固定化葡萄糖氧化酶生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的研究.pdf

1、本論文利用酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉，研究內(nèi)容包括葡萄糖氧化酶提取條件的確定、固定化葡萄糖氧化酶的制備、固定化酶性質(zhì)的研究、固定化酶生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的工藝條件研究。
　　 本文以產(chǎn)葡萄糖酸鈉黑曲霉廢菌絲為原料提取葡萄糖氧化酶。由于葡萄糖氧化酶是胞內(nèi)酶，需要先將菌絲破壁，使其中的葡萄糖氧化酶釋放出來，而且要采取措施保證酶的活力損失最小。獲得的粗酶液，再經(jīng)過初步純化，即可制成酶制劑。確定了破壁的方法為超聲破壁，超聲破壁的最優(yōu)條件為：超聲時(shí)間5

2、0min，超聲溫度60℃，超聲功率200W。破壁后選取70％乙醇一次沉淀葡萄糖氧化酶，然后用16％的PEG二次沉淀酶。
　　 本研究首先對三種固定化載體的固定化效果進(jìn)行考察，通過比較三種固定化酶的制作難易程度、酶活回收率，最終選取了羥基磷灰石作為載體。確定了最佳固定化最優(yōu)條件為：給酶量為0.07g/mL，溫度為30℃，pH6.5，固定時(shí)間15h。
　　 利用新型納米材料羥基磷灰石固定化葡萄糖氧化酶，研究了固定化酶的酶學(xué)性

3、質(zhì)。研究了溫度、pH、金屬離子、儲(chǔ)存時(shí)間對游離酶和固定化酶活力的影響。固定化酶的最適反應(yīng)溫度40℃，最適pH值為6.5，較游離酶分別提高了4℃和0.9。固定化酶的平均酶活回收率為61.85％。此外，固定化后的酶儲(chǔ)存穩(wěn)定性有所提高，可重復(fù)使用七次，酶剩余活力仍在62.1％。
　　 本文對底物濃度、溫度、pH、通氣量與反應(yīng)時(shí)間等因素對酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉工藝進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明：底物濃度對糖酸物質(zhì)的量轉(zhuǎn)化率影響不顯著，最適溫度40℃，