Span-Tween改性磁性氧化石墨烯固定化脂肪酶的初步研究.pdf

1、脂肪酶(EC3.1.1.3)，具有反應(yīng)條件溫和，高度專(zhuān)一性，高催化效率和對(duì)環(huán)境友好等優(yōu)勢(shì)，在化學(xué)合成、生物降解等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。酶固定于載體后能提高酶的穩(wěn)定性與可重復(fù)利用性。氧化石墨烯為單原子層二維結(jié)構(gòu)，比表面積大，利于酶在載體表面的吸附以及底物與產(chǎn)物的傳質(zhì)，是一種有潛力的催化劑載體。本文以氧化石墨烯為基底材料，采用化學(xué)共沉淀法制備磁性氧化石墨烯(MGO)，同時(shí)采用不同的Span/Tween型表面活性劑對(duì)其進(jìn)行改性，然后用于脂肪酶OF

2、的固定化，初步探討Span/Tween改性對(duì)于磁性氧化石墨烯固定化酶催化特性的影響。
　　采用不同的表面活性劑改性載體固定化酶，發(fā)現(xiàn)載體改性后蛋白固載量和固定化酶比活回收率都有所提高。與游離酶比活(12.90U·mg-1)相比，Span60改性載體固定化酶比活回收率最高，達(dá)到281.5％，比活為36.31U·mg-1。從固載量看，載體Span40改性后的蛋白固載量最高，達(dá)到114.36mg·g-1support。測(cè)定動(dòng)力學(xué)參數(shù)，改

3、性載體固定化酶的Km普遍減少，其中Span40改性載體固定化酶的Vmax和Km分別由游離酶的24.95U·mg-1、1.21mmol·L-1改變?yōu)?3.07U·mg-1、0.46mmol·L-1，其催化效率（Kcat/Km）從24.95s-1/mM-1提高至93.56s-1/mM-1。固定化酶的pH適應(yīng)性和熱穩(wěn)定性得到改善。重復(fù)使用5次后仍保持30.0％的活力，在室溫貯藏31天后仍有56.1％的活力。
　　采用掃描電鏡(SEM)、