基于酶催化銀沉積原理的1,5-脫水葡萄糖醇電化學傳感器研究.pdf

1、1,5-脫水葡萄糖醇（l,5-anhydroglueitol，1,5-AG）是一種反應血糖水平的重要生物標志物，臨床上常通過檢測人體血清中1,5-AG的濃度進行糖尿病的診斷、發(fā)展程度判斷、治療效果評估。瞄準人體血清中1,5-AG的檢測問題，在LAPS芯片表面修飾吡喃糖氧化酶（Pyranose Oxidase，PROD）作為電化學探針，基于酶催化銀沉積原理，設計一種能特異性檢測1,5-AG的光尋址電位型電化學生物傳感器（Light Add

2、ressable Potentiometric Sensor，LAPS）。
　　本研究主要內容包括：⑴構建LAPS生物傳感界面。以1,5-AG為測試對象，通過層層自組裝將能特異性識別1,5-AG的吡喃糖氧化酶修飾在LAPS芯片表面，構建LAPS生物傳感界面；優(yōu)化PROD的固定化條件，通過在硅烷化的LAPS芯片上修飾納米金吸附層提高識別分子的負載量。利用納米金良好的生物相溶性和吸附作用將能特異性識別1,5-AG的PROD固定到LAP

3、S芯片表面，增加被固定酶的穩(wěn)定性和有效保持被固定酶的生物活性。⑵搭建基于LabVIEW平臺的LAPS檢測系統(tǒng)。以ICL8038信號發(fā)生器芯片制作LAPS尋址光源的可調制驅動信號源，設計自動功率控制電路（Automatic Power Control：APC）控制尋址光源的驅動電流，使尋址光源輸出功率在工作溫度范圍內保持恒定，利用LabVIEW軟件搭建采集系統(tǒng)對數(shù)據(jù)進行采集、處理并繪制電流-電壓（I-V）曲線。⑶基于酶催化銀沉積原理來實現(xiàn)

4、對1,5-AG的特異性檢測。利用PROD對1,5-AG的催化作用，生成還原性物質雙氧水。雙氧水將電解質溶液中的銀離子還原為銀單質使溶液中的銀離子濃度減小，導致LAPS芯片表面的膜電位發(fā)生變化，膜電位的變化也反映了1,5-AG濃度的變化。結果表明：電壓偏移量與1,5-AG濃度在60μg/mL至225μg/mL范圍內具有良好的線性關系，相關系數(shù)為0.9977，檢測限為40μg/mL,相對標準偏差為1.37%，1,5-AG的回收率在92.95