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1、多氯聯(lián)苯(Polychlorinated biphenyl,PCBs)和多溴聯(lián)苯醚(Polybrominated diphenyl,ethers,PBDEs)是典型的持久性有機(jī)污染物,它們的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、難以自然降解,能在環(huán)境中長(zhǎng)期存在并隨食物鏈等級(jí)的升高而放大進(jìn)行生物富集。許多研究證實(shí),PCBs和PBDEs暴露對(duì)野生動(dòng)物和人的生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生影響。其中對(duì)生殖系統(tǒng)的影響最受關(guān)注,這兩種物質(zhì)均能使雄性鼠的性腺出現(xiàn)退行性
2、變化,進(jìn)而影響雄性的生殖功能。 本試驗(yàn)以非洲爪蟾為模型生物,研究PCBs和PBDEs對(duì)非洲爪蟾生長(zhǎng)發(fā)育和性腺發(fā)育的影響,并初步探討其影響機(jī)制。 [方法]:非洲爪蟾蝌蚪從46/47階段開(kāi)始暴露不同濃度的各暴露物直到變態(tài)后1個(gè)月,然后在無(wú)暴露物的情況下再飼養(yǎng)2個(gè)月。暴露期間每天觀(guān)察蝌蚪的生長(zhǎng)發(fā)育情況,記錄變態(tài)百分?jǐn)?shù)以及變態(tài)時(shí)間。非洲爪蟾變態(tài)3個(gè)月后將其解剖,稱(chēng)體重及肝重、統(tǒng)計(jì)性別比例、爪蟾取性腺觀(guān)察性腺形態(tài)以及組織學(xué)結(jié)構(gòu)。取
3、PCB和PBDE聯(lián)合暴露組雄性非洲爪蟾的性腺以及腦提取總RNA,反轉(zhuǎn)錄后擴(kuò)增雌激素受體(Estrogen rcceptor,ER)、雄激素受體(Androgen receptor,AR)、芳香化酶(Aromatase,Aro)等,與對(duì)照組作比較,統(tǒng)計(jì)PBDE和PCB暴露對(duì)以上3種特異性基因表達(dá)水平的影響。 [結(jié)果] 1.5μg/L PCB-118和5μg/L OH-PCB未對(duì)非洲爪蟾的體重以及肝重產(chǎn)生顯著影響。5μg/L
4、 OH-PCB能使雄性非洲爪蟾的比例顯著增加,但5μg,L PCB-118無(wú)此影響。在性腺組織學(xué)方面,兩種暴露物均不能使雌性非洲爪蟾的性腺組織結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,卻使雄性性腺發(fā)生退行性變化和雌性化,如睪丸組織結(jié)構(gòu)變得疏松、睪丸組織中出現(xiàn)早期卵等。在5μg/L OH-PCB暴露組中,睪丸組織出現(xiàn)成熟的卵細(xì)胞。 2.PBDE-209暴露能使非洲爪蟾的變態(tài)時(shí)間延長(zhǎng)、體重減輕但對(duì)相對(duì)肝重沒(méi)有顯著影響。PBDE-209暴露引起非洲爪蟾雄性性腺出
5、現(xiàn)睪丸卵的比例增加,并且各PBDE-209暴露組雄性性腺均出現(xiàn)了組織結(jié)構(gòu)的改變,如睪丸發(fā)育不良:睪丸中只有少量的精原細(xì)胞或者睪丸中精原細(xì)胞非常多而其他各期的精母細(xì)胞以及精細(xì)胞較少。而10μg/LPBDE-209暴露使睪丸中出現(xiàn)了成熟卵。 3.PCB-118暴露使睪丸組織發(fā)育不良,出現(xiàn)較多的體細(xì)胞。而PBDE暴露使雄性爪蟾睪丸中出現(xiàn)早期卵,并且出現(xiàn)死亡的精細(xì)胞。PBDE和PCB聯(lián)合暴露只是使睪丸中出現(xiàn)死亡的精細(xì)胞。基因表達(dá)結(jié)果顯示
6、:PCB-118暴露能顯著增加AR以及Aro的表達(dá)水平對(duì)ER表達(dá)影響不明顯;PBDE-209暴露能顯著引起腦內(nèi)AR,ER以及Aro的表達(dá)水平升高;PCB與PBDE聯(lián)合暴露除了使腦和性腺內(nèi)AR表達(dá)水平顯著減少外,對(duì)其他兩個(gè)基因的表達(dá)沒(méi)有顯著影響。各暴露物對(duì)非洲爪蟾性腺內(nèi)基因表達(dá)的影響:PCB-118能使睪丸內(nèi)AR的表達(dá)水平顯著升高。PBDE-209能使ER和Aro的表達(dá)水平增加,對(duì)AR基因的表達(dá)則沒(méi)有顯著影響。PCB和PBDE聯(lián)合暴露使性
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