基于絲網(wǎng)印刷技術(shù)的血乙醇脫氫酶電極的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的 酒精性肝病的發(fā)生與乙醇(酒精)消費(fèi)量，即日均飲酒量及濫飲酒有關(guān)。研究表明，人日飲酒50克，連續(xù)5年以上，可造成肝損傷。飲酒量和持續(xù)時(shí)間與酒精性脂肪肝的發(fā)生有直接關(guān)系，而與酒的種類關(guān)系不大。如果飲酒量大于50～120克／天，則發(fā)生率增長5～25倍；若飲用純酒精300克／天，7天后可出現(xiàn)脂肪肝。酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)理是進(jìn)入體內(nèi)的酒精90％在肝臟代謝，它能影響脂肪代謝的各個(gè)環(huán)節(jié)，最終導(dǎo)致肝內(nèi)脂肪堆積。因此，檢測(cè)人體血乙醇濃度，對(duì)

2、酒精性肝病的防治有重要的意義。 另一方面，隨著交通運(yùn)輸業(yè)的迅猛發(fā)展，機(jī)動(dòng)車和擁有駕駛執(zhí)照的人員數(shù)量迅速增長，交通事故頻繁發(fā)生，其中因駕駛員飲酒與醉酒造成的交通事故大約占20％。長期以來，由于我國一直沒有一種簡便、快速、準(zhǔn)確和定量檢測(cè)血乙醇濃度的方法及其檢測(cè)儀器。當(dāng)酒后駕車人員面臨交通警察處罰時(shí)，還“理直氣壯”地要定性處罰證據(jù)。 目前，血乙醇濃度檢測(cè)的主要方法有頂空色譜法、分光光度法、呼氣法和固化酶電極法等。項(xiàng)空色譜法和分

3、光光度法是血乙醇濃度分析的較好的方法，頂空色譜法還是參考標(biāo)準(zhǔn)方法，但均需要血漿或血清樣本，因此要進(jìn)行復(fù)雜的樣本預(yù)處理，受試者必須到醫(yī)院或?qū)I(yè)機(jī)構(gòu)抽取靜脈血，檢測(cè)時(shí)間較長，給受試者和臨床檢驗(yàn)者帶來極大不便。呼氣法不需樣本預(yù)處理，不必到醫(yī)院或?qū)I(yè)機(jī)構(gòu)抽取靜脈血，但屬于乙醇濃度測(cè)試篩選法，如果測(cè)試失敗，仍需受試者到醫(yī)院或?qū)I(yè)機(jī)構(gòu)抽取靜脈血檢查。固化酶電極法不需樣本預(yù)處理，但其工作條件苛刻、保存時(shí)間短和重復(fù)性、可靠性、一致性、批量生產(chǎn)工藝等問題

4、有待解決。 本論文將絲網(wǎng)印刷技術(shù)、無試劑型介體酶技術(shù)、厚膜技術(shù)與電生物化學(xué)方法相結(jié)合，研究血乙醇脫氫酶電極，用來定量測(cè)定血乙醇的濃度，探討研制性能良好的血乙醇脫氫酶電極的條件及其影響因素，為盡快建立一種血乙醇方便、準(zhǔn)確、快速檢測(cè)新方法提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 方法 (1)采用葡萄糖一銀氨化學(xué)還原法對(duì)薄片電極鍍銀； (2)采用絲網(wǎng)印刷技術(shù)印刷基礎(chǔ)電極(工作電極、對(duì)電極、參比電極)； (3)采用準(zhǔn)確滴涂方法固定

5、血乙醇分析液； (4)采用循環(huán)伏安法優(yōu)化影響血乙醇脫氫酶電極性能的條件； (5)采用循環(huán)伏安法確定血乙醇脫氫酶電極的保存時(shí)間。 結(jié)果 (1)鍍銀薄片電極減少電極的電阻，電極導(dǎo)電性能良好； (2)絲網(wǎng)印刷技術(shù)表現(xiàn)出廉價(jià)、重現(xiàn)性好、集成化和便于批量生產(chǎn)； (3)血乙醇脫氫酶電極性能影響條件優(yōu)化后結(jié)果：酶電極的最佳工作電位：290mV(vs．Ag／Agcl)；響應(yīng)時(shí)間小于50s；在0．05-4．