米諾環(huán)素改善放射性認(rèn)知功能損害及其相關(guān)機(jī)制的初步實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:作為頭頸部腫瘤的重要治療手段,放射治療在有效緩解病情的同時(shí)可以造成周圍正常腦組織的損傷,引起嚴(yán)重認(rèn)知功能損害從而降低患者的生活質(zhì)量,目前已針對(duì)其防治措施開展廣泛研究。米諾環(huán)素——四環(huán)類抗生素衍生物,已證實(shí)在一系列中樞神經(jīng)變性疾病中發(fā)揮了神經(jīng)保護(hù)作用。因此本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察米諾環(huán)素能否改善全腦照射引起的認(rèn)知功能損害及海馬神經(jīng)元損傷,探索該藥物是否在放射性認(rèn)知功能損害的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有一定的神經(jīng)保護(hù)作用。
　　方法:將118只1月

2、齡雄性Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、米諾環(huán)素組、麻醉對(duì)照組、麻醉聯(lián)合藥物組、照射組、照射聯(lián)合藥物組。三組給藥組于照前1天灌胃米諾環(huán)素90 mg/kg·d,照后維持45 mg/kg·d。經(jīng)3.6％水合氯醛麻醉后,照射組與照射聯(lián)藥組大鼠行單次20 Gy全腦照射。其中22只大鼠于照后3-12 h進(jìn)行NeuN/Casp-3和DCX/Casp-3免疫熒光染色,觀察米諾環(huán)素對(duì)20 Gy全腦照射后依賴Caspase-3的海馬神經(jīng)

3、元凋亡通路的影響。照后1月予18只大鼠 BrdU標(biāo)記(50 mg/kg·d,6天),與所有剩余大鼠(共96只)在照后2個(gè)月行開放場(chǎng)、Morris水迷宮兩項(xiàng)動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn),觀察藥物對(duì)20 Gy全腦照射引起的海馬依賴的學(xué)習(xí)和記憶力損害及焦慮水平的影響。檢測(cè)結(jié)束后,BrdU標(biāo)記大鼠(18只)進(jìn)行BrdU/NeuN免疫熒光染色,觀察藥物對(duì)20 Gy全腦照射后海馬神經(jīng)發(fā)生的作用。
　　結(jié)果:在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中,照射2個(gè)月后照射組大鼠

4、找到隱匿平臺(tái)的潛伏期較照射聯(lián)藥組、各對(duì)照組均明顯延長(zhǎng)(P<0.05),照射聯(lián)藥組大鼠與各對(duì)照組的潛伏期無(wú)顯著差異(P>0.05)。全腦照射3h后即造成大量海馬新生神經(jīng)元凋亡(DCX+/Casp-3+細(xì)胞)(P<0.05),6h后照射聯(lián)藥組的海馬新生神經(jīng)元凋亡水平較照射組降低了75％(P<0.05)。20Gy照射2個(gè)月后,照射組與照射聯(lián)藥組的海馬新生神經(jīng)元較各對(duì)照組均明顯減少(BrdU+/NeuN+細(xì)胞)(P<0.05),兩組間相比未見顯