、在瘤細(xì)胞溶破時(shí)得以釋放，并被pAPC表面的HSP受體捕獲，進(jìn)而激發(fā)抗原特異性免疫反應(yīng)，從而殺傷遠(yuǎn)端的轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞，達(dá)到免疫治療效應(yīng)。上述過程均在患者體內(nèi)完成，所呈遞的腫瘤抗原具有個(gè)體化特征，所激發(fā)抗腫瘤免疫所針對(duì)的抗原譜系與患者自身吻合，因而是一種體內(nèi)個(gè)體化腫瘤免疫治療策略。臨床前研究顯示H103具有明確的抗腫瘤作用和安全性。除其局部溶瘤效應(yīng)而對(duì)注射腫瘤發(fā)揮抑制作用之外，可通過激發(fā)小鼠體內(nèi)抗腫瘤免疫反應(yīng)而發(fā)揮對(duì)遠(yuǎn)端腫瘤的抑制作用。H10

6、3經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)，作為國家I類新藥進(jìn)入臨床試驗(yàn)研究。 本研究為溶瘤性重組腺病毒注射液(H103)瘤內(nèi)注射治療27例晚期難治性惡性實(shí)體腫瘤的I期劑量升級(jí)臨床試驗(yàn)。安全性和最大耐受劑量為本研究的首要研究終點(diǎn)，另外考察H103體內(nèi)激發(fā)免疫反應(yīng)的有效性和抗腫瘤效應(yīng)的初步有效性。劑量升高至最高3.0×1012病毒顆粒(Virual Particle，VP)時(shí)，H103瘤內(nèi)注射仍能被良好耐受，未達(dá)到最大耐受劑量。除1例發(fā)生于1

7、.5×1012VP劑量組III度發(fā)熱和1例發(fā)生于3.0×1012VP劑量組IV度血小板減少不良事件之外，其他不良事件包括輕中度注射局部反應(yīng)、發(fā)熱和血液學(xué)毒性。3例受試者H103注射部位腫瘤縮小50％以上，局部反應(yīng)率為11.1％(3/27)，3例受試者出現(xiàn)非注射部位腫瘤一過性縮小。通過淋巴細(xì)胞亞群分析對(duì)細(xì)胞免疫狀態(tài)進(jìn)行了初步檢測，治療后21天受試者白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞、CD4 T細(xì)胞、CD8 T細(xì)胞和活化CD28+T細(xì)胞較治療前有所