海藻酸-PEG半互穿網(wǎng)絡(luò)干細(xì)胞擴增載體的制備與表征.pdf

1、本論文采用典型的W/O的懸浮體系,選取海藻酸鹽為交聯(lián)體系的基質(zhì)材料,通過與交聯(lián)劑胱胺之間發(fā)生交聯(lián)反應(yīng),從而形成半互穿網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)部分,另外選取生物相容性同樣良好的聚乙二醇(PEG)與海藻酸鹽共同構(gòu)筑半互穿網(wǎng)絡(luò)微載體。通過紅外光譜、SEM、粒徑統(tǒng)計等對形成的微載體進行了表征。整個微載體制備過程是基于交聯(lián)劑上的氨基與海藻酸鹽上的羧基之間的酰胺化反應(yīng)實現(xiàn)的。本實驗中制備出的載體內(nèi)含有二硫鍵結(jié)構(gòu),其最大的特點就是能在特定的還原劑作用下發(fā)

2、生二硫鍵與巰基的轉(zhuǎn)化反應(yīng),從而發(fā)生化學(xué)降解反應(yīng)。與未加入PEG的載體材料相比,本文中制備的半互穿網(wǎng)絡(luò)載體在不明顯的損失生物相容性的前提下,可實現(xiàn)微載體降解特性的精確控制。通過調(diào)節(jié)PEG的分子量、PEG與海藻酸鹽的質(zhì)量比、還原劑的種類等實現(xiàn)了對微載體的降解特性以及粒徑大小的可控性,同時還研究了殼聚糖的修飾時間、還原劑的種類等對微載體溶脹性能和降解時間的影響。
　　海藻酸鹽類水凝膠微載體表面缺乏細(xì)胞結(jié)合位點,分子鏈親水性強而不利于微載

3、體材料有效的吸附蛋白類物質(zhì),從而限制了其在細(xì)胞擴增和組織工程材料方面的應(yīng)用。本文考慮并利用聚電解質(zhì)之間的靜電吸引力,借助殼聚糖/纖連蛋白、殼聚糖/肝素/生長因子對載體進行表面改性,提高了微載體的生物相容性。
　　利用本文所制備的不同組分的微載體進行了人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞的擴增培養(yǎng),對細(xì)胞的生長形態(tài)和增殖狀況進行了研究。結(jié)果表明,本實驗所制備的微載體經(jīng)修飾后均可支持細(xì)胞的黏附與增殖,相比之下,經(jīng)纖連蛋白修飾的微載體干細(xì)胞增殖良好,這