CD105和D2-40在胰腺癌組織中的表達(dá)及熊果酸對胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1作用的研究.pdf

1、目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)對人胰腺癌細(xì)胞PANC-1的生長抑制作用并探討其作用機(jī)制,并且分析相關(guān)基因在胰腺癌組織中的表達(dá)。
　　 方法:使用不同濃度的UA處理人胰腺癌細(xì)胞PANC-1,采用MTT法測定UA對PANC-1細(xì)胞的生長抑制作用、流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期改變和細(xì)胞凋亡；Hoechst33258熒光染色、透射電鏡等方法觀察給藥前后細(xì)胞的形態(tài)變化；RT-PCR檢測UA處理PANC-1細(xì)胞前后的基因表達(dá)水

2、平變化。應(yīng)用組織芯片和免疫組織化學(xué)染色方法檢測胰腺癌中p53、EphA2、VEGF、CD105和D2-40的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:UA對PANC-1細(xì)胞生長具有明顯的抑制作用,且此作用呈明顯的時(shí)間、劑量依賴趨勢。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示,UA可以誘導(dǎo)人胰腺癌PANC-1細(xì)胞凋亡；Hoechst33258熒光染色、透射電鏡觀察證實(shí)UA可以誘導(dǎo)PANC-1細(xì)胞發(fā)生凋亡。RT-PCR分析結(jié)果顯示UA(40μmol/L)作用于胰腺癌PANC

3、-1細(xì)胞,可以調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá),上調(diào)p53的表達(dá),下調(diào)EphA2和VEGF的表達(dá)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示胰腺癌組織中p53、EphA2和VEGF的陽性表達(dá)增加,并且分別和用CD105標(biāo)記的MVD均值呈正相關(guān)；p53、EphA2的陽性表達(dá),分別和D2-40標(biāo)記的LVD均值呈正相關(guān)。
　　 結(jié)論:UA能明顯抑制人胰腺癌細(xì)胞PANC-1的生長,并誘導(dǎo)其凋亡,這種作用可能與p53的表達(dá)變化有關(guān),并且UA能使EphA2和VEG