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    • 簡介:博士學(xué)位論文HEDGEHOG信號通路在海水吸入大鼠急性肺損傷中的作用及其機(jī)制研究指導(dǎo)教師楊昱錢桂生教授第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍呼吸內(nèi)科研究所壘塑翌申請學(xué)位級別博士科學(xué)學(xué)位專論文提交日期2009年5月學(xué)位授予單位和日期業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)呼吸系病論文答辯日期2009年5月第三軍醫(yī)大學(xué)2009年月答辯委員會(huì)主席翌基墊評閱人塑邋邂駑睦攀避盈焦一二OO九年五月第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明秉承學(xué)校嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男oL(fēng)和科研作風(fēng),本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得我校或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料,與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處,本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名疊整日期坦£苧蘭第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解第三軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定,即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后,發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為第三軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外,可以采用影印、縮印或其他手段保存論文論文作者簽名魚宴指導(dǎo)教師簽名必堡壘,日期塑三望
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    • 簡介:分類號密級國際十進(jìn)分類號(UDC)第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文TI5ZR3SN5MO15NB合金表面陽極氧化處理對成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的影響(題名和副題名)梅盛林(作者姓名)指導(dǎo)教師姓名張玉梅教授(主任醫(yī)師)指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院修復(fù)科申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱口腔臨床醫(yī)學(xué)修復(fù)學(xué)論文提交日期201004答辯日期201005論文起止時(shí)間2008年12月至2010年05月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)TI5ZR3SN5MO15NB合金表面陽極氧化合金表面陽極氧化處理對成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的影響處理對成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的影響研究生梅盛林學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)(口腔修復(fù)學(xué))所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院修復(fù)科導(dǎo)師張玉梅教授(主任醫(yī)師)關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞近Β鈦合金;陽極氧化;表面能;成骨細(xì)胞;細(xì)胞附著;細(xì)胞增殖;細(xì)胞分化;ALP;成骨相關(guān)基因中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2010年5月
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    • 簡介:碩士學(xué)位論文蛇床子素對人牙周膜干細(xì)胞和頜骨骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片形成和生物學(xué)性能的影響蛇床子素對人牙周膜干細(xì)胞和頜骨骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片形成和生物學(xué)性能的影響高麗娜培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型專業(yè)學(xué)位一級學(xué)科專業(yè)類口腔醫(yī)學(xué)二級學(xué)科專業(yè)口腔醫(yī)學(xué)研究方向牙周組織再生指導(dǎo)教師陳發(fā)明副教授(副主任醫(yī)師)培養(yǎng)單位口腔醫(yī)學(xué)院牙周黏膜病科二O一三年五月分類號R7814UDC61631密級公開第四軍醫(yī)大學(xué)THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要3英文摘要8前言14文獻(xiàn)回顧16細(xì)胞治療在牙周組織再生中的應(yīng)用16蛇床子素在骨相關(guān)性疾病中的應(yīng)用進(jìn)展20正文26實(shí)驗(yàn)一PDLSCS和JBMMSCS的培養(yǎng)與鑒定261材料262方法273結(jié)果294討論32實(shí)驗(yàn)二蛇床子素對PDLSCS和JBMMSCS增殖及ALP活性的影響341材料342方法343結(jié)果364討論38實(shí)驗(yàn)三蛇床子素在不同時(shí)間點(diǎn)干預(yù)細(xì)胞膜片培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究401材料402方法403結(jié)果454討論48
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    • 簡介:視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RETINALPIGMENTEPITHELIUMRPE是位于神經(jīng)視網(wǎng)膜與脈絡(luò)膜血管層之間一單層細(xì)胞由神經(jīng)外胚層分化而來。正常的RPE層對于視細(xì)胞結(jié)構(gòu)、生物學(xué)功能的維持以及視周期的順利進(jìn)行起著極為關(guān)鍵的作用。當(dāng)RPE發(fā)生病變會(huì)引起一系列視網(wǎng)膜疾病。目前就RPE發(fā)生病變的機(jī)制并未完全闡明但這些視網(wǎng)膜病變疾病通常都伴隨有RPE細(xì)胞氧化應(yīng)激OXIDATIVESTRESS的發(fā)生。這成為了視網(wǎng)膜病變相關(guān)疾病機(jī)制研究的一個(gè)重要突破口。目前已經(jīng)知道誘發(fā)RPE產(chǎn)生氧化應(yīng)激的因素主要有超氧陰離子自由基、藍(lán)光輻射、致毒性物質(zhì)的攝入、吸煙、肥胖等等。有研究發(fā)現(xiàn)重金屬鉛經(jīng)個(gè)體吸收后在體內(nèi)會(huì)誘發(fā)某些細(xì)胞或組織產(chǎn)生自由基這些成分會(huì)進(jìn)一步導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激應(yīng)答并嚴(yán)重干擾細(xì)胞內(nèi)環(huán)境還原穩(wěn)態(tài)。此外早年有報(bào)道發(fā)現(xiàn)重金屬鉛、鎘在眼底會(huì)發(fā)生沉著而且在RPE層蓄積明顯。因此我們懷疑慢性鉛暴露是否也是誘發(fā)RPE產(chǎn)生氧化應(yīng)激并進(jìn)一步導(dǎo)致其發(fā)生病變的潛在病因?qū)W因素。本課題主要以本實(shí)驗(yàn)室建立的胎兒RPE細(xì)胞系FRPE13及當(dāng)下常用RPE系A(chǔ)RPE19作為主要的實(shí)驗(yàn)材料RPE經(jīng)不同濃度梯度鉛染培養(yǎng)后通過觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化、鑒定氧化應(yīng)激相關(guān)通路的分子表達(dá)差異以及對視網(wǎng)膜色素上皮生理學(xué)功能的測定與評價(jià)來確認(rèn)重金屬鉛是否也是誘發(fā)視網(wǎng)膜色素上皮氧化損傷的一個(gè)重要病理學(xué)因素。研究結(jié)果小結(jié)如下1、急性染鉛培養(yǎng)72HR用CCK8法測定在各個(gè)鉛劑量組RPE細(xì)胞活率。結(jié)果顯示無論是胎兒來源的FRPE13還是成年來源的ARPE19都存在低劑量鉛≤20ΜM興奮性效應(yīng)而劑量高于50ΜM時(shí)RPE細(xì)胞活率下降顯著此外RPE對鉛的可耐受性高于以往研究的其他類型細(xì)胞。我們并且由此確定了后續(xù)實(shí)驗(yàn)鉛的考察劑量0ΜM、10ΜM、50ΜM、250ΜM。2、RPE細(xì)胞經(jīng)間隔12HR連續(xù)的慢性染鉛培養(yǎng)3天、5天、8天細(xì)胞形態(tài)發(fā)生顯著變化。鉛染培養(yǎng)3天0ΜM與10ΜM組細(xì)胞飽滿生長旺盛呈眾小島樣50ΜM、250ΜM組呈小島樣細(xì)胞相對較少長勢緩慢染鉛培養(yǎng)5天后FRPE13的10ΜM組培養(yǎng)皿外圍細(xì)胞已開始皺縮ARPE19的50ΜM組細(xì)胞則成狹長彎鉤狀而250ΜM組已經(jīng)完全成皺縮樣當(dāng)染鉛培養(yǎng)8天后FRPE13中10ΜM組則大范圍開始出現(xiàn)細(xì)胞皺縮而ARPE19的10ΜM組細(xì)胞也出現(xiàn)鵝卵石樣上皮但是細(xì)胞形態(tài)大小不一且不規(guī)整50ΜM組與250ΜM組細(xì)胞則已經(jīng)完全皺縮。3、細(xì)胞滿板后劃痕并連續(xù)鉛染培養(yǎng)3天間隔一定時(shí)間在光鏡下記錄細(xì)胞遷移情況。采用計(jì)算空白區(qū)像素大小的方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果表明當(dāng)鉛濃度達(dá)到50ΜM無論是FRPE13還是ARPEA19上皮的遷移能力幾乎完全受到了抑制而即使是低濃度鉛10ΜM也會(huì)降低RPE細(xì)胞的劃痕愈合能力這種對上皮創(chuàng)傷愈合能力的抑制作用呈劑量依賴特征。4、細(xì)胞經(jīng)慢性鉛染培養(yǎng)5天后收集并重新鋪入96孔板中連續(xù)培養(yǎng)7天采用CCK8法每隔24HR測定其細(xì)胞活率并繪制細(xì)胞生長曲線。結(jié)果顯示生長曲線右移表明鉛降低了RPE的增值活性。5、依據(jù)RPE細(xì)胞生長曲線的特點(diǎn)當(dāng)染鉛或無鉛培養(yǎng)35天后達(dá)到對數(shù)生長期收集細(xì)胞進(jìn)行固定、PI染色并進(jìn)行流式周期分析。結(jié)果表明與不染鉛組相比低劑量10ΜM染鉛組進(jìn)入S與G2M期細(xì)胞明顯增多這進(jìn)一步印證了低劑量鉛的興奮性效應(yīng)而隨著鉛濃度高于50ΜM進(jìn)入分裂相的細(xì)胞開始減少。6、RPE細(xì)胞經(jīng)慢性鉛染培養(yǎng)5天TRIZOL法提取總RNA逆轉(zhuǎn)錄成CDNA后進(jìn)行QPCR檢測。結(jié)果表明鉛能夠誘導(dǎo)分子伴侶如抗增值蛋白、HSP70、抗氧化蛋白與酶均表達(dá)上調(diào)等一系列氧化應(yīng)激應(yīng)答成員的高表達(dá)。此外氧化應(yīng)激應(yīng)答關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子NRF2的表達(dá)也發(fā)生顯著上調(diào)。7、RPE細(xì)胞經(jīng)慢性鉛染培養(yǎng)5天收集貼壁或未貼壁細(xì)胞進(jìn)行流式凋亡分析。結(jié)果顯示細(xì)胞凋亡率呈鉛劑量依賴性特征。綜上所述從RPE細(xì)胞形態(tài)學(xué)、生理功能以及分子水平的研究結(jié)果表明慢性鉛暴露會(huì)誘發(fā)RPE產(chǎn)生氧化應(yīng)激對RPE造成損傷并進(jìn)一步誘發(fā)凋亡或壞死。由此我們得到一個(gè)可以合理的推測重金屬鉛也極有可能是誘發(fā)視網(wǎng)膜色素上皮氧化損傷的一個(gè)重要病理學(xué)因素這為視網(wǎng)膜病變相關(guān)疾病的病因?qū)W機(jī)制提供了更多的參考、證據(jù)與支持。
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    • 簡介:分類號學(xué)號D200D200878363878363學(xué)碼校代1048710487密級過表達(dá)LRIG3基因?qū)θ四X膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及其機(jī)制研究學(xué)位申請人學(xué)位申請人楊洪寬楊洪寬學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)神經(jīng)外科神經(jīng)外科指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師雷霆雷霆教授教授答辯日答辯日期2011年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明,本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知,除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本人將承擔(dān)本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□,在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。(請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”)學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日日期年月日日期年月日
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    • 簡介:研究目的建立SSC患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)體外分離擴(kuò)增的方法,并初步研究SSC患者骨髓MSC的一般生物學(xué)特性和免疫調(diào)節(jié)功能。研究方法通過密度梯度離心和貼壁篩選法從SSC患者和對照骨髓中分離MSC,從形態(tài)、表面標(biāo)志和多向分化潛能等方面進(jìn)行鑒定,通過描繪生長曲線,流式細(xì)胞術(shù)PI染色檢測細(xì)胞周期研究其生長特性。通過混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)和淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)研究SSC患者M(jìn)SC的免疫調(diào)節(jié)功能,用RTPCR方法檢測MSC免疫相關(guān)因子的表達(dá)。研究結(jié)果1通過密度梯度離心和貼壁篩選法從骨髓中分離出紡綞狀形態(tài)均一的MSC,SSC患者骨髓MSC擴(kuò)增能力有限,傳代6次以后逐漸衰老。2流式細(xì)胞術(shù)檢測MSC表面標(biāo)志CD34、CD45、CD31、CD83、CD80、HLADK(),CD166、CD73、CD105、CD90、HLAABC(),SSC患者M(jìn)SC表型與對照無明顯差異,與培養(yǎng)條件有關(guān)。經(jīng)分選的細(xì)胞純度達(dá)90%以上。3流式檢測細(xì)胞周期顯示SSC患者骨髓MSC90%以上處于G0G1期,在傳代過程中無明顯改變,與對照無明顯差異,符合干細(xì)胞的特性。4SSC患者和對照MSC在特定誘導(dǎo)條件下均能分化為骨、脂肪等間質(zhì)細(xì)胞。一些SSC患者表現(xiàn)出更強(qiáng)的成骨分化傾向。5SSC患者和對照MSC在一定條件下均能輕度刺激異基因T細(xì)胞增殖,而抑制有絲分裂原引起的T細(xì)胞增殖,呈劑量依賴性,隨MSC濃度增加而明顯。6SSC患者M(jìn)SC在MRNA水平表達(dá)免疫調(diào)節(jié)相關(guān)因子,觀察到部分患者M(jìn)SC的巨噬系集落刺激因子(MCSF)和轉(zhuǎn)化生長因子Β1(TGFΒ1)表達(dá)水平有所降低。研究結(jié)論1SSC患者骨髓中能分離擴(kuò)增出純度較高的MSC,體外可傳代6次以上,傳代過程中能保持干細(xì)胞的生物學(xué)特性。2SSC患者骨髓MSC具有多向分化潛能,部分患者表現(xiàn)出成骨分化傾向。3SSC患者M(jìn)SC在一定條件下抑制T細(xì)胞增殖,旱劑量依賴性。4SSC患者M(jìn)SC在MRNA水平表達(dá)免疫調(diào)節(jié)相關(guān)因子。
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    • 簡介:第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文PTTG1在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)和MICRNA靶向抑制PTTG1對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)特性影響的實(shí)驗(yàn)研究姓名黃慶鋒申請學(xué)位級別博士專業(yè)神經(jīng)外科學(xué)指導(dǎo)教師盧亦成20080401第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文LBMAPKMIRNAMRNAODOLIGODTPBSPCRPCNAPTTGLRNARPMRTPCRSDSPAGE飛氏EBUFFERTEMED%S一10LURIABERTANIMEDIUMMITOGENACTIVATEDPROTEINKINASEMICRORNAMESSENGERRNAOPTICALDENSITYOLIGODEOXYTHYRNIDYLICACIDPHOSPHATEBUFFEREDSALINE‘POLYMERASECHAINREACTIONPROLIFERATINGCELLNUCLEARANTIGENPITUITARYTUMORTRANSFORMINGGENELRIBONUCLEICACIDROUNDPERMINUTEREVERSETRANSCRIPTIONPOLYMERASECHAINREACTIONSODIUMDODECYLSULFATEPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHERESIS“IRISACETATEEDTABUFFERN,N’N’’NTRTRAMETHYLETHYLENEDIAMINETRIHYDROXYMETHYLAMINOMETHANELB培養(yǎng)基絲裂原活化蛋白激酶微小IⅢA信使RNA光密度寡脫氧胸苷酸磷酸緩沖鹽溶液聚合酶鏈反應(yīng)增殖細(xì)胞核抗原垂體瘤轉(zhuǎn)化基因1核糖核酸’每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈技術(shù)十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳‘三羥甲基氨基甲烷乙酸乙二胺四乙酸緩沖液N,N,N’,N’四甲基乙二胺三羥甲基氨基甲烷
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    • 簡介:原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名滋日期ZRFSR關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定論文作者簽名二陳殆葺_導(dǎo)師簽名冷E爪日期9UB今FIT山東大學(xué)碩士學(xué)位論文于同時(shí)間組合6的X61893倍,組合6的最高擴(kuò)增倍數(shù)為培養(yǎng)28D時(shí)的X98472倍。在CD34及AC133的表達(dá)方面,細(xì)胞因子組合6有利于CD34及AC133細(xì)胞的保持和擴(kuò)增,CD34由最初的X04,上升為第14D的X二225,明顯高于常規(guī)組合2的X二144。同樣,AC133由開始的X03,上升為X172,高于常規(guī)優(yōu)化組合2的X94。在集落形成力面,培養(yǎng)前MNC細(xì)胞做集落培養(yǎng)集落密度為X4229個(gè)集落形成細(xì)胞CFCS10CELLSMNC細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因子組合6培養(yǎng)14D后行集落培養(yǎng)集落密度為X23573個(gè)集落形成細(xì)胞CFCS10CELLS,高于其他組合刺激下相同條件細(xì)胞所形成的集落密度。并且6種組合中,AC133細(xì)胞的比率高則形成集落數(shù)目高,單純CD34細(xì)胞的比率高而AC133細(xì)胞的比率低得集落數(shù)目反而未見增高。在另一方面,對于骨髓AC133富集細(xì)胞細(xì)胞擴(kuò)增呈上升趨勢,于培養(yǎng)28D時(shí)達(dá)最高,組合6刺激下的細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)為X39073倍,略低于細(xì)胞因子組合2的X48128倍。整體上,相同的細(xì)胞因子組合刺激下細(xì)胞擴(kuò)增總數(shù)低于骨髓MNC在CD34及AC133的表達(dá)方面,不論是在何種細(xì)胞因子組合刺激下,CD34及AC133細(xì)胞比例皆呈下降趨勢,AC133比CD34下降更明顯。但細(xì)胞因子組合6刺激下CD34十及AC133細(xì)胞下降情況較其它組合緩慢,CD34由原來的X856,下降至培養(yǎng)28D的X169,AC133由X901,下降至培養(yǎng)28D的X108。與之相對應(yīng)的是分別在6種細(xì)胞因子刺激下,培養(yǎng)7D14D21D后做集落培養(yǎng),集落形成密度也呈下降趨勢。同樣,組合6培養(yǎng)的細(xì)胞所形成集落密度下降緩慢。在細(xì)胞周期變化方面組合6刺激下的大量的AC133富集細(xì)胞迅速由GOGL期進(jìn)入S期,于14D時(shí)GOG1期降至最低X609,但仍略高于細(xì)胞因子組合2的X547,這與細(xì)胞的擴(kuò)增情況相對應(yīng)。在細(xì)胞凋亡方面,都在培養(yǎng)至14D達(dá)最高,以后有所下降。組合6的最高凋亡率為X61,低于其他組合。結(jié)論通過為期4周的短期培養(yǎng),未純化的骨髓單個(gè)核細(xì)胞MNC直接培養(yǎng)
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    • 簡介:目錄MIR一503靶基因PRKACA的鑒定及其在食管鱗癌細(xì)胞中的生物學(xué)功能???????????????????????????11.1中文摘要????????????????????????11.2英文摘要????????????????????????51.3前言??????????????????????????91.4材料與方法???????????????????????121.5結(jié)果及結(jié)論???????????????????????301.6討論?????????????????????????471.7結(jié)論?????????????????????????551.8參考文獻(xiàn)???????????????????????561.9DNA甲基化在食管癌防治中的研究綜述????????6623英漢縮略詞對照表????????????????????72致謝?????????????????????????74PMIRPRKACAMUTANT將MIR一503MIMICS、MIR一503NEGATIVECONTROL、PMIR.PRKACA和PMIR。PRKACAMUTANT,分別共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞;裂解細(xì)胞后加入底物,檢測熒光素酶活性。9、通過生物信息學(xué)方法即GO基因分類法、KEGGPATHWAVS法預(yù)測MIR.503在食管鱗癌中靶基因。10、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包,兩指標(biāo)間的比較采用LSDT檢驗(yàn),兩項(xiàng)以上的采用單因素方差分析;計(jì)量資料采用T檢驗(yàn);差異性分析用配對妒檢驗(yàn);相關(guān)性檢驗(yàn)用SPEARMAN相關(guān)分析,以0【O.05為標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果1、TAQMAN探針法結(jié)果表明,在缺糖、缺氧及饑餓條件下,ECAL09和ECA9706中的MIR.503的表達(dá)水平顯著升高;2、SIIⅢA轉(zhuǎn)染ECAL09細(xì)胞,分別命名為P砌認(rèn)CASII必A.ECA109.1、PRKACASIRNAECAL09.2、PRKACA.SIRNA.ECAL09.3禾口SIRNA.NC組,經(jīng)過48H的培養(yǎng),使用WESTERNBLOT篩選對PRKACA基因表達(dá)干擾效果最好的SIRNA。3、轉(zhuǎn)染SIRNA.PRKACA后48H,與對照組比較的結(jié)果顯示,PRKACA.SIIⅢA.ECAL09。3組的PRKACA蛋白的表達(dá)水平明顯降低P0.05,顯示干擾SIRNA序列能夠顯著下調(diào)PRKACA的表達(dá),同時(shí)VIMENTIN表達(dá)相對下調(diào),E.CADHERIN表達(dá)升高,CYCLIND1和CYCLINE1蛋白的表達(dá)水平降低。4、CCK.8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,PRKACA基因抑制組食管鱗癌細(xì)胞增殖速度減慢P0.05,對照組細(xì)胞的增殖速度加快P0.05。表明PRKACA能夠促進(jìn)食管鱗癌細(xì)胞的增殖;5、TRANSWELL實(shí)驗(yàn)檢測干擾組食管鱗癌細(xì)胞。遷移實(shí)驗(yàn),ECAL09的MIMICS組鏡下細(xì)胞數(shù)是55個(gè),ECA9706X100的MIMICS組為82個(gè);
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    • 簡介:分類號R6573密級單位代碼10422學(xué)號201113553∥菇辦孽SHANDONGUNIVERSITY碩士學(xué)位論文THESISFORMASTERDEGREE論文題目聯(lián)合轉(zhuǎn)染LIVIN和SURVIVINSHRNA表達(dá)載體對肝癌HEPG2細(xì)胞生物學(xué)行為的影響IMPACTOFCOTRANSFECTIONWITHLIVINANDSURVIVINSHRNAEXPRESSIONVECTORSONBIOLOGICALBEHAVIOROFHEPG2CELLS作者姓名培養(yǎng)單位專業(yè)名稱指導(dǎo)教師合作導(dǎo)師徐威醫(yī)學(xué)院外科學(xué)常宏副教授秦成坤吳學(xué)君教授2014年5月1日目錄中文摘要1英文摘要3符號說明5資料與方法9結(jié)果19當(dāng)日木L7討論23結(jié)論29參考文獻(xiàn)30綜述34綜述參考文獻(xiàn)40致謝45發(fā)表文章46
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