水稻開花相關(guān)基因CDK系列基因的克隆.pdf

1、隨著水稻基因組測(cè)序的逐漸完成，基因庫(kù)的不斷完善，水稻也成為了研究單子葉植物和禾本科的模式生物。近年來(lái)，許多與抗旱性，花期，育性等農(nóng)藝性狀相關(guān)的重要基因被成功克隆。水稻的花期，也稱抽穗期，是營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)過(guò)渡的重要階段。所以對(duì)調(diào)控水稻開花相關(guān)基因的克隆，對(duì)研究水稻花期有著深遠(yuǎn)的意義，有助于完善整個(gè)調(diào)控開花基因的體系，同時(shí)，對(duì)育種工作也有著遺傳學(xué)的指導(dǎo)作用。
　　 本文通過(guò)過(guò)量表達(dá)技術(shù)(OverExpression)和RNA干擾

2、技術(shù)(RNAi)對(duì)水稻開花相關(guān)基因CDK1，CDK2，CDK3，CDK4，CDK5進(jìn)行克隆。首先，用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增出cDNA基因序列，然后設(shè)計(jì)OE引物和RNAi引物以DNA為模板運(yùn)用PCR技術(shù)分別將CDK1，CDK2，CDK3，CDK4，CDK5基因的全長(zhǎng)片段和干擾片段擴(kuò)增出來(lái)，通過(guò)亞克隆技術(shù)將OE片段連接到構(gòu)建好的pCAMBIA1300-NOS-35S表達(dá)載體中，將干擾片段連接到pCAMBIA1300中，最終得到了10個(gè)構(gòu)建完成