石斛合劑調(diào)控衰老糖尿病大鼠GLP-1改善糖脂代謝機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　觀察石斛合劑(DC)對(duì)衰老糖尿病大鼠GLP-1水平、糖脂代謝的影響，揭示石斛合劑調(diào)節(jié)糖脂代謝的作用機(jī)制，為臨床治療糖尿病奠定實(shí)驗(yàn)理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　SPF級(jí)SD雌性大鼠90只，體重200±20g，隨機(jī)分為兩組，分別為：正常組、造模組，正常組給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，造模組給予高脂高糖飼料，喂養(yǎng)一年。正常組腹腔注射生理鹽水，造模組腹腔注射STZ(20mg/kg)2次，篩選空腹血糖≥16 mmol/L者為成模組

2、，隨機(jī)分為正常組、模型組、對(duì)照組(二甲雙胍組)、石斛合劑低劑量組與高劑量組。在給藥24天后各組予處死，進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)：(1)小腸、胰腺組織HE染色，光鏡觀察病理變化；(2)血生化測(cè)定血糖(glucose GLU)、血清甘油三酯(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、低密度脂蛋白(low densitylipoprotein，LDL)、膽固醇(cholesterol

3、，CHOL)、糖化血清蛋白(glycated serumprotein GSP)、(3)ELISA檢測(cè)0.5、2.5小時(shí)血清GLP-1(glucagons-like peptide1，GLP-1)：(4)放射免疫測(cè)定血清胰島素(insulin Ins)、胰高血糖素(glucagon，Glu)；(5)免疫組化法檢測(cè)小腸胰高血糖素樣多肽-1；胰腺葡萄糖激酶(glucorinase，Gck)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2(glucose transpo

4、rter2，Glut-2)、胰島素；(6)Agilent大鼠全基因組表達(dá)譜芯片檢測(cè)肝臟組織。所有數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析。
　　結(jié)果：
　　1該模型大鼠已喂養(yǎng)超12月齡，屬于衰老大鼠。
　　2血生化檢測(cè)顯示：(1)通過單純高脂高糖飼料飼養(yǎng)1年，造模組血糖和CHOL與正常組無(wú)差異，p>0.05；(2)治療后：石斛合劑低劑量組、高劑量血糖水平顯著低于模型組，p<0.01；(3)低劑量組GSP水平低于模型組，p

5、<0.05，高劑量組GSP水平顯著低于模型組，p<0.01；(4)石斛合劑高、低劑量組CHOL顯著低于模型組，p<0.01。
　　3低劑量組0.5小時(shí)與2.5小時(shí)GLP-1的差值低于模型組，p<0.05；高劑量組0.5小時(shí)與2.5小時(shí)GLP-1的差值顯著高于模型組，p<0.01。
　　4放射免疫法檢測(cè)顯示：(1)模型組胰高血糖素顯著高于正常組，p<0.01；石斛合劑高、低劑量組胰高血糖素顯著低于模型組，p<0.01。(2)模

6、型組胰島素水平顯著低于正常組，p<0.01，對(duì)照組、低劑量組與高劑量組胰島素水平均無(wú)顯著性差異，p>0.05。
　　5病理學(xué)觀察：與正常組相比，模型組大鼠胰島數(shù)量明顯減少，且胰島細(xì)胞出現(xiàn)萎縮、變性，石斛合劑高、低劑量組胰島組織內(nèi)空泡大大少于模型組，胞漿嗜堿性物質(zhì)增加。
　　6免疫組化檢測(cè)顯示：石斛合劑高、低劑量組GCK陽(yáng)性面積及積分光密度(integraloptical density IOD)顯著高于模型組，p<0.01；

7、高劑量組GLUT-2陽(yáng)性面積顯著高于模型組，p<0.01，低劑量組GLUT-2陽(yáng)性面積高于模型組，p<0.05，石斛合劑高、低劑量IOD組顯著高于模型組，p<0.01。
　　7 Agilent大鼠肝組織全基因組表達(dá)譜芯片檢測(cè)顯示：模型組與正常組的差異表達(dá)基因1678個(gè)，P<0.05；低劑量組與模型組的差異表達(dá)基因1107個(gè)，P<0.05：低劑量組VS正常組差異基因共665個(gè)，P<0.05。聚類分析顯示低劑量組更接近正常組。