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1、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文被子植物基部類群三白草和細(xì)辛開(kāi)花相關(guān)基因的克隆,功能與進(jìn)化的研究姓名:趙銀河申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):遺傳學(xué)指導(dǎo)教師:王國(guó)英李德銖20061101AbstractFloweristhemostimportantorganinthegrowthanddevelopmentofplantsFromanevolutionarystandpointithaslongbeenapredominantsoureeofchara
2、cters衙∞酉0spcmtaxonomyBasalan舀偽p啪nsa他veryimportantfor咖dyingtheorigindiversificationandevolutionofangiospermsSaunvuschinensis(Saururaeeae)andAsarumcaudigeman(Aristotochiaeeae)areanimportantspeciesofpaleoberbinrelationtound
3、erstandtheoriginandevolutionofangiospermflowersduetoitsbasalpositionintheangiospermsAsthememberofpiperalestheflowerof&ehinemisisverysimplewhichbearhaetswithoutperiantlnandevenwthoutpetalprmordiaduringfloralontoganesisWhi
4、leAsarumcaudigerum(Aristoloehiaceae)whichhasonlyol埒whorlofperianthanditsfloralformisverysimilartothebasalmostangiospermAmborellaThesubtractedfloraleDNAlibrarieswereconstructedfromfloralbudsandinflorescenceatdifferemtstag
5、esusingsuppressionsubtractivehybridization(SSH)TheI斌temofgeneexpressprofileoffloralrelatedgenesisolatedfromAcaudigerumwitharrayandfurtherconfirmedbyrealtimePCRandobservedwithScanningelectronmicroscope(SEM)aswellBasedonth
6、eESTsequeaecofDV038650,twogenespeeificprimersweredesignedandusedforrapidamplificationofeDNAands(RACE)procedureTofurtheridentifythefunctionofputativeMADSbextranscriptionfactorsphylogenetietreeswerereconstructedinordertoin
7、ferevolutionaryrelationshipswithintheMADSboxgenefamilyintheforwardsubtractedfloralcDNAlibraryof彳caudigerum2320cloneswererandomlysequencedfromwhich612uniqueexpressedsequencetagsmSTs)wereobtainedand154floralrelatedgenesupr
8、egulatedwerefoundusingarrayintheupmostleavesperianthstamensandcarpetrespectivelyAfulllengthputativeMADSboxgenewasobtainedandclonedusingRACEWhileintheforwardsubtractedfloralcDNAlibraryof&chinensis548clonesweierandomlysequ
9、encedandatotalof432uniqueexpressedsequencetags(ESTs)wereobtainedThe4PETALd3(AP3)likeofBclassgeueisolatedfromzeaudigerumwereupregulatedintheperianthstamalsandcarpelfromthepatternofgeneexpressprofileoffloralrelatedgenes,an
10、dfurtherconfirmedbyrealtimePCRandScauningelectronmicroscope(SEM)ThisimpliedthatagradualshiftinexpressionofBelassgenesmaybeaglos$thefloralparts,andsuggestedthattheABCmodelmaynothavebecomefixedintheearlystageoftheangiosper
11、mevolutionandmaybemodifiedorsupplementedinthebasalangiospermPhylogeueticanalysisindicatedthattheMADSboxtranscriptionfactorsisolatedfrom一caudigerum。andthreeoutof12MADSboxtranscriptionfactorsfrom&chinensisweremembersofAPET
12、4LA3(AP3》subfamily,whichformedaclusterwithMADSboxgenesisolatedfromAmborellathebasal—mostangiosperm。andthosefromthegymnospermsandwassisterrelationshipbetween&chinensisandAcaudigerumOurresultssuggestthattheoriginofSchinens
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