簡介：點擊查看更多39482.文昌魚凝集素基因家族和其他補體相關(guān)的模式識別分子的克隆表達(dá)、進(jìn)化分析和功能研究精彩內(nèi)容。

簡介：獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得北京林業(yè)大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。簽名日期H13，IF乙，弋IJ‘I＼嘣寥關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解北京林業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學(xué)校可以公布論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存論文。保密的論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定簽名導(dǎo)師簽名日期弘眵L1№彳協(xié)摘要摘要水文過程及其對濕地功能影響的研究一直是濕地生態(tài)學(xué)研究的核心內(nèi)容之一，對于理解濕地生態(tài)過程、生態(tài)系統(tǒng)組分和生態(tài)系統(tǒng)服務(wù)具有重要意義。鄱陽湖是我國最重要的遷徙水鳥越冬地，至少有14種瀕危越冬水鳥在此越冬，并有27種以上的越冬水鳥超過其全球種群的1％，其中極危物種白鶴在此越冬的數(shù)量達(dá)到其全球種群數(shù)量的98％以上。三峽大壩的運行對下游河道及通江湖泊濕地生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生了重大影響，引起了國內(nèi)外各界的高度重視。關(guān)注的核心問題是水位變化對候鳥棲息地的影響。因此，正確認(rèn)識水位變化對濕地及越冬候鳥的影響，以及越冬候鳥對環(huán)境變化的響應(yīng)是鄱陽湖濕地保護迫切需要解決的關(guān)鍵科學(xué)問題。本文通過收集和整理19982013年鄱陽湖環(huán)湖鳥類調(diào)查數(shù)據(jù)，選擇鄱陽湖棲息地、植被和水鳥特征等參數(shù)，建立了鄱陽湖水位棲息地越冬水鳥關(guān)系的耦合模型；并通過20102013年間對越冬候鳥的野外觀察、對其食物資源的樣方調(diào)查與樣品分析、運用模型模擬分析等手段，揭示白鶴及其他越冬水鳥對鄱陽湖水位波動的響應(yīng)，得到了以下主要結(jié)果1不同的水位波動范圍，對不同的越冬水鳥棲息地及其食物資源有不同的影響。維持鄱陽湖水鳥棲息地的冬季水位下限為8288M吳淞高程，下同，夏季的最高水位不能高于174M。鄱陽湖越冬水鳥五個不同取食集團取食莖塊組、取食草組、取食種子組、取食無脊椎動物組和取食魚類組的最優(yōu)冬季水位下限分別為85M；83M；7284M；88M；84M，夏季最高水位分別為一；；176M；174M；174M，其巾最高水位對第一和第二集團沒有影響。鄱陽湖的旗艦物種白鶴的最優(yōu)水位在冬季為87一102M之間，夏季水位不能高于195M。影響五個取食集團水位的不同的原因并不一致。2以1983。2012年鄱陽湖國家級保護區(qū)白鶴越冬種群數(shù)據(jù)以及相對應(yīng)的環(huán)境數(shù)據(jù)，建立了鄱陽湖白鶴的空間狀態(tài)SSM模型，得出了全球白鶴東部種群近30年的種群增長率為408％，從19831984越冬季的840只到20112012年越冬季4315只，平均為2134827平均值士標(biāo)準(zhǔn)差只。3不利的水位會顯著降低自鶴食物資源苦草莖塊密度。2011年1月調(diào)查到蚌湖和大湖池苦草冬芽密度分別為124個／M2和017個／M2。2011年5月和2012年5月調(diào)查苦草幼苗和芽的平均密度分別為182士136個和386388個，兩年密度顯著不同∥0001。4本文首次報道了20102011年越冬季白鶴大規(guī)模上草洲覓食的現(xiàn)象。白鶴在鄱陽湖通常在淺水湖泊和泥灘中以苦草冬芽為主要食物。2010年冬，苦草冬芽資

簡介：歲拿未交碩士學(xué)位論文公平偏好下上市企業(yè)高管與其他員工薪酬差距激勵效果研究RESEARCHONTHEEFFECTSOFPAYGAPBETWEENEXECUTIVESANDOTHERSTAFFSINLISTEDENTERPRISESBASEDON1N●1N上IALRIIESS上，RELERENCE作者郭義導(dǎo)師袁倫渠北京交通大學(xué)2015年4月中圖分類號F24UDC33學(xué)校代碼10004密級公開北京交通大學(xué)碩士學(xué)位論文公平偏好下上市企業(yè)高管與其他員工薪酬差距激勵效果研究RESEARCHONTHEEFFECTSOFPAYGAPBETWEENEXECUTIVESANDOTHERSTAFFSINLISTEDENTERPRISESBASEDONFAIRNESSPREFERENCE作者姓名郭義導(dǎo)師姓名袁倫渠學(xué)位類別學(xué)術(shù)型學(xué)科專業(yè)勞動經(jīng)濟學(xué)學(xué)號12120584職稱教授學(xué)位級別碩士研究方向勞動經(jīng)濟理論與政策北京交通大學(xué)2015年4月

簡介：鹺北京大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明和使用授權(quán)說明原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不合任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品或成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。論文作者簽名學(xué)位論文使用授權(quán)說明必須裝訂在提交學(xué)校圖書館的印刷本本人完全了解北京大學(xué)關(guān)于收集、保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存學(xué)位論文的印刷本和電子版，并提供目錄檢索與閱覽服務(wù)，在校園網(wǎng)上提供服務(wù)；學(xué)?？梢圆捎糜坝?、縮印、數(shù)字化或其它復(fù)制手段保存論文；因某種特殊原因需要延遲發(fā)布學(xué)位論文電子版，授權(quán)學(xué)?？谝荒辏疘I兩年／M三年以后，在校園網(wǎng)上全文發(fā)布。保密論文在解密后遵守此規(guī)定論文作者答名翮導(dǎo)師簽名日期2夕／弓年厶月6日秘筠北京大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文在其他種族文化中的經(jīng)歷減少疼痛共情神經(jīng)反應(yīng)的種族偏差在其他種族文化中的經(jīng)歷減少疼痛共情神經(jīng)反應(yīng)的種族偏差作者左向宇專業(yè)基礎(chǔ)心理學(xué)指導(dǎo)教師韓世輝教授摘要最近的腦成像研究發(fā)現(xiàn)，疼痛共情的神經(jīng)反應(yīng)存在種族偏差，即相同種族模特接受疼痛刺激，相較于其他種族的模特，會增強觀者的疼痛網(wǎng)絡(luò)神經(jīng)活動。實驗發(fā)現(xiàn)對認(rèn)知策略和組內(nèi)關(guān)系的改變可劇烈減少共情的神經(jīng)反應(yīng)中的種族偏差。當(dāng)前的研究進(jìn)一步探究了實際生活中，與其他種族個體共同生活的文化經(jīng)歷是否會減少對他人共情神經(jīng)活動中的種族偏差。運用功能磁共振成像技術(shù)，我們掃描了20個華人被試，他們都在美國、英國和加拿大等以白人為主要組成人口的西方國家成長。掃描中被試會看到展示中國和白人模特受疼痛或非疼痛刺激的視頻片段。結(jié)果發(fā)現(xiàn)亞洲或白人模特受到疼痛刺激，相比于受到非疼痛刺激的條件更強地激活了包括前扣帶回、前部腦島和額下部皮層和軀體感覺皮層在內(nèi)的疼痛網(wǎng)絡(luò)。并且，被試對于中國和白人模特的共情神經(jīng)反應(yīng)活動沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異，且兩者在獨立選取的感興趣區(qū)域中，呈現(xiàn)正相關(guān)。結(jié)合之前的研究，該實驗結(jié)果提示我們，擁有和其他種族個體共同生活文化經(jīng)歷的被試，在看到異種族個體受痛苦時，共情神經(jīng)活動會增強，從而疼痛共情的種族偏差減小。這一結(jié)果為社會關(guān)系調(diào)節(jié)跨種族效應(yīng)提供了生理依據(jù)，并為增進(jìn)不同種族間的理解擴展了思路。關(guān)鍵詞共情，F(xiàn)MRI，種族偏差，扣帶回，腦島

簡介：分類號分類號密級密級UDC編號編號學(xué)位論文炎癥性腸病的衛(wèi)生假說及其他發(fā)病相關(guān)因素研究炎癥性腸病的衛(wèi)生假說及其他發(fā)病相關(guān)因素研究STUDYONHYGIENEHYPOTHESISOTHERRELATEDFACTSOFINFLAMMATYBOWELDISEASE員莎員莎指導(dǎo)教師姓名王巧民教授安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)（消化系?。┨峤徽撐娜掌?01503論文答辯日期學(xué)位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學(xué)答辯委員會主席評閱人2015年05月萬方數(shù)據(jù)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名日期學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國家主管部門或其指定機構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版，有權(quán)允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書館被查閱，有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。愿意將本人的學(xué)位論文提交中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫、中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫和中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫中全文發(fā)表，并可以以電子、網(wǎng)絡(luò)及其他數(shù)字媒體形式公開出版，并同意編入CNKI中國知識資源總庫，在中國博碩士學(xué)位論文評價數(shù)據(jù)庫中使用和在互聯(lián)網(wǎng)上傳播。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期日期萬方數(shù)據(jù)

簡介：廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動規(guī)范試行。另外，該學(xué)位論文為課題組的研究成果，獲得課題組經(jīng)費或?qū)嶒炇业馁Y助，在實驗室完成。請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒炇颐Q，未有此項聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。聲明人簽名B氏心EIIE瀘、葉年X月氓日CONTENTSCONTENTSCONTENTSILISTOFABBREVIATIONSIIILISTOFTABLESVLISTOFFIGURESVI摘要VIIABSTRACTVIIICHAPTER1INTRODUCTIONANDLITERATUREREVIEW111INTRODUCTION112LITERATUREREVIEW513GENERALLITERATUREONCLIMATECHANGEANDSEALEVELRISEADAPTATION514OBJECTIVESOFSTUDYANDMAINQUESTIONS9CHAPTER2METHODOLOGY11CHAPTER3STUDIESOFTHEIMPACTSOFSEALEVELRISE1631STUDIESONTHEECOLOGICALIMPACTSOFSEALEVELRISE1632OVERVIEWOFOTHERSTATES’EFFOIRTS2133FLORIDA2334BESTPRACTICES2435SUMMARY25CHAPTER4STATELEVELANDCOMMUNITYLEVELPROJECTS2641STATELEVELPROJECTSANDINITIATIVES2642OVERVIEWOFOTHERSTATES’EFFORTS194；BESTPRACTICES344COMMUNITYLEVELPROJECTSANDINITIATIVES3245OVERVIEWOFOTHERSTATES’EFFORTS3446FLORIDA；ZI47BESTPRACTICES3548SUMMARY；6

簡介：論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名論文評閱人L評閱入2評閱人3評閱人4評閱人5答辯委員會主席委員1委員2委員3委員4委員5獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得澎姿盤堂或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。秈黼始泐撕期抽弓年6月’日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解濫姿盤堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)迸姿盤鱟可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文作者簽名簽字日期勘侈年‘月Q目日學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向工作單位通訊地址簽字日期勿／年步月P電話郵編

簡介：點擊查看更多胺碘酮與其他延長QT間期藥物合用情況的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：通過谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（TG酶）催化豆腐糜之間形成交聯(lián)，以改善香腸結(jié)構(gòu)松散狀況，探討TG酶在豆腐腸中的反應(yīng)條件為了進(jìn)一步改善豆腐腸的質(zhì)構(gòu)特點，分別探討了食鹽、大豆油、水溶性膠體（木薯淀粉、K卡拉膠、明膠、酪蛋白酸鈉）添加量對產(chǎn)品質(zhì)構(gòu)特點的影響，其研究結(jié)果如下1豆腐腸的蒸煮損失率CL、溶脹率SR、平衡水分含量EWC、可凍結(jié)水分含量（WFRO）和不可凍結(jié)水分含量WNF隨著TGASE添加量的增大、反應(yīng)時間的延長而顯著降低，而其硬度則隨之顯著增大豆腐腸的SR、EWC、WFRO、WNF隨著反應(yīng)溫度的升高呈先降低后增大的趨勢，而其硬度呈先增大后降低的趨勢，因此TG酶的最佳添加量、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間分別為9UG大豆蛋白、50℃、20MIN。2食鹽、大豆油的添加顯著的改善了豆腐腸的質(zhì)構(gòu)特點。產(chǎn)品的CL、SR、EWC、WFRO、WNF隨著食鹽添加量的增多而顯著降低，而其硬度隨之顯著增大。3豆腐腸的CL、SR、EWC、WFRO、WNF隨著大豆油添加量的增多而顯著降低，而其硬度則隨之顯著增大。當(dāng)大豆油添加量高于6％時，產(chǎn)品的各質(zhì)構(gòu)參數(shù)基本保持恒定。4水溶性膠體（木薯淀粉、K卡拉膠、明膠、酪蛋白酸鈉）的添加顯著改善了豆腐腸的質(zhì)構(gòu)特點。產(chǎn)品的CL、SR、EWC、WFRO、WNF隨水溶性膠體添加量的增多而顯著降低，而其硬度則隨之顯著增大。

簡介：摘要目的研究兒童青少年肥胖、非酒精性脂肪肝病與其他代謝紊亂的關(guān)系并研究應(yīng)用二甲雙胍口服治療肥胖兒童非酒精脂肪肝病及其合并生活方式干預(yù)的效果。方法對20042009年因體型偏胖至浙江大學(xué)附屬兒童醫(yī)院內(nèi)分泌科就診的兒童青少年進(jìn)行問卷調(diào)查并按標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相關(guān)體格檢查及實驗室檢查并對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗。結(jié)果就診兒童青少年平均年齡1146±214歲脂肪肝患病率為6794％患病率隨著年齡的上升及性別的不同呈顯著差異將肥胖兒童青少年按照是否患脂肪肝分成2組患脂肪肝組兒童人體測量學(xué)指標(biāo)、血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、血尿酸、血脂水平、血糖水平、血清胰島素水平、頸總動脈內(nèi)膜厚度等均較未患脂肪肝組增高患脂肪肝組高血壓、肝功能異常、糖代謝異常疾病患病率也較未患脂肪肝組增高在隨訪過程中發(fā)現(xiàn)二甲雙胍聯(lián)合生活方式治療對NAFLD療效顯著。結(jié)論兒童青少年肥胖會引起一系列的代謝紊亂NAFLD在肥胖兒童中的患病率已達(dá)相當(dāng)高的比例對兒童青少年肥胖早期診斷并早期進(jìn)行生活方式干預(yù)必要時結(jié)合鹽酸二甲雙胍口服治療對減輕非酒精性脂肪肝病及肥胖相關(guān)代謝指標(biāo)有明顯效果。

簡介：目的微血管病變是糖尿病腦血管病并發(fā)癥的病變基礎(chǔ)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能和結(jié)構(gòu)的改變在糖尿病微血管病變的發(fā)生與發(fā)展中起著重要的作用。而血管通透性的增高是糖尿病微血管病變的一個標(biāo)志性事件是其發(fā)生的最初表現(xiàn)和導(dǎo)致其他后續(xù)改變的病理基礎(chǔ)。晚期糖基化終產(chǎn)物ADVANCEDGLYCATIONENDPRODUCTSAGES是一組在蛋白質(zhì)的氨基和糖的醛基之間非酶性糖基化反應(yīng)產(chǎn)物的總稱。在糖尿病微血管病的發(fā)生過程中AGES大量堆積是導(dǎo)致糖尿病內(nèi)皮細(xì)胞損傷的重要因為。本研究通過利用AGES刺激的小鼠利用免疫組織化學(xué)、免疫熒光、蛋白磷酸化檢測、激酶特異性抑制劑和通透性測定的方法在整體水平研究在AGES引起的腦血管通透性增高中血管內(nèi)皮細(xì)胞MOESIN蛋白及其磷酸化在其中的作用探討AGES引起MOESIN改變的上游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。對MOESIN在AGES介導(dǎo)的腦微循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞功能變化中作用的闡明將有助于探討AGES相關(guān)疾病特別是糖尿病性腦血管病以及糖尿病性腎病等其他的糖尿病并發(fā)的微血管病的發(fā)病機制為臨床防治提供理論依據(jù)。方法1AGEMSA的體外制備將小鼠血清白蛋白MSA、葡萄糖DGLUCOSE溶解在磷酸鹽緩沖液PBSPH7204MOLL中再加入青霉素和慶大霉素等。終濃度葡萄糖02MOLL、MSA35MGML、青霉素903UML、慶大霉素007MGML、PMSF50ΜMOLL、EDTA0001MOLL、疊氮鈉0001MOLL?；旌衔镉?2ΜM濾器過濾放置在37℃8周。以相同條件但不含葡萄糖的緩沖液孵育的鼠血清白蛋白作為對照。8周后將混合液用MILLIPE15ML超濾柱濃縮PIERCEENDOTOXINREMOVINGGEL去內(nèi)毒素MILLIPE022ΜM濾器除菌。用熒光分光光度法測定AGES含量。AGEMSA中含有AGES8050UMGPROTEIN而對照的天然小鼠血清白蛋白中只含有AGE079UMGPROTEIN。2小鼠的實驗分組及處理符合國家實驗動物標(biāo)準(zhǔn)的SPF級雌性C57BL6小鼠120只10～12周齡16～20G。1實驗小鼠分成四組對照組、AGEMSA組、P38MAPK抑制組和ROCK抑制組。2處理方法A對照組每天定時腹腔注射MSA10MGKG連續(xù)注射7天。BAGEMSA組每天定時腹腔注射AGEMSA10MGKG連續(xù)注射7天。CP38MAPK抑制組SB203580AGEMSA每天定時腹腔注射P38MAPK的抑制劑SB2035801MGKG半個小時之后注射AGEMSA10MGKG。連續(xù)注射7天。DROCK抑制組Y27632AGEMSA每天定時腹腔注射ROCK的抑制劑Y276325MGKG半個小時之后注射AGEMSA10MGKG。連續(xù)注射7天。3血腦屏障通透性的測定將各組C57BL6小鼠用133％氨基甲酸乙酯加05％氯醛醣065MLKG肌肉注射麻醉背位固定。從小鼠尾靜脈約10秒鐘內(nèi)注射3％伊文思藍(lán)45MGKG。注射后小鼠全身變藍(lán)從而確認(rèn)染料已經(jīng)吸收和分布。伊文思藍(lán)在小鼠體內(nèi)循環(huán)1小時后打開胸腔剪開右心耳通過左心室灌注生理鹽水灌注壓為110MMHG直到右心房流出的清亮液體。再通過左心室灌注預(yù)熱的用PH35005MOLL的檸檬酸緩沖液稀釋的1％多聚甲醛37℃2MIN。EB是一種四鈉重氮染料在體內(nèi)或體外均可以定量地與白蛋白結(jié)合。EB靜脈注射后與血漿白蛋白以101的比例緊密地結(jié)合在一起。灌注的目的是沖洗血管中含伊文思藍(lán)的血液清除血管內(nèi)的染料避免其影響實驗結(jié)果。PH值35有利于伊文思藍(lán)和白蛋白的結(jié)合溫暖到37℃可以防止血管收縮。而選用PH35005MOLL的檸檬酸緩沖液稀釋的1％多聚甲醛緩沖液灌洗是因其與白蛋白結(jié)合更加緊密更能徹底清除血管內(nèi)殘留的EB。本實驗通過勻漿法和冰凍切片兩種方法從定量和定性兩方面進(jìn)行觀察血腦屏障通透性的變化。勻漿法與冰凍切片的腦組織取材來自于同一小鼠大腦的前后兩個部位。勻漿法灌注后取出大腦稱量一半腦組織獲得濕重。將腦組織置于50％的三氯乙酸TRICHLOACETICACIDTCA2ML中勻漿。勻漿液在4℃下15000RMIN離心20MIN后提取上清液離心的目的是沉淀蛋白質(zhì)以免影響光密度值的測定。以無水乙醇13稀釋上清液后在熒光分光光度計620NM下測定熒光值。通過外標(biāo)準(zhǔn)法計算每份樣品的EB濃度校零標(biāo)準(zhǔn)品為50％三氯乙酸按13加入無水乙醇。使用校零標(biāo)準(zhǔn)品配置不同濃度EB標(biāo)準(zhǔn)樣品3125NGML～2000NGML并作標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果呈線性關(guān)系。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算樣品濃度定量每份腦組織抽提液的EB量。再與組織的質(zhì)量相比得到每克腦組織的EB含量。冰凍切片灌注后取一半大腦快速進(jìn)行冠狀冰凍切片8ΜM隔4取1。避光晾干用50％甘油PBS封片。顯微鏡藍(lán)色激發(fā)光下觀察并拍片。4WESTERNBLOT檢測腦血管內(nèi)皮細(xì)胞MOESIN及其磷酸化水平將小鼠麻醉后作打開顱腔取腦冰上去除軟腦膜和白質(zhì)。將剩余腦組織放入含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑的裂解液中用組織勻漿機冰上勻漿共10MIN分三次每次間隔1分鐘。然后冰上靜置裂解60MIN離心取上清采用BRADFD法測定蛋白濃度。蛋白變性后采用TRIS甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳和免疫印跡法獲得印跡膜將用二抗結(jié)合后的印跡膜放入TBST中漂洗35MIN后濾紙小心吸干膜上液體在膜上加適量配制好的ECL發(fā)光底物AMERSHAM美國使其于印跡膜充分作用接觸吸去多余液體于柯達(dá)2000工作站曝光顯影保存。5免疫組化分析各器官組織血管內(nèi)皮細(xì)胞MOESIN及其磷酸化水平將小鼠各器官組織取出經(jīng)固定后石蠟包埋、切片、脫蠟水化、抗原修復(fù)后采用兩步法檢測各器官組織血管內(nèi)皮細(xì)胞MOESIN蛋白及其磷酸化的水平在400倍光鏡下觀察并拍片。利用LEACAQ500MC軟件獲取灰度值并進(jìn)行統(tǒng)計。6免疫熒光分析腦血管內(nèi)皮細(xì)胞MOESIN及其磷酸化水平將小鼠各器官組織取出經(jīng)固定后石蠟包埋、切片、脫蠟水化、抗原修復(fù)后用熒光二抗進(jìn)行孵育檢測各器官組織血管內(nèi)皮細(xì)胞MOESIN蛋白及其磷酸化的水平在1000倍油鏡下觀察、拍片。利用LEACAQ500MC軟件獲取灰度值并進(jìn)行統(tǒng)計。結(jié)論1AGES可引起腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞MOESIN的磷酸化導(dǎo)致腦微血管通透性增加表明糖尿病腦微血管病變中AGES可能起著重要作用。2P38MAPK和ROCK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與了AGES介導(dǎo)的MOESIN的磷酸化。通過抑制P38MAPK和ROCK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可以防止小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞骨架蛋白MOESIN的磷酸化降低腦微血管通透性的增加。3AGES刺激可以導(dǎo)致肝、腎和心等臟器血管內(nèi)皮細(xì)胞MOESIN的磷酸化而P38MAPK和ROCK的激活介導(dǎo)了MOESIN的磷酸化。

簡介：鏈霉菌能夠產(chǎn)生結(jié)構(gòu)豐富、活性多樣的次級代謝產(chǎn)物，是創(chuàng)新微生物藥物的重要來源，因此對鏈霉菌次級代謝產(chǎn)物進(jìn)行挖掘和探索對于創(chuàng)新微生物藥物研究非常重要。本論文共分為兩個部分，其中第一部分為基于細(xì)胞色素P450催化機制從STREPTOMYCESHYGROSCOPICUS17997中發(fā)現(xiàn)和鑒定格爾德霉素新組分，第二部分為鏈霉菌CPCC203471和CPCC200466產(chǎn)生的抗生素新組分的發(fā)現(xiàn)和探索。格爾德霉素GELDANAMYCIN，GDM是由吸水鏈霉菌產(chǎn)生的苯醌型安莎類抗生素，為熱休克蛋白HSP90的特異性抑制劑，它的抗腫瘤細(xì)胞活性IC5O在亞微摩爾級。但GDM的肝毒性強、水溶性差，只能作為抗腫瘤藥物開發(fā)的先導(dǎo)化合物。目前已報道數(shù)百個GDM的有機半合成衍生物，其中多種衍生物具有較好的體內(nèi)活性，例如17烯丙氨基17去甲氧基格爾德霉素（17AAG）已針對多種腫瘤進(jìn)入了Ⅱ期臨床試驗階段。此外，許多天然GDM類似物不斷從GDM產(chǎn)生菌中被發(fā)現(xiàn)和分離出來，它們中某些化合物的水溶性和抗腫瘤細(xì)胞活性優(yōu)于GDM，預(yù)示著天然GDM類似物也有成為潛在的抗腫瘤藥物可能。GDM的生物合成分為前格爾德霉素形成和PKS后修飾兩部分。在PKS后修飾過程中有一個從碳碳單鍵到雙鍵的氧化脫氫（去飽和）步驟，催化這步反應(yīng)的酶GDMP屬于細(xì)胞色素P450超家族。細(xì)胞色素P450在生物體內(nèi)主要催化羥基化反應(yīng)，僅在極少數(shù)情況下催化去飽和反應(yīng)，因此這步催化反應(yīng)引起了我們的興趣在催化去飽和反應(yīng)時是否也有羥基化產(chǎn)物出現(xiàn)依據(jù)文獻(xiàn)對細(xì)胞色素P450催化機制的一般性分析總結(jié)，以及我們對GDMP初步的生物信息學(xué)分析結(jié)果，推測在GDMP催化的C45位去飽和反應(yīng)過程中也有可能出現(xiàn)羥基化產(chǎn)物。因此，發(fā)現(xiàn)該羥基化GDM類似物對于深入理解GDM生物合成具有重要作用，同時，對其抗腫瘤細(xì)胞活性進(jìn)行測定對于獲得具有開發(fā)前景的GDM衍生物具有實際意義。吸水鏈霉菌17997（STREPTOMYCESHYGROSCOPICUS17997）是中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所分離鑒定的一株GDM產(chǎn)生菌。根據(jù)上面的推測，我們通過TLC和LCMSMS等方法對吸水鏈霉菌17997的次級代謝產(chǎn)物進(jìn)行了系統(tǒng)分析，發(fā)現(xiàn)了兩個預(yù)期的GDM新組分化合物1和2。經(jīng)分離純化后，采用HRESIMS、IR、NMR及MOSHER法等確定化合物1和2為一對差向異構(gòu)體，化學(xué)結(jié)構(gòu)分別為4S4，5雙氫4羥基格爾德霉素1和4R4，5雙氫4羥基格爾德霉素2?；衔?和2不能生物轉(zhuǎn)化為GDM，因此它們不是GDM生物合成中的正常中間產(chǎn)物，而是GDMP催化出現(xiàn)的支路產(chǎn)物?；衔?和2的發(fā)現(xiàn)使得我們對GDMP在GDM生物合成中催化C4，5位氧化脫氫的機制有了更加深入的認(rèn)識。體外抗腫瘤細(xì)胞毒性測定表明與GDM相比，4SR4，5雙氫4羥基格爾德霉素的HEPG2腫瘤細(xì)胞毒性降低約30倍。說明C4位羥基化對GDM的活性有不利影響。本論文第二部分對鏈霉菌CPCC203471和CPCC200466進(jìn)行了抗菌活性產(chǎn)物鑒定及抗生素新組分發(fā)現(xiàn)探索。鏈霉菌CPCC203471和CPCC200466是經(jīng)過對20余株不同來源的鏈霉菌進(jìn)行次級代謝產(chǎn)物產(chǎn)生情況和活性情況初篩后選定的。這兩株菌次級代謝產(chǎn)物較為豐富且活性較好，值得進(jìn)一步研究。CPCC203471是從滇西森林土壤中分離得到的一株鏈霉菌，通過TLC、LCMS以及HRMS等方法對其脂溶性次級代謝產(chǎn)物進(jìn)行了分析，獲得其中的化合物的紫外可見光吸收光譜、分子量和分子式等信息后，檢索天然產(chǎn)物化合物庫及SCIFINDER數(shù)據(jù)庫并查閱文獻(xiàn)，對化合物進(jìn)行排重，首先確定了CPCC203471產(chǎn)生的主要抗菌活性化合物為新生霉素NOVOBIOCIN。隨后，從CPCC203471的脂溶性次級代謝產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)了6個新生霉素結(jié)構(gòu)類似物，其分子量分別為555B、642D，NOV642、555E、569F、569G、598I。根據(jù)分子量信息，推測化合物B為4O去甲基3O去氨甲酰基新生霉素（4ODESMETHYL3ODESCARBAMOYLNOVOBIOCIN）化合物F、G為同分異構(gòu)體，其中一個可能為3O去氨甲酰基新生霉素3ODESCARBAMOYLNOVOBIOCIN，另一個推測為天然的新生霉素新組分，由于產(chǎn)量較低留待后續(xù)研究化合物I為4O去甲基新生霉素4ODESMETHYLNOVOBIOCIN化合物DNOV642為新生霉素新組分。經(jīng)分離純化和NMR結(jié)構(gòu)解析，確定NOV642為5甲氧基新生霉素。我們對NOV642和新生霉素的抗菌活性MIC進(jìn)行了測定和對比，發(fā)現(xiàn)NOV642比新生霉素的活性約降低了37倍。結(jié)合文獻(xiàn)報道，5羥基新生霉素比新生霉素活性降低約40倍，這給新生霉素類似物構(gòu)效關(guān)系提供了新內(nèi)容新生霉素C5位的取代會降低化合物活性，取代基團的極性越大活性降低越多。已知新生霉素主要作用于革蘭氏陽性細(xì)菌，曾用于耐藥性金黃色葡萄球菌引起的感染，同時新生霉素作為HSP90C端抑制劑，還對多種癌細(xì)胞顯示抑制作用，并能與抗癌藥聯(lián)用、逆轉(zhuǎn)抗癌藥的耐藥性。因此，還需要對NOV642進(jìn)行更多的生物活性測定與評價，以確定其是否具有藥物開發(fā)潛力。此外，從CPCC203471的次級代謝產(chǎn)物中我們還發(fā)現(xiàn)了大環(huán)內(nèi)酰胺類化合物BE14106C，文獻(xiàn)報道該化合物具有腫瘤細(xì)胞毒性。CPCC200466是一株具有抗真菌活性的鏈霉菌。同樣通過TLC、LCMS以及HRMS等方法對該菌株的部分脂溶性次級代謝產(chǎn)物進(jìn)行了分析鑒定，得到了化合物的紫外可見光吸收光譜數(shù)據(jù)和分子量、分子式等信息，通過檢索SCIFINDER數(shù)據(jù)庫等并查閱文獻(xiàn)，對化合物進(jìn)行排重，確定CPCC200466的主要次級代謝產(chǎn)物為噁唑霉素（OXAZOLOMYCIN，OZM，化合物4），同時發(fā)現(xiàn)了與噁唑霉素分子量655相同的5個噁唑霉素小組分（化合物3、5、6、7、8），而目前文獻(xiàn)報道的分子量為655的噁唑霉素類化合物共3個，分別為噁唑霉素A4Z，6Z，8，E、B4E，6E，8E和C4Z，6E，8，E，三者互為幾何異構(gòu)體。由此推斷，CPCC200466中含有至少3個噁唑霉素新組分有待確證。噁唑霉素結(jié)構(gòu)新穎，含有Γ內(nèi)酰胺螺Β內(nèi)酯環(huán)，噁唑環(huán)，E，E二烯和一個Z，Z，E三烯鏈，其中的Γ內(nèi)酰胺螺Β內(nèi)酯環(huán)與處于臨床試驗階段的抗腫瘤藥物SALINOSPAEA（20S蛋白酶抑制劑）的藥效團相似。噁唑霉素具有抗菌、抗病毒和抗腫瘤活性，具有較好的應(yīng)用前景和開發(fā)價值。因此，有必要對發(fā)現(xiàn)的噁唑霉素新組分進(jìn)行分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定。我們通過TLC和HPLC等方法對5個噁唑霉素小組分（主要為化合物5）進(jìn)行了分離純化探索。由于它們屬于同分異構(gòu)體，結(jié)構(gòu)非常相似，分離純化非常困難，有待于進(jìn)一步研究。

簡介：浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院博士學(xué)位論文粘附素及其他致病相關(guān)因子在中間普氏菌與人上皮細(xì)胞互作中的作用研究姓名何佳燕申請學(xué)位級別博士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師周雪平JANINALEWIS20100601浙江大學(xué)博士學(xué)位論文摘要ELISA結(jié)果表明P10137編碼的蛋白特異結(jié)合凝集素。這些研究表明QRT．PCR列陣是一種快速有效篩選互作基因的方法。通過研究中間普氏茵生長在分泌有細(xì)胞因子的上皮細(xì)胞條件培養(yǎng)液中的蛋白和基因表達(dá)水平來分析中間普氏菌在宿主體內(nèi)環(huán)境中的生長情況。準(zhǔn)備了三種中間普氏菌生長的培養(yǎng)液分別為上皮細(xì)胞HN4和HELA細(xì)胞培養(yǎng)了24H后收集的細(xì)胞條件培養(yǎng)液，以及常規(guī)培養(yǎng)HN4和HELA的細(xì)胞培養(yǎng)基，并應(yīng)用二維凝膠電泳2．DE結(jié)合液相色譜．串聯(lián)質(zhì)譜LC．MS／MS技術(shù)分析中間普氏菌在這三種不同培養(yǎng)液中的蛋白表達(dá)水平。中間普氏菌全蛋白以及外膜蛋白在三種不同培養(yǎng)液下的2DE圖譜總體上比較相似，有一些蛋白在HN4和HELA條件培養(yǎng)液中發(fā)生了顯著的變化。用質(zhì)譜分析了40個差異表達(dá)的蛋白點，從中鑒定了15個中間普氏菌外膜蛋白。其中P10932編碼的血紅素結(jié)合蛋白、P11599和P10779編碼的具有TPR結(jié)構(gòu)域的蛋白的表達(dá)水平在具有HN4和HELA細(xì)胞分泌因子的條件培養(yǎng)液中明顯上升。這些結(jié)果表明中間普氏菌在適應(yīng)宿主細(xì)胞內(nèi)環(huán)境過程中其整體的蛋白表達(dá)水平發(fā)生了變化，那些受細(xì)胞分泌因子影響而表達(dá)明顯發(fā)生變化的蛋白可能對中間普氏菌在宿主環(huán)境內(nèi)生存起了重要作用。關(guān)鍵詞中間普氏菌／牙周病／宿主細(xì)胞／致病機理／粘附素／外膜蛋白／基因表達(dá)／蛋白表達(dá)

簡介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文幼年肥胖大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞及其他代謝異常與炎癥因子的關(guān)系姓名趙敏申請學(xué)位級別碩士專業(yè)兒科學(xué)指導(dǎo)教師萬燕萍20090401上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文VELISAENZYMELINKEDIMMUNOSBNENTASSAY法測定相關(guān)細(xì)胞因子。研究結(jié)果研究結(jié)果高脂飼料喂養(yǎng)12周后，DIO組的各項體格指標(biāo)（體重、體脂含量、LEE’S指數(shù)）、空腹血糖、胰島素、甘油三酯、細(xì)胞因子高于對照組（P005或P001），高密度脂蛋白與NO低于對照組（P001），總膽固醇和低密度脂蛋白無顯著性差異。肝臟病理學(xué)改變?yōu)橹靖?，血管無明顯的病理學(xué)變化。肥胖大鼠存在糖脂代謝紊亂，脂肪細(xì)胞分泌的CRP、IL6炎癥因子與糖脂代謝指標(biāo)有相關(guān)性（P005或P001），炎癥因子在肥胖發(fā)病過程中起重要作用。結(jié)論結(jié)論1高脂飲食誘導(dǎo)幼年大鼠肥胖，肥胖組大鼠出現(xiàn)糖脂代謝紊亂、脂肪肝等。2肥胖組NO分泌量減少，且肥胖組炎癥因子高于對照組，血管無明顯病理學(xué)變化。3炎癥因子可能是導(dǎo)致肥胖大鼠代謝異常的機制之一。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞肥胖，幼年大鼠，血管，內(nèi)皮細(xì)胞功能，炎癥因子

簡介：Y99523GPJ，L大學(xué)．世巡早產(chǎn)兒銅及其他營養(yǎng)影響因素研究EFFECTSOFCOPPERANDOTHERNUTRITIONALFACTORSONTHEDEVELOPMENTOFPREMATURENEONATES博士研究生李鳴研究方向營養(yǎng)與疾病導(dǎo)師指導(dǎo)小組黃承鈺到轉(zhuǎn)會楊元曾果教授教授主任技師副教授本課題由國際銅業(yè)協(xié)會ICA基金資助NO．AS0301聲明尸明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川大學(xué)或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本學(xué)位論文成果是本人在四川大學(xué)讀書期間在導(dǎo)師指導(dǎo)下取得的，論文成果歸四川大學(xué)所有，特此聲明。申請人麓錫指導(dǎo)教師{7；C}鼉．