水稻類(lèi)病斑突變體spl31的遺傳分析與基因定位.pdf

1、縉恢10號(hào)是由西南大學(xué)水稻研究所選育的優(yōu)良三系雜交水稻恢復(fù)系，對(duì)其進(jìn)行甲基磺酸乙酯(ethylmethanesulphonate，EMS)誘變處理，從其后代中鑒定出一個(gè)類(lèi)病斑突變體spl31。該突變體三葉期以前表型正常，四葉期后葉片陸續(xù)出現(xiàn)黃色斑點(diǎn)，隨著植株的生長(zhǎng)，面積逐漸擴(kuò)大成邊緣黃褐色的病斑，至成熟時(shí)病斑相互連接成片，導(dǎo)致葉片壞死。本研究以野生型縉恢10號(hào)為對(duì)照，對(duì)突變體spl31開(kāi)展了組織化學(xué)、遺傳分析、農(nóng)藝性狀、葉片凈光合速率和

2、葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)及葉綠體超微結(jié)構(gòu)的透射電鏡觀察等研究，并對(duì)目的基因SPL31進(jìn)行了初步定位、精細(xì)定位。研究結(jié)果為豐富類(lèi)病斑突變基因和解析類(lèi)病斑突變體分子機(jī)制研究奠定了基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:
　　 1.spl31突變體的形態(tài)性狀
　　 突變體三葉期以前表型正常，四葉期后葉片陸續(xù)出現(xiàn)黃色斑點(diǎn)，先生葉與后生葉斑點(diǎn)相比出現(xiàn)時(shí)間晚、斑點(diǎn)數(shù)量少、面積小，隨著植株的牛長(zhǎng)，面積逐漸擴(kuò)大成邊緣黃褐色的病斑，至成熟時(shí)病斑相互連接成片，導(dǎo)致葉片

3、壞死。
　　 2.spl31組織化學(xué)分析
　　 經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色后，突變植株葉片斑點(diǎn)部位呈現(xiàn)離散型深藍(lán)色斑點(diǎn)，正常植株葉片與突變植株正常葉部位沒(méi)有被染色。
　　 3.spl31突變體農(nóng)藝性狀
　　 通過(guò)對(duì)spl31類(lèi)病斑突變體的株高、每穗粒數(shù)、每穗實(shí)粒數(shù)、千粒重和結(jié)實(shí)率等方面與野生型植株進(jìn)行了分析比較，株高、每穗粒數(shù)差異不顯著，而千粒重減少了1.1g，每穗實(shí)粒數(shù)降低了21.9％，結(jié)實(shí)率降低了9.86％。

4、>　　 4.spl31葉綠體的細(xì)胞學(xué)分析
　　 在電子顯微鏡下對(duì)spl31突變體幼苗斑點(diǎn)部分進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)突變體植株葉綠體整體形態(tài)沒(méi)有發(fā)生變化，突變體基粒片層堆疊不規(guī)則，片層不同程度的粘連在一起。這一結(jié)果可能會(huì)影響到農(nóng)藝性狀的變化。
　　 5.spl31突變體葉片凈光合速率和葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)參數(shù)
　　 突變體spl31的凈光合速率、氣孔導(dǎo)度、蒸騰速率與野生型相比有所升高，但均未達(dá)到顯著水平，突變體葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力

5、學(xué)參數(shù)與野生型相比有差異，但也均未達(dá)到顯著水平，說(shuō)明該突變對(duì)PSⅡ無(wú)顯著影響。
　　 6.SPL31基因的遺傳分析
　　 以日本晴為母本與類(lèi)病斑突變體spl31雜交構(gòu)建F1群體，F(xiàn)1植株葉片表現(xiàn)正常，F(xiàn)2群體表現(xiàn)正常株與突變株的分離，且符合3∶1分離比(x2=1.005＜3.84(x2(0.05，1)))，表明該性狀由一對(duì)單隱性核基因控制。
　　 7.SPL31基因的分子定位
　　 利用均勻分布于水稻12